Hadak Útján. A népvándorlás kor fiatal kutatóinak konferenciája (Szeged, 2000)

Csapó János - Csapó-Kiss Zsuzsanna - Csapó János jun.: Mira használható az aminosavanalitika a régészetben?

CSAPÓ János - CSAPÓ-KISS Zsuzsanna - CSAPÓ János jun.

umokból gyűjtött vizsgálati anyagok esetében a minimális bemérés 6,2 mg volt. A bemért anyaghoz 5 ml 6M sósavat adtunk, majd 5 percig üvegkapillárissal nitrogént buborékoltattunk át a csöveken. A nitrogénnel történő átbuborékoltatás után a csöveket azonnal lezártuk, és 110 °C-on végeztük a hidrolízist. Mivel előkísérleteink alapján úgy tűnt, hogy az általánosan használt 24 óra nem elegendő a gyapjú-fehérje teljes hidrolízisére (24 órás hidrolízis után több, nehezen azonosítható ninhid- rin pozitív csúcsot kaptunk, melyek a nem teljes hidrolízis következményei), egy gyapjúmintát 24, 48, 72, 96 és 120 órán keresztül hidrolizáltunk 6M sósavval. Ezen kísérlet eredményének ismeretében döntöttünk úgy, hogy az összes többi mintát 48 órán át hidrolizáljuk. A hidrolízis után a csöveket szobahőmérsékleten hűlni hagytuk, majd a hidro- lizátum pH-ját 4M nátrium hidroxiddal pH=2,2-re állítottuk be. A pH beállítása alatt a hőmérsékletet só-jég hűtőkeverék segítségével 30 °C alatt tartottuk. A hidrolizátumot pH=2,2-es citrátpufferrel

történő hígítás után szűrtük, majd -25 °C-on mélyhűtőpultban tároltuk az analízisek megkezdéséig.

Aminosav analízis. A minták aminosavösszetételét LKB-4101-(LKB Biochrom, England) típusú automatikus aminosavanalizátorral határoztuk meg. Az aminosavstandardot és a ciszteinsavat a Merck-től (Merck, Germany) szereztük be. Az összes aminosavanalízist a CSAPÓ ET AL. 1990 közleményben leírtak szerint végeztük.

Eredmények és következtetések

A hidrolízisidő hatása a gyapjú aminosav összetételére (4. táblázat). A táblázat adataiból jól látszik, hogy a cisztin az egyetlen aminosav, mely jelentős változást szenved a növekvő hidrolízisidő hatására. Ez a változás nem elsősorban az oxidációban nyilvánul meg, hisz a ciszteinsav mennyisége a 24 és 48 órás hidrolízis után is gyakorlatilag azonos, és 120 óra után is csak mintegy 27%-kal nagyobb a

Aminosavak Amino acids

Hidrolízisidő (óra) Hydrolysis times (hours)

24

48

72

96

120

Ciszteinsav

0,15

0,15

0,16

0,16

0,19

Aszparaginsav (Asp)

7,3

7,4

8,0

8,3

8,3

Treonin (Thr)

6,2

5,9

6,0

6,1

6,2

Szerin (Ser)

7,5

7,6

7,1

7,1

7,2

Glutaminsav (Glu)

11,3

12,7

15,0

15,4

15,5

Prolin (Pro)

6,0

6,5

6,6

6,9

7,2

Glicin (Gly)

4,9

4,6

4,6

5,0

4,8

Alanin (Ala)

4,5

4,5

4,4

4,9

4,4

Cisztin (Cys)

12,0

10,2

8,0

7,6

7,1

Valin (Val)

6,8

7,0

7,0

7,3

7,3

Metionin (Met)

0,4

0,5

0,4

0,3

0,4

Izoleucin (lie)

3,3

3,6

3,7

3,5

3,2

Leucin (Leu)

7,8

8,2

8,2

7,9

8,4

Tirozin (Tyr)

3,5

2,9

2,4

1,4

1,2

Fenilalanin (Phe)

4,2

4,2

4,0

4,0

4,1

Lizin (Lys)

3,5

3,2

3,2

3,3

3,5

Hisztidin (His)

0,8

0,8

0,8

0,8

0,8

Arginin (Arg)

7,7

7,7

7,8

7,8

8,1

Ammónia

2,3

2,4

2,2

2,2

2,3

4. táblázat: A magyar merinó gyapjának aminosavösszetétele különböző idejű hidrolízis után Table 4: Amino acid composition (g amino acid/100 g protein) of wool samples of Hungarian Merino

sheep after various hydrolysis times

448