143896. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szteroidok biooxidálással átalakított termékeinek kinyerésére a fermentátumból

Megjelent: 1958. január hó 15-én. ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS ,143.896. SZÁM 30. h. 1—8. OSZTÁLY — GO-400. ALAPSZÁM Eljárás szteroidok bioexiriálással átalakított termékeinek kinyerésére a fermentátumbóf A Magyar Állam, mint a Gyógyszeripari Kutató Intézet (Budapest) jogutódja. Feltaláló: dr. Rados Márta A bejelentés napja: 1954. december 4. Ismeretes, hogy bizonyos szteroidok megfeleld mikroorganizmusok jelenlétéiben jellegzetes oxidációs termékekké, alakulnak át, amelyek — mint hormonok — a gyógyászatban alkalmazhatók, vagy pedig közbeeső termékek gyógyászatilag fontos hormonok előállításához. Pl. progeszteronból Rhisopus nigricans hatására 11-ojáprogeszteron, a Reichstein-féle S-anyagból ugyancsak Rhisopus nigricans hatására 21-acetoxy-zl 4-pregnen-3,20-dion -11, 17-díol progreszteronból Funarium-f éleségek hatására A l,4-ándros'tadien-5,17-dion. keletkezik. Az előbbiek közbeeső terméke Cortison, az utóbbi pedig ösztron . összeállításához. Szteroidok biooxidálásával átalakított termékeinek kinyerése a f érmen tátumból általában úgy történik, hogy a fermentátumot a micéliumtól meg•szűrik, majd az oldatot meghatározott pH értékre beállítiák, azután szerves oldószerekkel például metilénklorididal kivonatolják. Általában kis szteroid anyagmennyiségről és nagy térfogatú folyadékról van szó, úgy hogy a szterin mennyiségéhez képest igen nagy mennyiségű oldószert kell használni. A találmány olyan eljárás szteroidok biooxidálásával átalakított termékeinek kinyerésére, amelynél a fermentátumiból a szteroid-származék kinyerésére az eddigi eljárásokkal szemben nem alkalmazunk szerves oldószert, ami nemcsak lényeges oldószer-megtakarítást jelent, hanem az eljárás is egyszerűbbé válik. A találmány értelmében a szteroidok biooxidálásánál adódó fermentátumot adszorbeáló hatású szilárdanyagrészecskékker hozzuk össze, az adszorbeáló anyagot a folyadéktól elkülönítjük és az adszorbeáló anyagról a szteroid származékot szerves oldószerrel leoldjuk, majd az oldószertől elkülönítjük. - A találmány értelmében továbbá adszorbeáló anyagként savval, előnyösen sósavval aktivált bentonitot használunk. A találmány értelmében, továbbá a fermentátumot a micéliumtól való elkülönítés nélkül hozzuk össze az adszorbeáló anyaggal. Az adszorbeálást pH 4, 5—8, előnyösen pH 6 körüli érték mellett végezzük. A fermentátumra számítva, célszerűen 5—10%-nyi mennyiségű' bentonitot alkalmazunk. A 'bentonitról történő leoldáshoz célszerűen alkoholt, vagy acetont használunk. Az így kapott oldatot besűrítjük és az átalakított szteroid származékot pedig vízben nem oldódó oldószerekkel, például kloroformmal, metilénkloriddal vesszük fel. Az irodalomból ismeretes ugyan, hogy ösztron kinyerésére vizeletből 'használnak különböző adszorbenseket, mint pl. benzoesavat, szenet stb. A fermentációs lé azonban egész más természetű és összetételű oldat mint a vizelet, azonkívül az ösztron is különbözik azoktól a szterinszármazékoktcl, amelyek a fermentációs lében vannak, mert az ösztron az A gyűrűben aromás, míg a szóbanlevő szterinszármazékokban nem. Egyáltalán nem volt előrelátható, hogy az ösztrontól különböző szterinek . fermentált léből adszorbensekkel kivonhatók. A találmány szerintii eljárás foganatosítására az alábbi példákat adjuk meg: 1. Példa. 15 liter fermentátumot a micelium leszűrése nélkül pH 6-ra állítunk be. Az oldat 3 g progeszteronnak megfelelő zl l,4-androstadien-3,17-dion-t és egy túloxidált terméket, valószínűleg A 1-dehidrptesztololaktont tartalmaz. A fermentátumhoz 1500 g nagytétényi aktivált bentonitot adunk és azzal 4 órán keresztül keverjük. Ezután a bentonitot a folyadéktól szűréssel elkülönítjük, vízzel mossuk, a jól leszívatott anyagot még nedvesen 7 liter acetonnal 3 részletbem forrón kivonatoljuk, majd vizes aeetonos oldatot, mintegy 500 ml-re pároljuk be. A bepárolt folyadékot 4 x 250 ml kloroformmal kivonatoljuk, a kloroformos oldatot vízzel mossuk, majd bepároljuk. A bepárlási maradékból a A l,4-androstadien-3,17-dion a szokásos módon nyerhető ki. Például úgy, hogy a maradék súlyára számított 5—6-szoros mennyiségű Brockmann alumíniumoxidra rávisszük a nyers terméket és petroléter-benzollal (2:3) eluáljuk róla a tiszta A.1,4-