145713. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fermentációs levek tisztítására, különösen cianokobalaminok kinyerésére
2 145.713 kalmas, amely a kinyerendő anyagot megköti. Így pl. aktív szén, derítőföld, Fuller-föld, bentonit, sóoldataikból frissen leválasztott aromás karbonsavak stb. Az adszorpció kivitelezési módja az adszorbens természetének megfelelően változhat (bekeverés, oszlopon való átfolyatás stb.). Az adszorpció egyéb körülményei (pH, hőfdk) szintén az adszorbenstől és a kinyerendő anyag sajátságaitól függően változhatnak, a lényeg csak az, hogy a kinyerendő anyag oldatba vivése előtt és után alkalmazott körülmények azonosak legyenek. Példák: 1. 200 ml kukoricalekvár-glukóz-CaCOa -tartalmú táptalajon, 25°-on egy hétig tenyésztünk Propionibacterium Shermaniit. Ekkor a pH-t sósavval 3-ra állítjuk be, 4 g nagytétényi derítőföldet adunk a tenyészethez és egy óra hosszat rázógépen rázatjuk az anyagot. Rövid centrifugálással elválasztjuk a durva üledéket és a folyadék^fázist leszívjuk róla. Ezt a folyadékot pH 4,5-re állítjuk be NaOH-val és egy óra hosszat 100°-on tartjuk, majd a pH-t ismét 3-ra állítjuk be sósavval, 0,6 g derítőföldet adunk hozzá és ismét egy óra hosszat rázatjuk rázógépen. A derítőföldet lecentrifugáljuk, savanyú vízzel átmossuk és újra centrifugáljuk. A lecentrifugált derítőföldről az adszorbeált kobalaminokat pH 7,8 mellett NaCN-ot tartalmazó 66—70%-os vizes etanollal leoldjuk azáltal, hogy a derítőföldet a leírt folyadék 100 ml-ével egy óra hosszat rázatjuk rázógépen. Szűrés után halvány sárga oldatot kapunk, mely a kiindulási anyagban E. coli lemezes módszerrel meghatározott B12^itamin-aktivítás 86%-át tartalmazza. 2. 100 L. savval hidrolizált keményítőt, kukoricalekvárt és CaCOs -at tartalmazó táptalajon, 25°on egy hétig tenyésztett Propionibacterium Shermanii tenyészethez 2% nagytétényi derítőföldet adunk és egy óra hosszat keverjük pH 3—4 mellett. 18 órai üllepítés után az üledékimentes részt szivornyán leszívjuk, felfőzzük és egy órán keresztül 100°-on tartjuk. Lehűlés után 300 g derítőföldet adunk hozzá, egy óra hosszat keverjük és az üledéket nuccson felfogjuk. Az üledéket több részletben, összesen 10 L. NaOH-tartalmú pH 8-as 66%-os vizes etanollal extraháljuk. A fermentációs lében eredetileg meghatározott B12-vitamin-aktivítás 78%-át nyerjük vissza igen halványan sárgás oldatban. A további feldolgozás a szokásos ismert módszerek bármelyikével történhetik. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás mikroorganizmusokhoz kötött anyagok kinyerésére fermentációs levekből, amelyekre jellemző, hogy a fermentációs levet pH 2 és pH 8 között, 40 C° alatti hőmérsékleten adszorbenssel kezeljük, majd az oldatból megkötött szennyezéseket tartalmazó adszorbens eltávolítása után a mikroorganizmusokhoz kötött kinyerendő anyagot kötéséből felszabadítjuk és így oldatba visszük, majd az adszorpciót az előbbivel azonos körülmények közt megismételve a kinyerendő anyagot adszoribeáltatjuk. 2. Az 1. igénypontban meghatározott eljárás foganatosítási módja, amelyre jellemző, hogy cobalaminokat termelő baktériumok fermentációs levéből nyerünk ki cobalaminokat, így pl. a Propionibacterium, Corynebacterium, Bacillus, Rhizobium, Metanoibaeter családba tartozó baktériumok fermentációs levéből. A kiadásért felel a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 593409. Terv Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utca 21-23.
