Dr. Holló Ferenc szerk.: Parasitologia Hungarica 4. (Budapest, 1971)

Az ellenanyagok tlterének meghatározása érdekében PETRI-csé­székben 1,5-2,0 mm vastag agarrétégben a kör alakú reagenstar­tályokat rozettaszerüen helyeztük el. A centrális és a perifé­riás tartályok középpontja közti távolság 10 mm, a tartályok átmérője pedig 5 mm volt. A centrális rezervoárba mindig a vizsgálandó vérsavót, a perifériásokba pedig az antigénként használt 10 mg/ml fehérjetartalmú CpK-törzsoldat felező léptékű higitásait mértük. Az antigénhigitások PBS-oldattal (0,01 M, pH 7,1) készültek. Kontrollként biztosan nem fertőzött nyulakból származó vérsavókat, illetve PBS-oldatot alkalmaztunk. A leme­zeket szobahőn tartottuk, és az eredményt a reagensek bemérése után 7 nap múlva biráltuk el. Azokban az esetekben, amikor a vizsgált vérsavók erre az időre nem idéztek elő precipitációt, a reagenseket ujratöltöttük, és az eredményt akkor tartottuk negatívnak, ha ujabb 7 napi inkubálás után sem alakult ki lát­ható precipitációs vonal. Az ellenanyagok titereként az anti­génnek azt a legnagyobb higitását adjuk meg, amely az ellena­nyag-tartalmú vérsavóval még jól látható precipitációs vonalat hozott létre. Az l_j_ és 2. ábrán közölt átlagtitereket az egyes kisérieti cso­portok állataiból azonos időpontokban vett vér savók egyedi vizsgálatával kapott titerek alapján számítottuk ki (14). Géldiffuziós analízisek Az immundiffuziós analíziseket radiális kettős diffúziós mód­szerrel 1,5 mm vastag agarrétegben végeztük, amit 0,01 % mer­tiolátot és 0,003 % metilnarancsot tartalmazó PBS-ben (0,01 M, pH 7,l) oldott 1,5 %-os agaroldatból különböző méretű üvegleme­zeken képeztünk. A 10 mm átmérőjű kör alakú rezervoárok közép­pontja közti távolság 14-18 mm között változott. A vér savókat mindig higitatlanul, az antigéneket pedig PBS-oldattal (0,01 M, pH 7,1) különböző mértékben higitva alkalmaztuk. Az immundiffu­ziós lemezeket szobahőn,nedveskamrában tartottuk, naponta vizs­gáltuk, és a precipitációs vonalak teljes kialakulása, rendsze­rint 6-7 napi inkubálás után a szokásos módon (2) mostuk, szá-

Next

/
Oldalképek
Tartalom