Hidrológiai Közlöny, 2014 (94. évfolyam)

2014 / 4. szám - Tóth Szilvia - Surányi Gyula: Cianotoxin-cianofág-gazdasejt kölcsönhatások vizsgálatai laboratóriumi modellrendszerben

33

TÖTHJiZ^SURÁNWGY^Oanotoximcianof^^

Mintavétel időpontja

K+AS1 (0. perc) —«~™K+AS1 (60. perc) ....«•

K*[AS1+MYC] (60. perc) —•—

K+MYC (0 perc)+AS1 (60 perc) —•—

K+MYC (0. perc)+(AS1+MYC] (60 perc) —•—

1. ábra: fágfertőzött tenyészetek növekedése (2x multiplicitás)

K: gazdasejt tenyészet; K+ASI(O.perc): 0. percben fágfertőzött gazdasejt tenyészet; K+ASI (ÓO.perc): 60. percben fágfertőzött gazdasejt tenyészet; K+[ASI +MYC] (óO.perc): 60 percben toxinkezelt fággal fertőzött gazdasejt tenyészet; K+MYC (O.perc) + AS l (ÓO.perc): 0. percben mikrocísztinnel kezelt gazdasejtek fágfertőzése a 60. percben; K+ MYC(0.perc)+[ASl+MYC](60.perc): 0. percben mikrocísztinnel kezelt gazdasejtek fertőzése a 60. percben toxinkezelt fággal

0«

Mintavétel időpontja

K*AS1 (0. pare)

K+AS1 (30. perc)

K+ASI+MYC (0. perc) —•— K*MYC (0. perc}*AS 1 (30. perc) —•— K+ASt (0. perc}*MYC (30. perc)

2. ábra: Fágfertőzött tenyészetek növekedése (Ix multiplicitás)

K: gazdasejt tenyészet; K+ASI (O.perc): 0. percben fágfertőzött gazdasejt tenyészet; K+AS!(30.perc): 30. percben fágfertőzött gazdasejt tenyészet; K+MYC+ASI (O.perc): 0. percben toxinkezelt és fágfertőzött gazdasejt tenyészet; K+MYC(0.perc)+ASI(30.perc): 0. percben toxinkezelt és 30. percben fágfertőzött gazdasejt tenyészet; K+ASI (O.perc) +MYC(30.perc): 0. percben fágfertőzött és 30. percben toxinkezelt gazdasejt tenyészet.

K*AS1

(O.perc)

K»(AS1»MYC]

(OO-perc)

K«MYC(0.perc) K«MYC(0.perc}» ♦AS1(60.perc) (AS1-MYCl(60.perc)

mintavételt kló pontok

3. ábra: Fehérjeszintézis változások a fágcilusban (2x multiplicitás)

M: molekulamarker; K: gazdasejt tenyészet; K+AS!(O.perc): 0. percben fágfertőzött gazdasejt tenyészet; K+ASI (ÓO.perc): 60. percben fágfertőzött gazdasejt tenyészet; K+[ASI+MYCJ (ÓO.perc): 60 percben toxinkezelt fággal fertőzött gazdasejt tenyészet; K+MYC(0.perc)+ AS! (óO.perc): 0. percben mikrocísztinnel kezelt gazdasejtek fágfertőzése a 60. percben; K+MYC(0perc)+ [ASI +MYC](60perc): 0. percben mikrocísztinnel kezelt gazdasejtek fertőzése a 60. percben toxinkezelt fággal; FP+SP: fág- és stresszfehérjék

4. ábra: Fehérjeszintézis változások a fágciklusban (Ix multiplicitás)

M: molekulamarker; I: gazdasejt tenyészet; 2: 30. percben fágfertőzött gazdasejt tenyészet; 3: 0. percben fágfertőzött gazdasejt tenyészet; 4: 0. percben toxinkezelt és fágfertőzött gazdasejt tenyészet; 5: 0. percben fágfertőzött és 30. percben toxinkezelt gazdasejt tenyészet; fi: 0. percben toxinkezelt és 30. percben fágfertőzött gazdasejt tenyészet

K+ű,8 KL (O.perc)* K+1,6 KL (O.perc)*

AS1 (30.perc) FP+SP AS1 (30.perc)

!

23456 1234S6

5. ábra: Kloramfenikolos kezelés hatására bekövetkező változások a fágfertőzés során

K+K/(0perc):().percben különböző koncentrációjú kloramfenikollal kezelt gazdasejtek; a: 0. percben 0.8 pg/ml koncentrációjú kloramfenikollal kezelt gazdasejtek; b: 0.percben 1.6 pg/ml koncentrációjú kloramfenikollal kezelt gazdasejtek; c: 0.percben 3.2 pg/ml koncentrációjú kloramfenikollal kezelt gazdasejtek; d: 0. percben 6.4 pg/ml koncentrációjú kloramfenikollal kezelt gazdasejtek; M: molekulamarker; K+ 0.8KL(0.perc)+ASI(30.perc): a gazdasejtek 0. percben 0.8 pg/ml koncentrációjú kloramfenikollal történő kezelését a 30. percben kétszeres multiplicitású AS 1 fertőzés követi; K+1.6KL(0.perc)+ASl(30.perc): a gazdasejtek 0. percben 1 6 pg/ml koncentrációjú kloramfenikollal történő kezelését a 30. percben kétszeres multiplicitású ASI fertőzés követi; FP+SP: fág-és stresszfehérjék, *. 18 kDa fehérje jelölése; **: 28 kDa fehérje jelölése; ***: 66 kDa fehérje jelölése; / -6.számok: mintavételek ideje, sorrendben 0. perc, 60. perc, 120. perc, 240. perc, 300. perc és 360. perc.

Abstract: Frequent occurence of cyanophages can be demonstrated in natural habitats of cyanobacteria. The phage infection, rated to the physiology stress responses, affects the main important levels of the metabolism and energy-supply in the host cell. In our model system [Synechococcus sp. PCC 6301 host cell-AS-lcyanopha- ge] we examined the effect of microcystin-LR on the viability of phages, on growing of the phage-infected host cells and on the protein synthesis during the phage infection. We used radioisotope-labelled precursors to trace the changes of protein synthesis have essential importance in the phage cycle and stress responses in the host cell. The interaction between microcystin-LR and phage infection did not block the synthesis of phage protein without reference to order of treatments. However the amount of the phage proteins decreased if the treatment of microcystin-LR overtook the phage infection. Basically, factors affect the interaction in our model system were phage multiplicity and toxin concentration

Keywordstcyanophage, stress responses, phage multiplicity, microcystin- LR, protein synthesis