143625. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fehérje-hidrolizátumok előállítására
2 143.625 Jobb összetételben tartalmazza és emellett pirogénmentes. 1 feg fehérje számított milliekvivalens értéke 6500—7500 között ingadozik, a felhasználandó gyanta mennyiségét pedig kapacitásértéke szabja meg. A pH-érték optimuma a hidirolizálandó fehérje és az alkalmazásira kerülő kationcserélő gyantáieleség függvénye. Kísérleteink szerint Dowex 50 jelű gyanta esetén az optimális érték pH = 2—2,5. A találmány szerinti eljárás elénye abban van, hogy egyetlen meghatározott hidrolízissel kiküszöböljük a korábbi eljárásokban külön műveletként elvégzendő difearbonsavmentesítést, az esetleg további külön műveletiként elvégzendő pirogénimenitesítésit és esetleg — ha a triptofán a hidrolízis folyamán leborhlott — a külön triptofán adagolását. A hidrolízist a találmány szerint célszerűen úgy végezzük, \hogy a fehérje vizes ' szusapenzióját az ioncserélő gyantával együtt, sósavval 1,5—3 közé beállított pH értéken, a forráspontot megközelítő hőmérsékletre, előnyösen 90—100 C°-ra hevítjük)és több órán át ezen a hőmérsékleten tartjuk. ÍJy módon pl. fibrinből, .mely kb. 27%-ban tartaítóaz aminoditoaribonsavakat, száraz anyagra saápiított mintegy 5—7 súlyszázalék aminodikairb'onsavait tartalmazó hidroldzátumot tudunk előállítani. Májbál, melynek aminodifcaribonsav^ai^alma 19%, kb. 5% ammodikiarbonsavat tartalmazó aminosavfkomplex nyerhető. ( A találmány szerinti eljárás Részleteinek szemléltetésére az alábbiakban példát közlünk, melyben az ioncserélő műgyanta Mennyiségén kívül az egyéb tényezőket a célnaflíi: megfelelően módosítani lehet. Más fehérjék ihi,arolízisénél a példában közöltekkel analóg módon járunk el. Példa. ' Fibrin-hidirolízis. / Vissziafolyató hűtővel és keverővel felszerelt 300 literes savállóacél vagy/savállóan zománco/' A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója zott duplifeátorban 2,5 kg száraz fibrinport és 8 liter H-ciklusban levő Dowex 50 jelű kationcserélő műgyantát 200 iliter desztillált víziben szuszpendálunk, 450 kcm tömény sósavat adunk hozzá (pH = 2,0) és az elegyet állandó keverés köziben, köpenygőzzel 100 C°-ra meiliegítjük és 48 órán át ezen a hőmérsékleten tartjuk. Az anyagot lehűtése után tárolótartályíba eresztjük le. A gyanta leülepedése után az amimodik'arbonsavakat tartalmazó folyadékrészt leszívatjuk és esetleg ismert módon glutaminsavra dolgozzuk fel, a visszamaradt gyantát pedig desztillált vízzel mindaddig mossuk, míg a lefolyó mosóvíz savmentes lesz. A jól kimosott gyantát ezután ioncserélő csőbe öntjük és az így kapott oszlopról 2 n amimioniaoldattal az aminosavakat leoldjuk. A kapott eluátumot előnyösen vákuumban végzett kiforralással ammoniamentesítjük, majd aktívszénnel melegen derítjük, végül a kihűlt oldatból kivált tirozint leszűrjük. Ily módon, szárazanyagra számítva, a fibrin súlyának kb. 60%-át kapjuk vissza kb. 16—20 százalékos' aminosav-oldat alakjában, mely a fibrin triptofán tartalmának mintegy 40%-át tartalmazza és ammodikarbonsav^tjartalma a szárazanyagnak mintegy 5%-a. Az oldat pirogénmentes, nem toxikus s így sterilezés után közvetlenül felhasználható infúziós célokra. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás fehérje^hidrolizátum előállítására erősen savas katirancserélő műgyantával savas közegben végzett hidrolízissel, melyre jellemző, hogy a hidrolízist a fehérjének aszparaginsav és glutaminsav mellőzésével számított milliekvivalens értékével azonos értékű gyantamennyiséggel végezzük és a pH^értéket úgy szabályozzuk, hogy az 1,5 pH-érték alá ne csökkenjen. 2. Az 1. alatti eljárás kiviteli módja, melyre jellemző, hogy a hidrolízist pH = 1,5—3, előnyösen pH = 2—3 értéken végezzük. 681. Terv Nyomda, 1957. — Felelős vezető: Bolgár Imre.