119405. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hatékony és tartós tisztított kivonatok előállítására mellső hipofizislebenyből
nélkül a hatóanyagok nagyfokú hatásosságát érjük el. így pl. a mirigyanyag implantációjával és az eljárással kapott kivonatnak infantilis fiatal egereken való 5 kikisérletezósével megállapítottuk, hogy a gonadotrop hatékony anyagokat majdnem 100%-ig kivonatoltuk és a tisztasági fok mintegy 4 mg per M. E.-ről (mintegy 0.2—0.4 mg per M. E.-ra növekedett. A 10 kapott kivonatok azonkívül a gonadotrop hatásra jellemző változásokat, mint a fiatal kakasok heréinek súlyszaporulattal egybekötött időelőtti érését és a kakasok taréjának időelőtti növekedését eredmé-15 nyezik. Az eljárással előállítható kivonatok nemcsak azokat a hatóanyagokat tartalmazzák, melyek a teljes gonadotrop hatásra jellemzők, hanem egyéb hatóanyagokat is, mint pl. az irodalomban 20 leírt szinergisztiai faktort, a tireo'trópos mellső lebenyanyagot és a laktációt elősegítő faktort. A bejelentés szerinti eljárással tehát a mellső hipofizislebenyből nagy hatóképességű, tartós tisztított kivo-25 natokat lehet előállítani. Az eljárás a mellső hipofizislebeny kivonatok üzemszerű előállítására is alkalmas. Példák: 1. A 6 gr mellső hipofizislebenyt, előze-30 tes acetonkezelés után, kétszer két óráig esetenként 20 em3 fiziológiai konyhasóoldattal 37 C°-on kivonatolunk. Az egyesített kivonatokat 6.5 pH értékre állítjuk be és erősen röpítjük. A kapott oldat 80 35 cm3 . Ezt a kivonatot a tízszeres mennyiségű etilalkohollal kicsapjuk, azonnal röpítjük és a kapott, alkoholtól míég nedves, csapadékot esetenként 30 cm3 8,0—9,0 pH értékű ammoniáktartalmú vízzel négy-40 szer kivonatoljuk. Az egyesített kivonatokat röpítjük, etilalkohollal kicsapjuk és a csapadékot az alkoholtól megszabadítjuk. A csapadékot 50 cm® fiziológiai konyhasóoldatbain oldjuk, egy óra múlva 45 fagyasztjuk és szokásos módon vákuumban szárítjuk. A kapott száraz anyag vízben oldható. Kitermelés 280 mg. 1 cm3 vízben 10 mg szárazanyagot tartalmazó oldat cm1 -ként 50 M. E. gonadotrop hatóanyaggal rendelkezik. Feldől- 50 goztunk: mintegy 1500 M. E.-t kinyertünk „ 1100 M. E.-t Ez az anyag a szinergisztiai a tireotrop és a laktagogen hatásán mérve igen ha- 55 tásosnak bizonyult. A készítmény erős hatását fiatal kakasok heréinek iaz érésén és a tarajuk növekedésén is megfigyeltük. 2. 30 gr friss, őrölt birkahipofizist 60 egyenként 20 cm3 7,0 pH értékű fiziológiai konyhasóoldattal kétszer két órán át szobahőmérsékleten kivonatoljuk. Az egyesített kivonatokat erősen röpítjük, a kivonatot a tízszeres mennyiségű metil- 65 alkohollal kicsapjuk, azonnal röpítjük és úgy mint az 1. példánál tovább feldolgozzuk. Szabadulná igények: 1. Eljárás hatékony és tartós, tisztított 70 kivonatok előállítására, mellső hipoíizislebenyből, melyre jellemző, hogy a friss mellső hipofizislebenyeket, 60 C°-ot meg nem haladó hőmérsékleten, vízzel elegyedő szerves oldószerrel többször kivonatoljuk, a visszamaradó mirigymaradványt vizes oldószerekkel kivonatoljuk, a vizes kivonatot semleges vagy majdnem semleges kémhatás mellett kis molekulasúlyú go alkohollal kicsapatjuk, a keletkező csapadékot gyengén lúgos közegben kivonatoljuk és a kapott oldatból a hatóanyagokat kis molekulasúlyú alkohollal újólag kicsapjuk, a; képződő csapadé- 35 kot vizes oldószerben, célszerűen fertőtlenítőszer használata mellett feloldjuk, majd az oldatot fagyasztjuk és vakuumban szárítjuk. 2. Az 1. igényben védett eljárás váltó- 90 zata, melyre jellemző, hogy birkák fiss mellső hipofizislebenyeiből közvetlenül kinyert vizes oldatokat dolgozunk fel.
