146380. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nagytisztaságú kristályos bilirubin előállítására

2 146.380 ben tartalmazza. így az oldószeres kivonatolás maradéka bílirubinban lényegesen gazdagabbá válik, mert a csapadék kivonatolására az oldószer szelektívebb. Ez teszi lehetővé azt, hogy az anyagveszteséggel járó komplikált tisztítási műveletek helyett, egy lépésben, közvetlenül nagy tisztaságú kristályos bilirubint nyerjünk. Ezt az eredményt alátámasztja a bilirubinnak az a fizikai sajátsága is, hogy adott oldószerben való oldékonysága a kísérő szennyezőanyagok mennyiségének függvényében nagymértékben növekszik. Oldószerként általában a bilirubin ismert oldószereit használjuk, mint kloroform, klórbenzol, triklóretilén stb. A kivonatolás ugyancsak az alkalmazott oldószer forrpontján történik, mint az ismert eljárásokban. Ezzel az eljárással lehetővé válik az egyébként előnyös kloroform biztonságos felhasználása is, míg az irodalomban erre számos ellentmondó adat szerepel. Jóllehet eljárásunkat sertésepéből való bilirubin előállítása kapcsán ismertettük, természetesen az eljárás más bilirubin kitermelésre alkalmas epére is alkalmazható. Példa: 50 kg friss vagy kálciumhidroxiddal és nátriumbiszulfittál tartósított sertésepét intenzív keverés közben 1:1 hígítású cc. sósavval szobahőmérsékleten pH 2-re savanyítunk. A kivált narancsbarna színű csapadék gyorsan elkülönül a szupernatanstól és attól dekantálással elkülöníthető. A keletkezett, nedvesen kb. 10 kg körüli csapadékot minden további kezelés nélkül újabb 1,5% nátriumbiszulíit jelenlétében 30 liter Moroformmal 2 órán keresztül, keverés közben forraljuk. Szobahőmérsékletre történt lehűtés után az alul elhelyezkedő klorofromos réteget elkülönítjük. AÜ extrakciót 30 liter kloroformmal az előbbiek szerint szükség szerint megismételjük. Az egyesített kloroformos kivonatot szűrjük, majd bepárlással térfogatának 1/10-ére töményítjük be. A maradékot vákuumbepárlással oldószer-mentesítjük. Az így nyert kb. 1,0—1,3 kg súlyú vörösbarna színű csapadékot metanolos, vizes és éteres digerálással tisztítjuk. Kitermelés 22,5 g pro uso scientifico tisztaságú kristályos bilirubin. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás bilirubin előállítására friss, ill. kálciumhidroxiddal és nátriumbiszulfittal, isimert módon, tartósított epéből, amelynél a bilirubint sósavas leválasztással reduktív közegben csapadékba visszük át és a bilirubint a csapadékból elkülönítjük, melyre jellemző, hogy a sósavas csapadékot a bilirubin ismert oldószerével forralva közvetlenül kivonatoljuk, majd az oldószer lepárlása után visszamaradt anyagot a kísérő ballasztanyagoktól éter-alkoholos digerálással megtisztítjuk és az oldatlanul visszamaradt kristályos bilirubiht izoláljuk. 2. Az 1. alatti eljárás kiviteli módja, melyre jellemző, hogy sertésepéből indulunk ki és kivonatolószerként kloroformot alkalmazunk. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója. 6057. Terv Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utca 21-23.