102521. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gyógyászati készítmény előállítására mellékvesemirígyből
— 85 — . jegyezzük, majd alaposan maceráljuk. Macerálás előtt, tiszta, célszerűen háromszor desztillált vizet adunk azután hozzá a nyersanyaghoz, még pedig 1 térfogatrész 5 mirigyanyagra 2.5 térfogatrész vizet. Az elegyet azután kb. 10 percig pihentetjük, miközben a macerált anyag vízzel jól telítődik. Az elegyet azután megfelelő tartályba, pl. üvegpalackba helyezzük és cél-10 szerűen vízfürdőben hevítjük. Ezt a hőkezelést rendkívül fontosnak tartjuk és noha sajátos körülmények esetleg az alább megadott hőmérsékletektől eltérő hőmérsékleten foganatosított hőkezelést igényel-15 nek, kutatásaink azon feltevésekre késztetnek, hogy az alább megadott hőmérsékletek a legkedvezőbbek. A vízfürdőben az elegyet kb. 60° C-ra hevítjük, majd hőmérsékletét, kb. 3 A órán 20 át, kb. 70° C-ig növeljük. Ez utóbbi hőmérsékletet 16—24 óráig tartjuk fenn, melynek elteltével a hőmérsékletet 80° C-ig növeljük. Ezt a hőmérsékletet l1 /-' óráig tartjuk fenn. Azt találtuk, hogy a hőmér-25 sékletnek a megadott módon, fokozatosan történő emelése hatásosabb kivonatot szolgáltat, mint az elegynek hirtelen felhevítése és egyetlen hőfokon való kezelése. Az elegy hőmérsékletét azután 65° C-ra 30 csökkentjük, mely hőmérsékletet 20—24 óráig tartjuk fenn. A 65° C-os vagy az ezt megelőző, 85° C-os hőmérsékleti szakasz bármely pillanatában, de célszerűen a 65° C-os szakasz elején az elegyhez 1000 cm3 -85 énként pl. 10 minin =650 mg. híg (10%-os) sósavat adunk hozzá. A savnak a 65°-os szakasz kezdetén való hozzáadása alapos elkeveredést biztosít. A szűrést megkönynvítő savból csak annyit adunk hozzá, 40 hogy a lakmusz-próba igen gyenge savreakciót adjon. Más savak is használhatók, pl. híg ecetsav. Az elegyet kivesszük a vízfürdőből, kb. 55° C-ra engedjük lehűteni, majd három-45 rét hajtogatott gézen átszűrjük és a reziduumot kisajtoljuk, míg az egész folyadékot kinyomtuk. A szilárd anyagot félrerakjuk és a kisajtolt folyadékot, tiszta (95%-os) etilalkoholnak prezerváló hatást 50 létesítő mennyiségébe sziirőpapírosoii át befolyatjuk. A szűrlet-alkoholelegy alkoholtartalmát annyi alkohol hozzáadásával növeljük, míg a kolloidális, sz.uszpendált és ill. vagy oldott anyag ki nem csapódik. 55 Erre a célra elegendő a szűrlet térfogatának legalább 2i k-szeresét kitevő alkohol. Bármely más szert is alkalmazhatunk, amely a szűrletet a sajtolás és szűrés alatt prezerválja vagy védi. Az elegyet azután a felhősödés és ülepedés lehetővé tételére 15.5°-on, kb. 24 óráig, pihentetjük, amikor is a folyadékot leöntjük, vagy leszivatjuk és célszerűen vékony fehér szűrőpapíroson átszűrjük, azután a hőmérsékletet 12.8° C-ra csökkentjük, mely 6 hőmérsékletnél kb. 36 óráig pihentetjük, további felhősítés és iilepítés céljából. Ekkor a folyadékot újból leöntjük és célszerűen vékony fehér szűrőpapíroson átszűrjük és további 12 óráig változatlan hőmér- 71 sékloüiél pihentetjük. Vékony fehér szűrőpapíroson való újabb átszűrés után, az egész alkoholt ledesztilláljuk, amikor is alkoholmentes vizes oldat marad vissza. Az oldatot azután cél- 7 szerűen 15.5° C-ra lehűtjük, 12 óráig pihentetjük, újból leöntjük és célszerűen vékony fehér szűrőpapíroson átszűrjük; a kapott szűrletet porcellán vagy agyagszűrőn át steril, pl. Berkefeld-palackokba öntjük és 8 ily módon a korábbi szűrésnél még visszamaradt idegen anyagok, beleértve a baktériumokat, spermákat és spórákat is, eltávolítjuk. Porcellánszűrő helyett minden más, jó bakterológiai szűrő használható. 8 Természetes, hogy mindennemű szennyezés a legnagyobb gonddal mellőzendő. Az eljárásnak a. hűtést és az alkoholba szűrést követő további fázisai alatt kb. 15.5° C hőmérsékletet tartunk fenn. Ked- 9' vező eredményeket kapiink, ha a további műveletek alatt az eltérés nem nagyobb + 3e-nál. Kísérleteink azonban arra a feltevésre késztetnek, hogy a leghatásosabb kivonatokat az ismertetett munkamódnál 9 és hőmérsékletnél kapjuk. Hogy a kivonat közönséges hőmérsékletnél ne változzék el, kellő mennyiségű prezerváló szert, pl. legalább 0.1% és legfeljebb 0.2% trikrezolt adunk hozzá. Más b prezerváló szer, pl. timol is használható. A prezerváló szert úgy kell megválasztani, hogy ne roncsolja szét a kivonat hatóanyagát és az injekció helyén ne fejtsen ki a szövetre ingerlő vagy más káros hatást. Az oldatot azután, kavarás mellőzésével, 36 óráig pihentetjük, miközben gondosan megfigyeljük esetleges felhősödését. Ha legkisebb mértékben felhősödik, az oldatot célszerűen vékony fehér papíros-szűrőn 1 újból leszűrjük és porcellán- vagy más egyenértékű szűrőn hajtjuk át. Ha 36 óra múlva teljesen derült oldatot kaptunk, próbakulturákat készítünk és ha 24 órás indukálási idő után szaporodást nem ész- 1 lelünk, az oldatot palackozzuk. Az így elkészített anyag' igen stabilnak bizonyult.