141778. lajstromszámú szabadalom • Eljárás penicillin sók készítésére
2 441.778 klór-tartalmú oldószerek (kloroform, etilenklorid, klórbenzol) általában igen jól oldják a penicillinnek gyenge szerves bázissal képzett sóit; ezek az oldószerek azonban az előállítani szándékolt — erős harmadrendű aminnal képzett — sókat is általában igen jól oldják és így ezek az oldatból -- hacsak igen nagy koncentrációt nem alkalmazunk — közvetlenül nem kristályosodnak ki. Az oxigéntartalmú oldószerek közül szívesen alkalmazunk olyan észtereket, melyek legalább négy szénatomot tartalmazank; különösképpen előnyös a 2-butanol acetátja, az n-butil acetát, amilacetát s hasonlók. A ketonok közül jól használhatók< a metil-etil-keton, dietil-keton,. metil-izopropil-keton, stb. Az eljárás igen előnyösen használható a penicillinnek nyers oldatokból tiszta állapotban való elkülönítésére, amidőn a penicillinnek gyenge szerves bázissal képzett sója mellett oly szennyező anyagok is jelen vannak, njelyek a fermentációs oldatok feldolgozásánál használatos koncentrálási , és tisztítási műveleteknél a penicillint kísérik. Ez esetben is, az eljárás szerint dolgozva, a kívánt penicillin-só gyakorlati tisztaságban kiváló termelési hányadban kristályosodik ki. így pl. oly oldatokból, melyeket a penicillinnek az erjesztéses folyadékból való elkülönítése folyamán oxigéntartalmú szerves oldószer^ mint pl. butilacetát, amilacetát, felhasználásával nyerünk s amely oldatok a gyenge szerves bázisnak az elkülönítés valamely fázisában történt hozzáadása folytán a penicillint gyenge szerves bázishoz kötve tartalmazzák, erős harmadrendű amin, mint pl. N-etil-piperidin vagy prokain bázis hozzáadására a penicillin-só kiválik. Az előző munkamódnál a G-penicillin ilyen nyers oldataiból a G-penicillin közel elméleti mennyiségben és kiváló tisztasági hányadban kristályosodik ki N-etilpiperidin sója, ill. prokain sója alakjában. Az eljárás további részletei a példákban találhatók: , 1./ 1,5 ccm vizes oldathoz, mely 53 mg G-penicillin nátrium-sót tartalmaz, jéghütés mellett 0,7 cem 0,9 molár chinolinfoszfát oldatot adunk (1 mol chinolinra 1 mol foszforsavat tartalmaz), Az oldat píl-ja 4 és 5 között van, brómfenolkék papírt sárgít, de kongó papírt nem kékít. Az oldatból a G-penicillin chinolin-sója kicsapódik. Az elegyet 1,5—2 ccm amilacetáttal összerázzuk, a két réteget centrifugacsőberi szétválasztjuk. Az amilacetátos réteget nátriumszulfáton szárítjuk a nátriumszulfátot ugyancsak centrifugacsőben ülepítjük. A nátriumszulfátról leöntött tiszta amilacetátos oldatot (a nátriumszulfátot még kevés amilacetáttal mossuk) elegyítjük 0,2 ccm száraz acetonnal, mely 10% N-etil-piperidint tartalmaz. Azonnal remek kristályosodás indul meg. Hűtőszekrényben való néhány órai állás után az elkülönített kristályok súlya 61—§3 mg, olvadáspontja 157° (bomlás közben). E termék a G-penicillin N-etil-piperidin-sója. 2./ Hasonlóképpen járunk el, mint az előző példában, de 0,2 ccm etil-piperidin tartalmú aceton helyett 40 mg prokain bázist szórunk a penicillin chinolin-só szárított amilacetátos oldatához. Azonnal zavarosodás keletkezik, mely vakarásra kristálykásává alakul. Hűtőszekrényben való néhány órai állásra a G-penicillin prokain-sója