Hidrológiai Közlöny 2006 (86. évfolyam)

6. szám - XLVII. Hidrobiológus Napok: Vizeink élővilágát érintő környezeti változások Tihany, 2005. október 5–7.

89 5% NaCI 7% NaCI 10% NaCI 12% NaCI • Alkalikus • Tengervíz • King B pH 7 pH 8 pH 9 pH 10 • Alkalikus • Tengervíz DKing B pH 11 1. ábra. A különböző sókoncentráció és pH értékekkel jellemezhető táplevesekben növekedést mutató baktériumtörzsek százalékos megoszlása táptalajok szerint 2. ábra. A törzsek csoportosítása A hierarchikus cluster analízissel csoportosított törzsek közül 43 egymástól fenotípusos tulajdonságaik tekintetében elkülönülő reprezentánst választottunk ki, ezeket ARDRAmintázatuk alapján másodlagosan is osztályoztuk, majd 16S rDNS-ük parciális szekvenálásával faji szinten azonosítottuk. A faji szintű identifikáció nagy filogenetikai változatosságot eredményezett: sikerült azonosítanunk kis és nagy G+C-tartalmú Gram-pozitív baktériumokat, továbbá a-, ßés y- proteobaktériumokat. A két nagy törzslétszámú fenon képviselői alkalitoleráns és halotoleráns Nesterenkonia (I. fenon), illetve fakultatív és obligát alkalofil Bacillus (II. fenon) fajokkal mutattak egyezést (/. táblázat). A csoportokba nem sorolt izolátumok filogenetikai és metabolikus változatosságot mutattak, korábban extrém alkalikus, sós környezetekből leírt, kifejezetten alkalofil és halofil (pl. Planococcus maritimus, Planococcus alkanoclasticus, Myceligeneris xiligouensis, Halomonas nitritophilus), valamint alkalitoleráns, halotoleráns, neutrális körülmények közül is izolálható fajokkal mutattak egyezést (pl. Pseudomonas anguilliseptica, Microbacterium kitamiense, Novosphingobium hassiacum, Hydrogenophaga flava, Shewanella putrefaciens). Számos, feltehetően a tudomány számára új fajt sikerült tenyésztésbe vonnunk, melyek a már ismert közelrokon alkalofil fajokkal alacsony (93-95 %) szekvenciahasonlóságot mutattak (/. táblázat). Tenyésztéstől független vizsgálataink során létrehoztunk egy 75 tagú 16S rDNS klónkönyvtárat a Nagy-vadas-tó őszi üledékmintájából. Ennek feldolgozása tenyésztésen alapuló vizsgálatainkat részben megerősítette (Nesterenkonia, Kocuria, Halomonas, Pseudomonas nemzetségek), valamint a tenyésztés során vizsgált aerob heterotróf szervezetek körét kiegészítette anaerob (pl. Geobacter hydrogenophilus, Desulfuromonas michiganensis, Desulfovibrio africanus), ilhierarchikus cluster analízissel letve kemolitotróf (pl. Nitrospira moscoviensis), mixotróf (Halothiobacillus neopolitanus) és fototróf (Chlorobium chlorovibrioides, Caldilinea aerophila) fajok jelenlé-tének igazolásával. A vizsgált tavak bakteriális diverzitását és annak szezonális változását DGGE alkalmazásával hasonlítottuk össze, ami alapján feltételezhető, hogy az egyes minták (mintavételi hely és időpont alapján elkülönítve) bakteriális diverzitása közel azonos mértékű. A gél mintázata alapján a szezonális változás a faj összetételt nem befolyásolja, elsősorban az egyes fajok aránya változik a közösségben a többihez képest. Mind a klónozás, mind a DGGE során nyert szekvenciák többsége nagyon kis mértékű hasonlóságot mutatott ismert fajokkal, számos, potenciálisan új faj jelenlétére utalva. Nagy-Vadas " Kelemen-szék" 30 40 60 60 70 Linkage Distance 90 100 3. ábra. A szikes tavak bakteriológiai vizsgálatának összehasonlítása hierarchikus cluster analízissel