142183. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új antibiotikumok előállítására

2 142.183 A találmány erjesztő eljárásokat ölel fel, melyeknek lényege az, hogy asszimilálható szénhidrátforrásokat, nitrogént és szervetlen sókat tartalmazó tenyésztő közegben aktinomieetet tenyésztünk. A találmány szerinti erjesztő eljárásokkal kapcsolatban használt aktinomicetek a Streptomyces genus Actinomyeetales fajtájához tartoznak, a Bergey-féle Manual of Determination Bacteriology (6. kiadás) 938. oldalán közölt osztályozás szerint. A szervezet morfológiai tulajdonságai tekintetében közeli rokonságban látszik lenni a Waksman által Actinomyces 161 néven leírt aktinomices-szel (Soil Science 8, 71—214 (1919), melyet később Streptomyces erytihreus-nak identifikált. Mint az alábbiak-Dól kitűnik, bizonyos különbségek ál hak fenn a Waksman által leírt szervezet és a találmány szerint elszigetelt, új anyag között és így bizonyos kételyek forognak fenn az új anyag helyes identifikálása tekintetében. Azonban a jelen találmány szerint elszigetelt új anyagot ideiglenesen a Streptomyces erythreus törzseként osztályoztuk és ennek megfelelően a szervezetet Streptomyces erythreus, M5—12559 törzsnek identifikáltuk. A mikroszervezetet Iloilo városból (Iloilo állam, Fülöp-szigetek) kapott földből a következő eljárással különítettük el: A földnek próbadarabját steril, desztillált vízben szuszpendáltuk, a szuszpenziót nagy mértékben felhígítottuk és annak kis részét nutriens agáron kiteregettük. A lemezt fcb. 30 C°-otr, egy hétig inkubáltuk. A vékony, kemény, szétszórt Streptomyices erythreus-kolóniát platinkaccsal eltávolítottuk és kémcsőben ferdén elhelyezett agar beoltására használtuk fel, a szervezet nagyobb menynyi ségének termelésére. A találmányt alább a szervezet föntemlített törzsére való hivatkozással ismertetjük, de magától értetődik, hogy a találmány szerinti fermentáló eljárások nem korlátozódnak a Streptomyces erythreus M5—12551-törzs alkalmazására, hanem más Streptomyces erytihreüs-törzsek használatát is felöleli; ily törzsek könnyen tenyészthetők és a szokásos elkülönítő és törzs-módosító módszerekkel elszigetelhetők. Ezek a következők: a tönyésztetit szervezetek kiválasztása és módosító eszközöknek, mint röntgensugárzásnak, ibolyántúli fénynek és vegyszernek, pl. nitrogénmustárnak való kitétele. Más erythromycin-termelő törzsek szemléltető példái a következők: Streptomyces erythreus, M5 — 14642 és M5—14634. A szervezet mintái az Eli Lilly and Company, Indianapolis, Indiana (É. A. E. Á.) kutatólaboratóriumából szerezhetők be. A Streptomyces erythreus, M5—12559 törzset az alábbi fejezetekben kifejtett, számos fizikai, tenyé«zeltl és fiziológiai próba jellemzi. A színek megjelölésére főleg a Ridgway-féle (Color Standards and Nomenclature [1912]) rendszert használtuk. A nutriens agar-tápközegen tenyésztett Streptomyces erythreus, M5—12559-törzs elágazó miceliumot alkot, egyenes vagy szabálytalanul1

csavaroao láncok alakját feltüntető lineáris spórákkal, de általában nem kifejezett spirális elrendezésben. A tenyésztés tipikusan lassú, korlátolt és elégtelen ahhoz, hogy a legtöbb közegen mennyiségileg mérsékelje a tenyésztő közeggel változó, vegetatív és lineáris tenyészet viszonylagos bőségét. Közönséges, szintetikus agar-tápközegeken a vegecatív micelium elégtelen és lapos. A külszíni mice-Bum fehér por, mely mérsékelt mennyiségben van jelen. Amint a kultúra érik, a felszíni tenyészet halvány rózsaszínű lesz. Vörösesbarna-bőrszínű oldható pigmens képződik, mely ,a kultúra öregedésével mélyebbre hatol. , Ha a szervezetet komplex nitrogénforrásokat tar, talmazó agar-tápközegen tenyésztjük, a vegetatív mictiüum aránylag bőségesebb lesz, mint a fenszíni tenyészet. A vegetatív tenyészet jellegzetesen növekszik és hajlamos az agárba ha tolásra, A felszíni micelium ily tenyészetekben rendesen szétszóródott és fehér. A vörösesbarna-borszínű oldható pigmetisen kívül, számos komplex-közegen néhány barnu pigmens is keletkezik. A szervezet fiziológiailag igen hatásos. Kernéi nyítő és zselatin könnyen hidrolizál, ámbár kazein lakmusztej-tenyészetekben nem támadtatik meg. A legtöbb közönséges szénforrás jól használható fel tenyésztésre. A tenyésztés és sarjadzás szempontjából kb. 30—37 C° közötti hőmérséklet látszik optimálisnak. Mikroszkópiai morfológia A Streptomyces erythreus, M5—12559-törzs morfológiája a törzsnek szintetikus agáron és kalciummalat-agaron való tenyésztésénél a következő: Szintetikus agar Mérsékelten elágazó felszíni micelium konidioforokon keletkezett spórákkal, rövid, egyenes vagy szabálytalanul csavarodó és meghajlított láncok alakjában, de nem tipikus spirálisokban. A spórák tojásdad-alakúak és méretük kb. 0,5 X 0.8 f* kb. 0,8 X 1>0 /* "ig terjed. A Gram-festő reakció pozitív. Kalcium-malát-agar A megfigyelt mikroszkópiai morfológia azonos» azzal, melyet a szervezetnek szintetikus agáron való tenyésztésénél észleltünk, azzal az eltéréssel1

, hogy a spóraláncok erősebben hurkoltak vagy csavartak, de nem szabályos spirálisok. Tenyésztési jellegzetességek A szervezetnek több szabványos közegben észlelt tenyésztési jellegzetességeit a következő fejezetekben soroljuk fel: Szintetikus agar Mérsékelt vegetatív szaporulat, halványsárgaszln, mely oldható pigmens .erős színének hatására elsötétedik; fehér felszíni miceluim-teiiyészet, mely a tenyészet érésének mérvében halvány borvörös-színű árnyalatot vesz fe!;

; a mikroszkópban mérsékelt sarjadzás észlelhető; oldható pigmens-termelés kifejezettebb, mint más közegékben, a fiatal tenyésze-