146306. lajstromszámú szabadalom • Eljárás oxitetraciklin erjesztéses oldatból való elkülönítésére

£' Megjelent: 1960. március 15. ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS 146.306. SZÁM 12. o. 25. OSZTÁLY — GO—623. ALAPSZÁM SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Eljárás oxitetraciklin erjesztéses oldatból való elkülönítésére Gyógyszeripari Kutató Intézet, Budapest Feltalálók: dr. Gyimesi József, Kasszán Béla, Senkariuk Vladimir és Bródy Miklós A bejelentés napja: 1958. május 15. A GO—548. sz. szabadalom eljárást ismertet oxitetraciklinnek erjesztéses oldatokból való lecsapására csersavval. Kísérleteink során kitűnt, hogy az oxitetraciklin tartalmú csapadék mennyiségét fokozhatjuk, ha a csersavas lecsapást alkáliföldfémsók, mint kalcium-, stroncium-, bárium- és magnéziumsók jelenlétében . végezzük. Különösen előnyösnek bizonyult a kalciumsó, pl. kalciumklorid alkalmazása. A GO—548 sz. szabadalom szerinti eljárás példája értelmében az erjesztéses oldatban, melyet előzőleg oxálsavval savanyítottunk meg, a csersavas lecsapás után 480 gamma/ml oxitetraciklin marad oldatban. Ha azonban a csersavas lecsapás előtt az oldathoz kalciumkloridot adunk, az oxitetraciklint tartalmazó csapadék nyeredéke lényegesen növekszik és 1% kalciumklorid jelenlétében mindössze 20—30 gamma/ml oxitetraciklin marad az oldatban. A találmány értelmében az oxitetraciklin csersavval való lecsapását 0,01%-nál nagyobb mennyiségű alkáliföldfémsó jelenlétében foganatosítjuk. A lecsapást célszerűen 0,1 és 2% közötti koncentrációjú alkáliföldfémsót tartalmazó oldatban végezzük. A lecsapáshoz legelőnyösebben kalciumsót, pl. kalciumkloridot használunk. A pH értéket előnyösen 8-tól 9-ig terjedő értékre állítjuk be. A különböző alkáliföldfémsók hatásának megvizsgálására a kalciumkloridot 1%-nyi mennyiségben alkalmaztuk. A bárium-, stroncium- és magnéziumkloriddal végzett kísérleteknél azokat az 1%-os kalciumkloriddal egyenértékű mennyiségben oldottuk fel a szűrt erjesztéses oldatban a csersavval való lecsapás előtt. A lecsapáshoz annyi 10%-os csersav oldatot vettünk, hogy az erjesztéses oldat csersavra 1%-os legyen. Miután az erjesztéses oldatot a különböző alkáliföldfémsókkal íentí módon kezeltük és a csersavas oxitetraciklin -rsapadékot leválasztottuk, szűrés után a visszamaradt tiszta oldat a következő oxitetraciklin mennyiségeket tartalmazta: kalciumklorid esetén 20— 30 gamma/ml-t bariumklorid esetén 89— 90 gamma/ml-t stronciumklorid esetén 100—110 gamma/ml-t magnéziumklorid esetén 150—160 gamma/ml-t Az oxitetraciklin leválasztását előre elkészített csersavas alkáliföldfémsóval mint adszorbenssel is el lehet végezni. A találmány szerinti eljárás kivitelére az alábbi példákat adjuk meg. 1. Az oxitetraciklin erjesztéssel készült oldatát oxálsavval pH 2,5-re savanyítjuk és szűrjük. Az oldatot, mely 1600—2000 gamma/ml oxitetraciklint tartalmaz, 5 n nátronlúg oldat hozzáadásával semlegesítjük, annyi szilárd kalciumkloridot adunk hozzá, hogy mennyisége az oldat térfogatára számítva 1% legyen, majd 10%-os csersav oldatot adunk hozzá annyit, hogy utóbbi koncentrációja 1% legyen. További lúg hozzáadásával az oldat pH-ját 8—9-re állítjuk foe, majd a keletkező csapadékot az oldattól szűréssel elkülönítjük. A szűrlet oxitetraciklin tartalma 20—30 gamma/ml. 2. Az 1. példában ismertetett módon járunk el, azzal a különbséggel, hogy kalciumklorid helyett báriumklorid dihidrátot alkalmazunk (1 g kalciumklorid 2,2 g bariumklorid dihidráttal ekvivalens). A szűrlet oxitetraciklin tartalma 80—90 gamma/ml. 3. Kristályos oxitetraciklint (hidrokloridot) desztillált vízben feloldottunk oly mennyiségben, hogy az ml-ként 1600 gammát tartalmazott. Az oldathoz ugyanolyan mennyiségű 10%-os csersav oldatot adtunk, mint az 1. példában. Az oldatból az oxitetraciklin csapadék nem vált ki, úgyhogy az oxitetraciklin teljes mennyisége oldatban maradt. 1% kalciumklorid hozzáadására az 1. példában ismertetett eredmények adódtak. 4. Csersav és kalciumklorid vizes oldatából a pH-t 8—3 közé állítva csapadékot képezünk, majd szűrés és mosás után a csapadékot megszárítjuk. Porítás után a finom porszerű anyagból 20 g-ot vízben szuszpendálva kromatografáló üvegcsőbe