Hidrológiai Közlöny 2003 (83. évfolyam)

3. szám - Ördög Vince–Balogi Zsolt: Cylindrospermopsis raciborski bioteszt: mederüledék minták biológiailag hozzáférhető foszfor koncentrációjának a mérésére

ÖRDÖG V. - BALOG! ZS Cylindrospermopsis raciborskii bioteszt 163 gyenge fényen tartottuk fenn 6-8 havonta történő átoltással (Staub, 1961). A cianobakténumot az eredeti tizedrészének megfelelő mikroelemet tartalmazó N-mentes BG11 tápoldatba hetenként átoltottuk és a kísérleti körülmények között tartottuk (Rippka et al., 1979). Algatenyésztő berendezés A korábban részletesen leírt, szabályozott hőmérsékletű (25 ± 2°C) helyiségben lévő tenyésztő berendezést a teszt szervezetek igényeinek megfelelően módosítottuk (Ördög, 1981b). A vízszintesen elhelyezett 11 db., 60 cm hosszú, 18 W-os Narva gyártmányú Lumoflor 80 fénycső helyett ugyanilyen méretű és teljesítményű 6 db Osram (L 18 W/77) és 5 db. Tungsram (F74 Daylight) gyártmányú fénycsöveket helyeztünk el váltakozva. A C. raciborskii alacsonyabb fényigénye miatt csupán minden második fénycsövet üzemeltettük, azaz 3 Osram és 2 Tungsram fénycsövet. A világos-sötét időszakok hossza 12:12 óra, a fénycsövektől 15 cm távol elhelyezett üveglap szintjén, csökkentett megvilágításnál 67 ± 7 pmol.m"

2.s"' volt a fényintenzitás. A teszt szervezetek és az üledék lebegésben tartásához a tenyészeteket stenl vattaszűrövei egyedileg ellátott üvegcsövön keresztül levegőztettük széndioxid hozzáadása nélkül. A 250 mL tápoldatot tartalmazó 500 mL térfogatú tenyészedényeken (Erlenmeyer lombik) óránként 20 L levegőt buborékoltattunk át, emellett manuálisan naponta kétszer felráztuk azokat A biotesztek menete A két teszt szervezettel három kísérlet-sorozatot végeztünk. A R. subcapitata zöldalgát Z-8 tápoldatban, a C. raciborskii cianobaktériumot pedig N-mentes és Ntartalmú BG-11 tápoldatban is vizsgáltuk. A P-éheztetett alga előállításának és az ideális oltóanyag mennyiségének a meghatározására végzett kísérletek részletes eredményeire dolgozatunkban nem térünk ki A kalibrációs görbe készítéséhez és a mederüledék minták BAP vizsgálatához szükséges P-éheztetett oltóanyagot a zöldalgánál a következő átoltásokkal nyertük: Z-8 tápagar => teljes Z-8 tápoldat => teljes Z-8 tápoldat => P-mentes Z-8 tápoldat. Az átoltási sorrendnek megfelelően először a Z-8 tápagaron fenntartott törzstenyészetből oltottunk oltókacsnyi menynyiséget teljes Z-8 tápoldatba és a kísérleti körülmények között szaporítottuk. A 7. napon mértük a tenyészet szárazanyag tartalmát, majd ennek alapján ismét teljes Z-8 tápoldatba oltottuk tovább úgy, hogy az oltóanyag 10 mg.L'

1 kiinduló szárazanyag tartalom legyen. Az ugyancsak 7 napig inkubált tenyészetből 12 mL szuszpenziót 250 mL P-mentes Z-8 tápoldatba oltottunk, ami szintén mintegy 10 mg.L"

1 szárazanyagnak felelt meg. így biztosítható volt az, hogy minden kísérletben gyakorlatilag ugyanannyi foszfort és algát vigyünk át a tenyészedényekbe. A kalibrációs görbéhez és a mederüledék minták BAP vizsgálatához szükséges P-éheztetett oltóanyagot a cianobaktériumnál a következő átoltásokkal nyertük: Teljes BG-11 tápoldat => P-mentes BG-11 tápoldat A hetente műidig 10 mg.L'

