144524. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hasnyálmirigyből előállított elasztolitikus enzimkészítmény egyes enzimkomponenseinek szétválasztására

144-524 3 dattól elkülönítjük, 15 térfogat %-os vizes acetonnal mossuk, majd szárítjuk. A kollagénrnukoproteináz elkülönítésekor kapott fölöttes léből az elasztázt úgy nyerjük, hogy — alacsony hőmérsékleten — az oldat aeetonkoncentrációját először 25—35 térfogat %-ra emeljük, majd az itt kicsapódó középfrakciót elkülönítjük; az így nyert oldatból azután az acetonkoncentráció további emelésével 60 térfogat % acetonkoncentráció jelenlétében választjuk le az elasztázt. A centriftígálással kiülepített proteolitikus enzimet 60 térfogat %-os vizes acetonnal mossuk, végül abszolút szerves oldószerekkel, vagy vizes oldatából fagyasztott állapotból szárítjuk. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás hasnyálmirigyből előállított elasztolitikus hatású enzimkészítmény egyes enzimkomponenseinek szétválasztásaira, melyre jellemző, hogy az enzimkészítményt vízzel elegyedő szerves oldószer híg vizes, savanyú kémhatású oldatában oldjuk, majd az így kapott oldatban a szerves oldószer koncentrációjának növelésével a mukolitikus enzimet kicsapjuk és elkülönítjük, ezután az oldószer töménységének további növelésével az elasztázt csapjuk ki és különítjük el. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, melyre jellemző, hogy a mukolitikus enzim kicsapása után a szerves oldószer töménységét növeljük, de csak olyan .mértékben, melynél az elasztáz főtörnege még nem csapódik ki és ily módon hatástalan fehérjéket és kismennyiségben kollagénmukorproteinázt és elasztázt tartalmazó középfrakciót különítünk el, majd az oldószer töménységének további növelésével az elasztázt csapjuk ki és a folyadéktól elkülönítjük. 3. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, melyre jellemző, hogy a mukolitikus enzim elkülönítése után a középfrfekciót 40—60 térfogat % etil-, vagy metilalkohol, illetve 25—35 térfogat % acetonkoncentráció jelenlétében nyerjük. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás változata elasztolitikus hatású enzimkészítményben levő különböző enzimek szétválasztására, melyre jellemző, hogy az enzimkészítményt vízzel elegyedő szerves oldószer híg vizes, savanyú vegyhatású oldatával oldjuk, majd az így kapott oldatban a szerves oldószer koncentrációjának növelésével a mukolitikus enzimet kicsapjuk és elkülönítjük, ezután a szerves oldószer töménységét pl. az oldószer ledesztil-Iálásával csökkentjük, majd a vizes oldatból az elasztáz adszorbensen megkötjük, ezt követőleg az adszorbensről sót tartalmazó vízzel elegyedő szerves oldószerrel leoldjuk, az oldatból a szerves oldószer töménységének növelésével kicsapjuk, végül az enzimet a folyadéktól elkülönítjük ás szárítjuk. 5. Az 1—4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, melyre jellemző, hogy kiindulási anyagként az elasztolitikus enzimkészítmények 1—6, előnyösen 2—4%-os oldatát használjuk. 6. Az 1—5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, melyre jellemző, hogy az enzimkeveré'k vizes oldatának hidrogénion-koncentrációját pH 7,0—4,0 értékek közé, előnyösen mintegy pH 5,0-re állítjuk ibe. 7. Az 1—6. igénypontok szerinti eljárás foganatosítási módja, melyre jellemző, hogy puff érként az alkalmazott oldószerekben oldódó anyagokat, pl. kálmmbiftalátO't, ammóniumkloridot, ammóniumacetátot nátriumacetátot stb. alkalmazunk. 8. Az 1—7. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, melyre jellemző, hogy szerves oldószerként alacsony szénatomszámú alkoholt, célszerűen metilalkoholt, vagy etilalkoholt, illetőleg acetont használunk. 9. Az 1—8. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, melyre jellemző, hogy a mukolitikus enzimet, a kollagénmukoproteánázt 20—25 térfogat % metilalkohol, vagy etilalkohol, illetőleg 15—20 térfogat % acetonkoncentráció jelenlétében, a proteolitikus enzimet, az elasztázt pedig 60—85 térfogat %, előnyösen mintegy 78 térfogat % etanol, vagy metanol, illetőleg 35 és 55 térfogat % acetonkoncentráció értékek között választjuk le. 10. Az 1—9. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, melyre jellemző, hogy az elasztolitikus hatású enzimoldat frakcionálását, a kollagénrnukoproteináz és az elasztáz szétválasztását alacsony hőmérsékleten, előnyösen —2 és —8 C° között végezzük. 11. Az 1—slO. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, melyre jellemző, hogy a szétválasztott enzimeket abszolút oldószerekkel, vagy sósvizes oldatukból fagyasztott állapotból szárítjuk. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója. 1481. Terv Nyomda, 1959. — Felelős vezető: Gajda László