gyakorlatilag elméleti mennyiségben (83—84 mg) kristályosodik ki. 3./ 10' ccm nyers penicillin vizes oldathoz, melyet 1000 ccm olyan fermentációs léből nyertünk, mely köbcentiméterenként 150 gamma G-penicillint tartalmazott, annyi 0,9 molár primer chinolinfoszfát-oldatot adunk, hogy a pH 4 és 5 között legyen. Az elegyet 6 ccm 2-butanol acetáttal kirázzuk. Az elválasztott és nátriumszulfáton szárított butil-. acetátos oldathoz 55—65 mg N-etil-piperidin száraz acetonos oldatát (0,5—0,8 ccm acetonos oldat) adjuk. Kristályosodás indul meg. Hűtés és állás után 170—180 mg tiszta N-etil-piperidin G-penicillin-só kristályosodik ki. Az anyalúgból vacuumban való betöményítésre még további generációk is, nyerhetők. 4./ Úgy járunk el, mint az előző példában, de 0,9 molár primer chinolinfoszfát helyett ugyanilyen molarítású primer piridinfoszfátot vagy primer dimetil-anilinfoszfát-oldatot alkalmazunk. A foszfátoldat helyett szulfátoldatokat is vehetünk. ' A G-penicillin N-etil-piperidin-sója ugyancsak kiváló termelési hányadban és tisztaságban kristályosodik ki. 5./ 2000 térfogat fermentációs folyadékot, mely köbcentiméterenként 150 gamma G-penieillint tartalmaz s melyhez 9 térfogat chinolint és 10 térfogat 32 normál foszforsavat adtunk, kivonatolunk ellenáramú extraktorban 400 térfogat kloroformmal. Kivonatolás után a fermentációs folyadék köbcentiméterenként 3,2 gammánál kevesebb G-pe-. nicillint tartalmaz. A 400 térfogat kloroformos oldatot, melyet célszerűen vizes foszforsav oldattal előbb kiráztunk, ellenáramú extraktorban kivonjuk 50—80 térfogat 7 pH-jú foszfát-puff er oldat és szódabikorbonát oldat 7 és 8 közötti pH-jú elegyével. Az így nyert vizes penicillin-oldatot újból ele gyítjük annyi primer chinolinfoszfát (kb. moláris töménységű) oldattal, hogy.a pH 4 és 5 közé menjen vissza. Az így nyert nyers, zavaros oldatot ellenáramú extraktorban kivonjuk 10—20 térfogat butilacetáttal vagy amilacetáttal. Az elkülönített butilacetátos vagy amilacetátos oldathoz, melyet előbb nátriumszulfáton megszárítottunk, vízmentes prokain bázist vagy N-etil-piperidint vagy N-metil-piperidint ' adunk (célszerűen csak annyit, amennyi az eredeti fermentációs oldat G-penicillin-tartalmának megfelel vagy ennél 10—30%-kai többet). Az alkalmazott erős szerves bázis G-penicillin-sója remek kristálykása alakjában közel elméleti termelésben és nagy tisztaságban leválik. Az így nyert prokain-só injekció, pl. olajos injekció készítésére minden további tisztítás nélkül alkalmas. 6./ A dihidro-F-penicillin chinolin-só-tartalmú vizes oldatot butilacetáttal kirázzuk és a megszárított oldathoz vízmentes prokain bázist adunk. A dihidro-F-penicillin prokain sója állásra kikristályosodik. 1.1 Úgy járunk el, mint az 1. példában, de amilacetát helyett metil-etil-ketont vagy dietil-ketont használunk. N-etil-piperidin hozzáadására a G-penicillin N-etil-piperidin sója kikristályosodik. Ha a keton oldószer helyett valamely étert, pl. etilétert vagy diizopropilétert használunk, akkor is kiválik a G-penicillin N-etil-piperidin-sója. 8./ G-penicillín chinolin-sójának tömény vizes oldatához vagy szuszpenzi-ójához prokain bázist adunk számított mennyiségben. A keletkező csapadékot centrifugacsőben a víztől elválasztjuk, a vizet
