141488. lajstromszámú szabadalom • Eljárás sztreptomicin kinyerésére vizes oldatokból
Megjelent 1952. évi szeptember hó 1-én. ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS 141.488. SZÁM. •30. h. 1-8. OSZTÁLY. - BO—181. ALAPSZÁM. Eljárás sztreptomicin kinyerésére vizes oldatokból. Bejelentő: Központi Biokémia. Ipari Kutató Laboratórium. A bejelentő intézet feltalálóként dr. Bodánszki Miklós vegyészmérnököt nevezte meg. Bejelentés napja : 1950. szeptember 13. Az irodalomban sztreptomicin kinyerésére elsősorban az adszorpciós módszerek váltak ismertté (Waksman és munkatársa: Próc. Soc. Exptl. Biol. Med. U9. 207. és 55. 66.'; Folkers és munkatársai: J. Am. Chem. Soc. 68. 1460. és Science 102. 34. stb.). Később a szénre való adszorbeáltatáshoz még lecsapásos metódusok pl. foszforvolframsavval, csersavval történő lecsapás, járultak. (Friedl-Wintersteiner, Science 101. 613 és Rybak-Gros, Experientia U. 396.). Nem ismeretesek azonban olyan ipari eljárások, amelyek a sztreptomicint közvetlenül erjesztéses oldatokból, vagy részben megtisztított erjesztéses oldatokból szerves oldószerbe való átvitel útján vonnák ki. O'Keeffe-DoIliver-Stiller (J. Am. Chem. Soc. 71. 2542.) Plant-McCormack (J. Am. Chem. Soc. 71. 2264.) és**Titus-Fried (J. Biol. Chem. 168. 393. stb.), csupán a sztreptomicin és mannzidosztreptomicin elválasztása céljából tanulmányozták vizes oldatokból és szerves oldószerekből álló rendszerekben a sztreptomicinnek és mannozidosztreptomicinnek megoszlását. Azt találtuk, hogy erjesztéses sztreptomicin oldatokból, vagy valamilyen módon előtisztított erjesztéses oldatokból, vagy más vizes sztreptomicin oldatból sikeresen tudjuk a szterptomicint gyakorlatilag teljes mennyiségben szerves oldószerbe átvinni, ha a vizes oldatokat szerves savakat tartalmazó szerves oldószerekkel kivonatoljuk alkalmas pH határok között. A megoszlás nagymértékben függ a rendszer pH jától, az optimális pH viszont függvénye az oldatban jelenlevő ionok mennyiségének. Célszerű teHátPvalamely rendszer megoszlási hányadosát különböző pH értékeknél vizsgálni és az optimális megoszlást nyújtó pH-t alkalmazni. Kísérleteinkben azt találtuk, hogy amennyiben szerves oldószerül 5% szterainsavat tartalmazó aktív amilalkoholt használunk, akkor az optimális pH pusztán sztreptomicinsót tartalmazó vizes oldatra vonatkozóan 6.5 körül van, mas sókat is tartalmazó vizes oldatra vonatkozóan 7.5 körül volt. Savak gyanánt különböző zsírsavak egyaránt számításba jönnek; így igen célszerűen alkalmazható a laurinsav, mirisztinsav, palmitinsav, szterainsav, olajsav, stb., de alkalmasak a karbonsavakon kívül alkil-, illetve aril-szulfosavak, valamint gyűrűs karbonsavak is, mint • amilyen az a bietinsav. Alkoholok gyanánt előnyösen használhatunk hoszszabb szénláncú alifás alkoholokat, mint amilyen a butil-, amil-, hexil-alkohol, de használhatók gyűrűs helyettesítésű alifás alkoholok is, mint amilyen a benzilalkohol, a fahéjalkohol. 1. példa. Erjesztéses sztreptomicin oldatot összekeverünk 10%-nyi erjedéses amilalkohollal, amely 5 % szterainsavat tartalmaz és keverés közben a rendszer pH-ját 5 n NaOH-dal 7.5-re'állítjuk be. A. két réteg elválasztása után a műveletet megismételjük, annyiszor, ahányszor szükséges. Rendesen 3 művelet elegendő ahhoz, hogy az aktivitás 95— 98% -át az amilalkoholos rétegbe vigyük át. 2. példa. Erjesztéses sztreptomicin oldatot pH 2-nél aktív szénnel derítünk és a szüredékkel az, első példában megadott módon járunk el. 3. példa., Erjesztéses sztreptomicin, oldatot pH 7—8-nál aktív szénnel kezelünk, a szénről a sztreptomicint savanyított közegben eluáljuk és az eluátummal az( 1. példa szerint járunk el. 4. példa. A fenti példákban említett erjesztéses vagy tisztított sztreptomicin oldatokat előbb pH 6—6, 5-nél kezeljük sztearinsav tartalmú amilalkohollal és az elválasztás után a vizes oldatokból a még továbbra is bennük lévő sztreptomicint az 1. példákban megadott módon vonjuk ki. Szabadalmi igénypontok: 1, Eljárás sztreptomicinnek erjesztéses vagy tisztított erjesztéses oldatból vagy bármilyen vizes oldatból extrakcióval történő kivonására, azzal jellemezve, hogy az ilyen vizes oldatokat szerves savakat tartalmazó szerves oldószerekkel kivonatoljuk,
