Vargha László et al. (szerk.): Beszámoló a Gyógyszeripari Kutató Intézet 10 éves működéséről 1950-1959 (Budapest, 1969)
Dr. Wix György: Mikrobiológiai eljárások a szteránvázas vegyületek szintézisében
9. ábra 10. ábra. E/SzD-rendszerben elválasztott szteroidok standard görbéje C) MUTÁCIÓS KÍSÉRLETEK a mikroorganizmusok SZTEROIDOXIDÁLÓ KÉPESSÉGÉNEK BEFOLYÁSOLÁSÁRA I. Kísérletek Aspergillus niger-rel Хеш ismerünk olyan adatot, amely mutagén ágensek hatását tárgyalná mikroorganizmusok szteroidoxidáló képességére. Ilyen kísérleteket végeztünk Aspergillus niger 47 törzsünkkel, amelynek oxidációs tulajdonságairól már közzétettünk adatokat [ 152]. A törzs melyet eredetileg citromsav-termelésre izoláltunk, további vizsgálataink szerint progeszteronból 11-a-oxiprogeszteront (II), 11-epikorti koszt eront (III) és két polárosabb (IV és V) anyagot képezett. A törzset sörlés ferdeagaron havonta végzett átoltásokkal tartottuk fenn. A szélesztések is sörlés agarlemezen történtek. Oltáshoz spóraszuszpenziót a ferdeagar tenyészetekről 5 ml steril deszt. vízzel készítettünk. 1—1 ml spóraszuszpenzióval oltottunk be 500 ml-es Erlenmeyer-lombikban 100 ml táptalajt, amely 20 g malátakivonatot és 10 g peptont tartalmazott 1 1 csapvízben, a pH sterilezés előtt 5,5 volt. Sterilezés : 120°-on 15 perc. A beoltott lombikokat 28°-on 200-as fordulatszámú körrázó asztalon inkubáltuk. 48 órás tenyészetekhez 20 mg progeszteront 1 ml acetonban feloldva, sterilen adagoltunk. A tenyészeteket további 24, ill. 48 óra múlva extraháltuk a Peterson által leírt módon [94]. Az extraktumot bepároltuk, és az átalakítási termékeket а В I. pont alatt ismertetett módszerrel vizsgáltuk. A ftálsavas p-feniléndiaminos indikálás [0] mellett szükség szerint a trifeniltetrazóliumkloridos előhívást [17] is alkalmaztuk. A monospóra izolátumokat Zeiss-féle Gleit-mikromanipulátorral készítettük. A besugárzást 15 W-os germicid-lámpával végeztük és a 99%-os elhalás után életben maradt telepeket 3—3 ferdeagar táptalajra oltottuk. Az ezeken kinőtt tenyészetekről oltott rázott lombikokban vizsgáltuk az izolátum szteroid-átalakító képességét. A mutációs kísérletek beállítása előtt megvizsgáltunk 400 egyspóra-tenyészetet, hogy ugyanazokat az oxidációs termékeket szolgáltatják-e. Minden izolátum 108
