138920. lajstromszámú szabadalom • Eljárás erjesztés végrehajtására gombák segítségével
138920. ^ solja és érdes felületével a gombamicélium megtapadását lehetővé teszi. Előnyösen érdes samott-, vagy mészkövet (juramész, márvány, stb.) használunk. A mészkő igen 5 előnyösen saverjesztések foganatosításához használható, mert ez esetben a keletkező sav kalciumsója alakjában megkötődik és ezzel az oldat túlságos megsavanyodását megakadályozzuk. 10 Az új eljárás előnye az, hogy az erjesztett oldat a micéliumnak a reakcióedényben való meghagyása mellett, szűrés és hasonló műveletek nélkül, tisztán lefolyatható, mivel a gomba a hordozón összefüggő tömeg alak-15 jában fejlődik ki, Ezenkívül erjesztési edény ismételten megtölthető steril oldattal, minek folytán ugyanazt a micéliumot többszörösen felhasználhatjuk és ezzel tekintélyes időmegtakarítást érhetünk el. 20 1. példa. Az eljáráshoz az 1. ábra szerinti sterilizáló zománcüstöt használjuk. Az ábra hivatkozási számainak jelentése a következő: (1) vattadugó, (2) erjedési folyadék, (3) 25 szellőzés, (4) próbakivétel, (6) mészkődarabok, (7) gombamicélium, (8) szűrőgolyó. Ebbe az edénybe 100 (1) sterilizált tápoldatot (10% glukóza és a szokásos ásványi sók) öntünk be és az oldatot a Rhizopus ja-30 pdnicus penészgomba spóráinak fiziológiai konyhasóoldatban való sűrű feliszapolásával beoltjuk, amely művelethez 200 cm3 feliszapolást használunk. A hőmérsékletet 30 C°-on tartjuk és az oldatot kerámiai gyertya se-35 gítségével percenként 10 (1) csiramentes levegővel szellőztetjük, 36—48 óra múlva az összes mészkövet tömött, alámerült micélium növi be és további 48 óra múlva az erjedési oldatban a glukóza már nem mu-40 tatható ki. A teljesen tiszta erjedési oldatot a fertőzést kizáró feltételek mellett lefolyatjuk és térfogatának 'A részére páróljuk be. Ekkor fumársavas kalcium kristályosodik ki, amelyet 4,2 kg szabad fumársavvá dol-45 gozhatunk fel. A kitermelés tehát az elméleti érték 60%-a. A fenti műveletet ugyanazon gombaanyag felhasználása mellett új, steril tápoldattal tetszés szerinti számban megismétel-50 hetjük. 2. példa. Az 1. példa szerinti feltételek mellett, a Rhizopus nigricans egy törzsének alkalmazásával 900 g glukózából a d-tejsav kalci-55 íumsójának 7il5 g-ját nyerjük. Kitermelés: az elméleti érték 75%-a. 3. példa. A 2. ábra szerinti, (2) l-es szellőzőpalackot használjuk . A hivatkozási számok jelentése a következő: (1) vattadugó, (2) er- 60 jedési folyadék, (3) szellőzés, -(5) kiürítés, (9) samottdarabok, (10) üvegszűrőlemez. E palackban az 1. és 2. példa szerinti kísérleti feltételek mellett az Aspergillus niger egy törzsének felhasználásával 50 g glukózából 65 32 g kalciumglukonátot kapunk. A kitermelés az elméleti érték 65%-a. 4. példa. A 3. ábra szerinti szellőzőhengert használjuk. Az ábra hivatkozási számainak a 70 jelentése a következő: (2) erjedési folyadék, (3) szellőzés, (4) próbakivétel, (5) kiürítés, (6) mészkődarabok, (11) légtelenítés, (12) szűrőgyertya. Ebbe a sterilizált szellőzőhengerbe 500 cm3 steril oldatot (3% nádcukor, 75 2% pep ton, 3% élesztővíz és ásványi sók) viszünk be és az Eremothecium Ashbyii spórák feliszapolásának 10 cm3-ével beoltjuk. Az oldatot üvegszűrőlemez segítségével percenként kb. 0,5 1 csiramentes levegővel 80 szellőzzük és sötétben 30 C° hőmérsékleten tartjuk. Kétszer 24 óra múlva a samottdarabokon egységes gombamicélium fejlődik. A tápoldatban az erjedési idő előrehaladtával növekedő mennyiségű laktoflavin kelet- 85 kezik, így további háromszor 24 óra múlva a tápoldatban cm3 -enként 120 S laktoflavin határozható meg. A kifejlődött gombamicélium ismételt felhasználása az 1—3. példához hasonló módon megy végbe. 90 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás erjesztés foganatosítására gombák segítségével alámerített állapotban, fezzal jellemezve, hogy a gombamicéliumot az elerjesztendő oldatba alámerí- 95 tett hordozón fejlesztjük ki. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy hordozóként érdes felületű testet, pl. samott-, vagy mészkövet használunk 100 3. Az 1. és 2. igénypont szerinti eljárás foganatcjsífcásji (módja, azzal rjelemezvej; hogy a Rhizopus japonicus micéliumát használjuk. 4. Az 1. és 2. igénypont szerinti eljárás 105 foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a Rhizopusi nigricans micéliuniát használjuk,