Hidrológiai Közlöny 2008 (88. évfolyam)
6. szám - IL. Hidrobiológus Napok: „A Balaton és vízrendszere – a Balaton-kutatás története” és „A Duna-kutatás története” Tihany, 2007. október 3–5.
135 A klónkönyvtár domináns (71%) csoportja (BTT-A, BTT-B, BTT-G, BTT-K, BTT-N) a legközelebbi rokonságot béta-proteobaktériumok közé tartozó ez idáig még tenyésztésbe nem vont környezeti klónokkal mutatta (2. ábra). További kis gyakorisággal képviselt klónok a Leptothrix nemzetségbe tartozó, vas és mangán oxidálására képes baktériumok, az univerzális primerekkel is kimutatott kemolitoheterotróf Tepidomonas, a metilotróf anyagcseréjü Methylomonas és Methylococcus, valamint a heterotróf Pseudomonas és Acinetobacter nemzetségek képviselőivel álltak legközelebbi rokonságban (2. ábra). A kimutatott H 2 autotróf és/vagy metilotróf szervezetek jelenlétének igazolása arra enged következtetni, hogy ezek a baktériumok feltehetően a redukált kénvegyületek, valamint a kis koncentrációban előforduló szerves anyagok oxidációját végző többségében aerob szervezetekkel együtt vesznek részt a harkányi termálvíz bakteriális közösségi anyagcsere folyamataiban. BTT-C — Thiothrix unzii (L79961) BTT-D — Thiothrix fructosivorans (L79962) BTT-J BTT-M BTT-S Thiothrix ramosa (U32940) — Thiothrix eikelboomii (AB042819) Thiothrix nivea (L40993) Thiothrix ilisciformis (AB042532) [— Thiothrixflexilis (AB042545) 99I • Thiothrix defluvü (AFI27020) BTT-F 991 Methylomonas aurantiaca (X72776) Methylomonas fodinarum (X72778) 1- BTT-R n r Methylomonas Scandinavian (AJ131369) rali- BTT-E síi BT T_| Methylococcus capsutatus (X72770) Methylococcus thermophitus (X73819) BTT-T 100J BTT-O Pseudomonas rhodesiae (AF064459) I BTT-Q 9 8 Acinetobacter calcoaceticus (X81661) 3; B'll-P sr BTT-K 7 - BTT-N _J°° BTT-A BTT-G • BTT-B BTT-IJ Tepidomonas ignava (AFI77943) Leptothrix mobilis (X97071) 921 | BTT-L Leptothrix discopltora (Z18533) Bacillus alcalophitus (X76436) 2. ábra. A büdöstapolcai karsztvízből Thiothrix-specifikus primerekkel létrehozott klónkönyvtár reprezentánsait és a velük legközelebbi rokon baktériumfajokat bemutató filogenetikai dendrogram A két klónkönyvtár feldolgozása hasonló mélységű taxon diverzitást eredményezett. Az univerzális primerpárral végzett lóSrDNS szekvencia analízis alapján ÍOOTU (operatív taxonómiai egység) jelenlétét mutattuk ki (/. ábra), melyből 6-ot sikerült faji szinten azonosítani. A Thiothrix-specifikus primerekkel végzett szekvencia analízis 14 OTU-t eredményezett (2. ábra), ebből 7-et azonosítottunk faji szinten (/. táblázat). A T. nivea csoport tagjainak (T. unzii, T. fructosivorans, T. ramosa, illetve T. nivea csoportba tartozó Thiothrix sp.) a jelenlétét mindkét metodika alapján elvégzett vizsgálatunk eredményei igazolták. A vízmintákból nyert biomassza fáziskontraszt mikroszkópos vizsgálata a Thiothrixek morfológiai tulajdonsága alapján szintén a nivea-csoport (baktériumhüvely jelenléte, trichóma-hossz) jelenlétét erősítette meg. Összefoglalás A büdöstapolcai szulfidos karsztvízbázis két langyos vizű kútjából származó vízminták baktérium közösségeit vizsgáltuk tenyésztéstől független molekuláris biológiai módszerekkel. A bakteriális diverzitás feltárása során zömmel olyan speciális környezeti feltételekhez alkalmazkodott baktériumok jelenlétére mutattunk rá, melyek kemolitoautotróf vagy kemolitoheterotróf anyagcseréjük révén elsősorban a termálvíz kén körforgalmában játszhatnak szerepet a szulfid-kén oxidációs, valamint a szulfit-kén redukciós folyamatokban. Az univerzális és a Thiothrix-szelektív 16S rDNS szekvencia analízis alap-
