143511. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tisztított tífusz-antigének előállítására Salmonella typhosa baktériumból
143.511 Az acetonban nem oldódó rész (III.) vízben szintén jól oldódik. A fenti anyagok antigén-tulajdonságainak toxicitásának és szenzibilizáló képességének vizsgálatai: Kontrollként a Salmonella typhosa eddig használatos triklórecetsavas kivonatát használjuk. Az egyes frakciókat olyan térfogatú fiziológiás konyhasó-oldatban oldjuk, mint amilyen térfogatú 25—30 milliárd/ml koncentrációjú baktériumszuszpenzióból nyertük az illető mennyiségű frakciót. I anyag O és Vi antigén keverékének bizonyult. Toxicitása harmadrésze a kontroll anyagénak. Jól immunizál mindkét antigénnel, de szenzibilizál. II anyag tiszta O antigén, nemi toxikus, jól immunizál. III anyag tiszta Vi antigén, nem toxikus, jól immunizál. 0 és Vi antigén az l-es anyagból diazotálás nélkül is szétválasztható: 1 sr. első anyag oldva 150 sr. desztillált vízben 2,8 térfogat 98%-os alkohollal kicsapva, pH 4,0-en. A csapadékot a fenti módon acetonnal és éterrel szárítjuk. (la) A felülúszó folyadékot a fenti módon bepároljuk és fenti módon szárítjuk. (Ib) Fenti módon végezve a szerológiai vizsgálatokat: I a. „O" antigén, jól immunizál, toxikus, szenzibilizál. I b. „Vi" antigén jól immunizál, gyengébben toxikus, szenzibilizál. Az anyagok antigén-tulajdonságának vizsgálata flokkulációval és nyúl immunizálással, a toxicitás vizsgálata egéren történt. Jól immunizáló „O" antigén legalább 1 : 3000 nyúlimmunsavót ad. Jól immunizáló „Vi" antigén 1 : 30 nyúMmmunsavót ad. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás tisztított tífusz-antigének előállítására Salmonella typhosa' baktériumból, a szárított és elölt baktériumtestek vizes szuszpenzióban történő enzimes (tripszínes) lebontásával, amelyre jellemző, hogy az enzimes lebontás és esetleges önmagukban ismert tisztítóműveletek után a nyers antigén vizes oldatához alkálinitritet és sósavat adunk és az elegyet 50 C°-ot meghaladó hőmérsékletre melegítjük, majd az esetleges keletkezett csapadék elkülönítése után az oldatból az antigént kinyerjük. 2. Eljárás az 1. igénypont szerinti vagy más ismert eljárással kapott, „O" és „Vi" antigént tartalmazó antigénelegyek szétválasztására, melyre jellemző, hogy az antigénelegy vizes oldatához vízzel keveredő szerves oldószert adunk 2 és 7 közötti pH értéken, a csapadékként kiváló „O" antigént elkülönítjük, a „Vi" antigént pedig az oldatból nyerjük ki bepárlás útján. 3. A 2. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, melyre jellemző, hogy az „O" antigén kicsapására. vízzel keveredő szerves oldószerként etilalkoholt cdkalmazunk. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója. 2987. Terv Nyomda. 1956. — Felelős vezető: Bolgár Imre