141106. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a vér természetes alvasztó anyagának előállítására

Megjelent 1952. évi március hó 1-én ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS 141106. SZÁM. 30 h. 1—8. OSZTÁLY. — V-4495. ALAPSZÁM. Eljárás a vér természetes alvasztó anyagának előállítására. Richter Gedeon Vegyészeti Gyár R. T., Budapest, Dr. Szent-Györgyi Albert egyetemi tanár, Budapest, Dr. Laki Kálmán egyetemi m. tanár, Budapest, Dr. Gerendás Mihály egyetemi m. tanár, Budapest, mint a Servita Gyógyszergyár és Vegyipari R.T. cég, Budapest jogutódai. • A bejelentés napja: 1945. december 28. A találmány eljárás véralvasztó készítmény "•előállítására, amelynek végtermékét a gyógyászatban so'kféleképein, pl. sebészeti műtéteikhez •'alkalmazhatjuk, amikor csaknem vértelenül dolgozhatunk, ez pedig a pontos sebészeti beavatkozást nagy mértékben elősegíti. Minthogy a vér maga is tartalmazza ezt a természetes alvasztó anyagot, amelyet trcim» binnak, vagy más szerzők trombáíznialk, trombogénnek neveznek, kiindulási anyagként magát a vért, célszerűen állati vért, pl. marha, disznó, ló vérét alkalmazzuk. Az eljárás szerint mindenekelőtt a pl. vágóhídon frissen kitermelt vért mindjárt véralvadásgátló, pl. 1/10 mennyiségű, 2%-os náitfium. oxalát-oldatba csurgatjuk. A vér alakos elemeit, főként a vértesteket, pl. centrifugáláissal elkülöníthetjük, de ez el is maradhat, amikor teljes vérrel dolgozhatunk. A kapott folyadékot kalciumszegény, azaz oxaláttal csapadékot nem adó vízzel, célszerűen esővízzel vagy hőiével, vagy desztillált vízzel legalább 5-szörösére, pl. 10—15-szörösre felhígítjuk. Ezután szerves savval, legcélszerűbben ecetsavval történő kicsapás következik, amikora savoldlatoi előzetes próbákkal olyan optimális pH értékre állítjuk be, amelyik a használt vérből a legnagyobb mennyiségű csapadékot szolgáitatja. E csapadékban a véralvasztó anyagnak csak az- elő. anyaga, az úgynevezett protrombin van jelen. A -csapadék termelése szempontjából optimális pH érték nagymértékben függ a felhasználásra kerülő vér származásától, az állat korától, fajtá'játóL stb. Jó. eredményeket kaptunk pl. 4,8—5,8 pH-jú szerves savak, pl. ecetsav alkalmazásával. A kapott csapadékot pl. centrifuga-. lássál elkülönítjük, kalciummentes, gyengén lúgos, legalább 7,2 pH-jú sóoldatban, pl. kalciummentes Ringer^fé'le oldatban feloldjuk, majd kálciumsóoldat és valamilyen kinázkészítmény hozzáadásával az oldatban lévő protrombint trombinná alakítjuk át. Az átalakulás befejeződését időről időre kivett próbákkal állapítjuk meg. Kísérleteink során rájöttünk arra, hogy a kel ekéző* kombin mennyisége különösebb óvóintézkedések nélkül erősen csökken, nevezetesen részben adszorpció, részben egy, a troimbint inaktiváló fermentum hatására. E hátrányokat a találmány szerint — és ez a találmány lényeges mozzanata — úgy kerüljük el, hogy az adszorpció meggátlására a rendszerhez a kalciumsó hozzáadása előtt valamely lipoid oldószert, célszerűen kloroformot adunk, a íermentativ inaktiválás kiküszöbölése végett pedig oiy anyagok jelenlétében dolgozunk, melyek fémionok, pl. vasiónok megkötésére képesek, pl. azokkal nem disszociáló komplex vegyületeket adnak, mert az inaktiváló fermentum működéséhez — megállapításaink szerint — fémiónok jelenléte szükséges. Ilyen anyagként az «, a'-dipiridil mutatkozott igen előnyösnek, melynek már nyomai is megakadályozzák a. trombin fermentativ elbomlását. A trombin-képződés befejezésekor esetleg keletkező fibrin-alyadékot eltávolítjuk s utána a trombin hatásosságát lehetőleg kímélő kicsapó szerekkel, pl. ketonokkal a trombint oldatából kicsapjuk. Célszerűnek mutatkozott az. acetonnial, pl. kétszeres térfogatú acetonnal való kicsapás 0 C° közelében. A kapott trombin a szokásos kimosás és szárítás után használatra kész száraz porként jelentkezik. A közölt optimális feltételekkel dolgozva, -75—80% kitermelést könnyen elértté-