143609. lajstromszámú szabadalom • Eljárás oxitetraciklin előállítására fermentálással
Megjelent: 1957. augusztus hó 1-én. ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS 143.609. SZÁM 30. h 1—8. OSZTÁLY — Go-465. ALAPSZÁM Eljárás oxitetraciklin előállítására fermentálással A magyar állam, mint a Gyógyszeripari Kutató Intézet jogutódja. Feltalálók: dr. Horváth István és Vadkerty Tibor. Bejelentés napja: 1955. szeptember 1. Kísérelteínk során azt tapasztaltuk, hogy zsírszerű anyagok, mint olajok vagy zsírok jelenlétében a Streptomyces rhirnosussal végzett fermentálások vaskészülékben bizonyos esetekben jól mennek, máskor nem. A vaskészülékek a legolcsóbbak, ezért a gyakorlatban való használhatóságuk fontos. Ennek okát kutatva megállapítottuk, hogy 30—40 gamima/ml felüli vasionok jelenlétében az eltéréseket, egyébként azonos feltétel mellett, az alkalmazott zsírszerű anyagok mineműsége okozza. Mivel vasfermentorokban a vas mennyisége a táptalajban a -fentebbi határértéket a fermentálás folyamán meghaladja ,ezért az alkalmazott zsírok döntően be^ folyásolják az oxitetraciklin termelését. Azt találtuk, hogy száradó és félig száradó olajok alkalmazásánál növekvő vasmennyiség mellett a termelt oxitetraciklin mennyisége rohamosan csökken, míg telített olajoknál és zsíroknál a vastartalom lényegileg nem befolyásolja az eredményt, amint ez az alábbi kísérletekből kitűnik. Ezeket a kísérleteket 500 ml-es Erlenmeyer lom-Napraforgóolaj 130 870 860 Szójaolaj 127 760 640 Lenolaj 174 910 440 Pálmaolaj 52 840 710 Faggyú 50 780 870 Halolaj 132 800 720 Arachisolaj 96 780 . 780 Hidráit napraforgóolaj 87 430 430 Keményítettolaj 5 450 —• Pálmahéj olaj 15 540 600 A vasionok hatása valószínűleg azon alapszik, hogy a telítetlen zsírszerű anyagoknál peroxidok képzését katalizálja és ezek a per oxidok a fermentálást gátolják. Nem volt ismeretes, hogy a vasionok vizes szuszpenzióban a fermentálás hőmérsékletén a telítetlen kötéseket tartalmazó olajoknál a bikokban 100' ml táptalajjal végeztük síkrázógépen, melynek összetétele a következő volt: Szójaliszt 3 % Burgonyakeményítő 0,5% Konyhasó 0,3% Kukoricalekvár 0,1% Kalciumkarbonát 0,5% Zsírszerű anyag 0,4% A táptalajt 25 percig 120 C°-on sterilezzük, majd lehűlés után Streptomyces rhimosus-sal beoltottuk és rázóasztalon rázattuk. A beoltás előtt a lombiksorozatba 0, 20, 40, 60, 80, 100, 140, 180, 220 gamma vasat tettünk ml-enként vasszulfát alakjában. A fermentálás 48., 72., 96. és 120-ik órájában, tehát összesen négyszer 0,3% zsírszerű anyagot adagoltunk energiaforrásként, mely azonban levegőztetett készülékben habzásgátló anyagként is szerepel. Az erjesztés befejezte után megvizsgáltuk az oxitetraciklin tartalmat. Az alább felsorolt zsírszerű anyagok alkalmazása mellett a következő értékeket állapítottuk meg: 460 — 350 — — 360 320 390 — 350 — — 350 350 770 _ _ 540 — — 580 peroxid képződést, elősegítik, ami azután a fermentálást gátolja. Kísérletileg is kimutatható, hogy a különböző zsírszerű anyagok vizes szuszpenzióján levegőt átfúvatva eme anyagok jód-brómszáma egyébként azonos vastartalom .mellett annál jobban növekszik, minél telítetlenebb az olaj vagy zsír. gamma vas/ ml 40 60 80 100 120 140 160 gamma oxitetraciklin/ml 390 160 200 760 «7n 250 70 40 860 110 50 0 700 Q9.n 80 30 760 50 10 600 7Fin Zsírszerű Jód- Q 2Q 4Q 6Q 80 10Q 12Q 14Q 160 180 220 anyagok szám . J .,,.,, 390 160 200 760 870 510 360 430 570 660 110 80 — 50 — 30 10 50 30 — 10 — o — 0 _ _ . _ _ _ — 700 760 — 600 — 650 — 920 — — 750 — 750 — 300 — — 50 — 0 — 110 60 — — — — —