1 kiinduló szárazanyag tartalomnak megfelelő oltóanyaggal továbboltott C. raciborskiiból 18 mL-t oltottunk a 250 mL N-mentes vagy N-tartalmú BG-11 tápoldatba és 7 napig inkubáltuk. Az előzetes vizsgálatok alapján a mederüledék BAP koncentrációját a legcélszerűbben 250 mL tápoldathoz egyedüli P-forrásként adagolt 100 mg mintával tudtuk mémi. A steril P-mentes tápoldatokhoz először mederüledék mintát adagoltunk, majd tesztalgával oltottunk. A kísérleteket klorofill méréssel értékeltük (ISO 10260, 1993). A tenyészetekből a kísérlet végén - mindig délután 10-50 mL szuszpenziót Whatman GF/C üvegrost szűrőlapon szűrtünk, amit 5 percig 75 °C-os vízfürdőn zárható műanyag centrifuga csőben 10 mL 90 %-os etanollal extraháltunk. Az extraktumot egy éjszakán át hűtőszekrényben tároltuk. A másnap délelőtt Sigma gyártmányú 6K15 típusú centrifugával centrifugált minta felülúszóját jelölt kémcsőbe öntöttük át és 90 %-os etanollal 10 mL-re egészítettük ki. A lebegő anyagoktól mentes minta fényelnyelését Vanan (USA) gyártmányú Cary 50 Scan spektrofotométerrel mértük 1 cmes küvettában 750 és 665 nm-en. Az a-klorofill koncentrációt az alábbi képlet szerint számítottuk: Chi = A* 29,6* v/V, ahol Chi = klorofill-a koncentráció a sejtszuszpenzióban (Hg L-') A = az extraktum fényelnyelése (A665-A750) v = az extraktum térfogata (mL) V = a szűrt minta térfogata (L). Az adatok statisztikai értékelését a Microsoft Office 2000, Excel programjával végeztük Eredmények és értékelésük 2. táblázat A vizsgált meder-üledék minták alapadatai SzárazTOC TP J A mintavétel A minta Réteg anyagr

aR g' Hgg' helye és ideje jelölése cm tartalom száraz szaraz C/.) üledék üledék II Balaton, Keszthely imcdence 2000.09.12-13. B1 0-5 32,0 25,5 768 II Balaton, Keszthely imcdence 2000.09.12-13. B2 0-5 32,5 30,3 722 II Balaton, Keszthely imcdence 2000.09.12-13. B3 0-5 32,7 32,1 758 II Balaton, Keszthely imcdence 2000.09.12-13. B4 0-5 29,8 33,8 909 II Balaton, Keszthely imcdence 2000.09.12-13. B5 0-5 59,0 4,6 455 Fertö-tó 2000.08.17. FI 0-15 56,6 25,7 643 Fertö-tó 2000.08.17. F2 0-15 54,0 25,3 686 Fertö-tó 2000.08.17. F3 0-15 44,5 19,2 639 Fertö-tó 2000.08.17. F4 0-15 51,5 5,53 633 Fertö-tó 2000.08.17. F5 0-10 26,4 67,5 715 Velencei-tó 2000.08.21. VI 0-15 46,0 16,1 742 Velencei-tó 2000.08.21. V2 0-15 63,0 22,0 764 II Velencei-tó 2000.08.21. V3 0-15 48,9 12,9 787 Velencei-tó 2000.08.21. V4 0-15 8,16 182 1311 Velencei-tó 2000.08.21. V5 0-15 20,0 92,1 925 Fehévárcsurgói tározó 2000.08.29. Cl 0-15 98,3 22,6 1031 | Fehévárcsurgói tározó 2000.08.29. C2 0-15 96,6 27,3 1082 Fehévárcsurgói tározó 2000.08.29. C3 0-15 94,2 23.0 1166 Fehévárcsurgói tározó 2000.08.29. C4 0-15 93,1 22,5 1145 Fehévárcsurgói tározó 2000.08.29. C5 0-15 93,6 18,3 1004 Alba Agrár Kt. Székesfehérvár Halastavak 2000.09.05. Pl 0-15 39,8 31,1 1104 Alba Agrár Kt. Székesfehérvár Halastavak 2000.09.05. P2 0-15 39,2 25,9 1205 Alba Agrár Kt. Székesfehérvár Halastavak 2000.09.05. P3 0-15 47,6 17,7 978 I Alba Agrár Kt. Székesfehérvár Halastavak 2000.09.05. P4 0-15 34,2 45,0 1131 Alba Agrár Kt. Székesfehérvár Halastavak 2000.09.05. P5 0-15 37,3 28,4 1303 Tisza-tó 2000.08.23. TI 0-15 47,2 14,2 837 Tisza-tó 2000.08.23. T2 0-15 54,5 13,1 805 Tisza-tó 2000.08.23. T3 0-15 54,5 25,3 617 I Tisza-tó 2000.08.23. T4 0-15 51,6 19,0 707 1 Tisza-tó 2000.08.23. T5 0-15 67,9 7,70 659 fl A vizsgált mederüledék minták mintavételi helyét és idejét, valamint szárazanyag-tartalmát, TOC- és TP-koncentrációját a 2. táblázatban foglaltuk össze. Megállapítható, hogy mind a TOC, mind a TP szempontjából kellő változatosságot