114768. lajstromszámú szabadalom • Eljárás B-vitaminban gazdag készítmények előállítására
kalmazásának köszönhető, amely alkalmas arra, hogy a B-vitamin jelenlétét, koncentrációját, ennek változásait és hiányát gyorsan megállapítsuk. 5 Ugyanez a vizsgálati módszer tette lehetőivé annak a felismerését, hogy az ultraszűrőben oly eszközzel rendelkezünk, amelynek segélyével a B-vitamint, illetve ennek egyes frakcióit nemcsak a gyomor-10 nedvből, a duodenumnedvből, a májkivonatból stb., hanem fermentoldatokból, pl. tripszin-, pepszin-, erepszin-, lipáz-, enterokinázoldatokból is kifiltrálhatjuk, sőt a B-vitamincsoport egyes tagjait egymás-15 tói is különválaszthatjuk. Az ismertetett eljárások alkalmazhatók az ismert növényi nyersanyagok, pl. rizs feldolgozásánál is. Hasonló eljárásokkal sikerült a vérben, 20 a vörösvérsejtek'ben és a vérszérümban is B-vitamint kimutatni. Példák: I. B-vitamin előállítása gyomornedvből. Duodenális szonda segítségével éhgyomri 25 nedveit veszünk ós annak kb. 40 cur'-ét pl. papírszűrőn átszűrjük egy lombikba és a szűrletet higítatlanul fölforraljuk, összerázzuk és állni hagyjuk. A keletkezett csapadékot néhány perc múlva leszűrjük 30 vagy lecentrifugáljuk és a folyadékot vízfürdőn majdnem szárazra pároljuk. A maradékot 60 cms 90—96%-os alkohollal részletekben felvesszük és lefiltráljuk olykópen, hogy az alkoholos oldatból pl. 4 35 frakciót készítünk. Az első frakció kissé sárgásán festett, a többiek mindig kevésbé és kevésbé. Az egyes frakciókat vízfürdőn külön bepároljuk majdnem szárazra (leghelyesebben óraüvegen vagy kristályosító 40 csészében). A frakciók részben egymással megegyező, de eltérő kristályformákat is mutatnak. A legegységesebb kristályokat az utolsó frakció mutatja, míg az első frakcióban a szirupos konzisztenciájú ex-45 traktmaradék a kristályosodás menetét zavarja. Az egyes frakciók kristályait ultraibolyafényben kvarcspektrcjgrafiai kontroll mellett megvizsgálva kitűnik, hogy azoknak oldata hőállóság, az oldósze-50 rek és abszorbensekhez való viselkedése tekintetében megfelel a vitamin B ismert tulajdonságának. Az alkoholos kezelés után visszamaradó, részben a szűrőn összegyűlt kristályos ma. 55 radék, amely kissé szürkés és mikroszkóp alatt szépen kristályosodó alakokat mutat, a vitamin B2 tulajdonságait mutatja oldószerekkel szemben. A vitaminoldatok stabilizálására bizonyos körülmények között tanácsos sava- 60 nyú közegben dolgozni, illetőleg azokat megsavanyítani, pl. sósavval. II. B-vitamin előállítása élesztőből. Közönséges pékélesztő 50 g-ját kb. 30 cm3 glicerinnel leöntjük, összerázzuk és főző- 65 pohárban felforraljuk. A forrás következtében és a glicerin vízelvonó hatása folytán is a sejtek szétroncsolódnak. Rövid állás után a glicerines oldatot leszűrjük vagy lecentrifugáljuk. A leszűrt vagy 70 centrifugált folyadék színe sárgásán festett és ultraibolyafényben kapott kvarcspektrografiai görbéje azt mutatja, hogy gazdag B-vitamin tartalomban. III. B-vitamin előállítása májkivonat- 75 bői. Valamely forgalomban lévő májkivon atot, pl. exhepart, vízfürdőn bepárolunk és teljesen hasonlóan kezeljük, mint a bepárolt gyomornedvet. Az egyes frakciók hasonló viselkedést mutatnak, mint 80 a gyomornedv esetéhen. IV. B-vitamin előállítása glicerines pankreasz-kivonatból ! és elválasztása a pankreasz-fermentektől ultrafiltrálással. A glicerines panikreasz-kivonatot ultra- 85 szűrőre tesszük és ultrafiltráljuk. Az ultrafiltrátumban tripszinfermentum nem mutatható ki, míg annak kvarcspektrografikája utraibolyafényben a B-vitamin jelenlétére vall. Hasonló módon választ- 90 ható el a B-vitamin a pepszintől, euterokináztól, erepszintől, lipától, stb. V. A vitamin B-komplexum frakciókra való bontása idtrafiltrálással. A gyomorinedvet filtrálás után kvarcspektrogra- 95 fialiag ultraibolya fényben megvizsgáljuk, majd a nedvet ultrafiltráljuk és újból sprektrogíafáljuk. Az ultrafiltrátum görbéje alacsonyabb lefutású, mint az eredeti oldaté. Ha. fehéi\jementes vizes 100 májkivonatot hasonlóan kezelünk, úgy ultrafiltrálás után a görbe laposodik, annak jeléül, hogy az egyiik nagyobb molekuláju B-vitamin az, ultraszűrőn maradt. 10 5 Az ultraszűrő mellőzhető pl. az esetekben, amidőn a stabil molekulájú vitaminokat a labil molekulájúaktól pl. forralással vagy lúgkezeléssel választjuk el. VI. A B1 , B'z és a C-vitamin elválasz- 110 tása alkoholos extracióval. Ha a fent ismertetett gyomornedvvel végzett kísérletben az alkoholos fra:kciókat lassan el-
