Fogorvosi szemle, 2009 (102. évfolyam, 1-6. szám)

2009-10-01 / 5. szám

180

FOGORVOSI SZEMLE ■ 102. évf. 5. sz. 2009.

hangban vannak a korábban pulpa és parodontális ligamentum eredetű őssejtek esetében kapott adatokkal amelyek során más őssejtmarkereket, így CD34-et, és c-kit-et expresszáló sejtek jelenlétét is sikerült a fogeredetű sejtkultúrákban kimutatni [27,31]. A továbbiakban ezen őssejt markerek kombinációjának segítségével olyan progenitor sejteket nagy számban tartalmazó sejtpopulációk hozhatók létre, melyek alkalmasak lehetnek a keményszöveti regenerációs folyamatok további tanulmányozására. Vizsgálataink azt is igazolják, hogy az általunk kialakított izolálási és tenyésztési körülmények között előállított kultúrák alkalmasak oszteogén differenciálódásra, amely alapvetően meghatározza potenciális felhasználhatóságukat a fogstruktúrák megújítására [20, 26, 33].

Az életképes sejtek számát jellemző MTT analízis segítségével megvizsgáltuk a 2,5 és 10%-os fötális borjúszérum tartalmú tápok tenyészetekre gyakorolt hatását. A vártnak megfelelően, a szérum alkalmazásakor szignifikánsan nagyobb volt a kezelést követően az életképes sejtek száma, mint szérummegvonás esetén. Bár az FCS felhasználásával végzett tenyésztés során jól kiegyensúlyozott tápoldatot biztosítunk számos esszenciális komponens biztosításával, ugyanakkor több olyan növekedési és differenciálódási faktor hat a sejttenyészetekre, amelyek hatása a szérum pontos összetételének hiányában kevésbé kiszámítható a definiált sejttenyésztő médiumokhoz képest. Emellett az állati eredetű szérummal történő sejttenyésztés a humán felhasználást azonban kizárja. így a későbbi in vivo klinikai alkalmazás előfeltétele a szükséges faktorok egyedi azonosítása, pontosan definiált sejttenyésztő médium létrehozására [34, 35, 36], AZ EGF és a BMP2 alkalmazásával sem a szérum jelenlétében, sem annak hiányában nem találtunk proliferáció fokozódást, sőt mindkét bioaktív peptid nagy dózisokban gátolta a proliferációt. Eredményeink azonban nem meglepőek annak figyelembevételével, hogy a pulpa eredetű sejtek esetében elsősorban nem mint proliferációs, hanem mint differenciálódási faktorok kerülnek számításba [37, 38, 39].

Az itt bemutatott eredmények elsősorban további kutatásaink módszertani megalapozását jelentik. Eredményeink megalapozzák a fogbél regenerálására képes sejtek osztódásának és differenciálódásának további molekuláris szintű tanulmányozásának lehetőségét. A DPSC sejtekkel végzett munkánk hosszú távú célja a humán alkalmazást megalapozó eredmények elérése, lehetővé téve az emberi fogbél eredetű őssejtek felhasználását a különböző destruktív folyamatok következtében elpusztult fog és csontszövetek regeneratív terápiájában [26, 27, 40, 41],

Köszönetnyilvánítás

A munkához az OTKA 61543, 67250, 69008, 72385 és 75782 kutatási támogatások nyújtottak fedezetet.

Irodalom

1. Goessler UR, Hormann K, Riedel F: Tissue engineering with adult stem cells in reconstructive surgery (Review). Int J Mol Med 2005; 15: 899-905.

2. Jun HS, Yoon JW: Approaches for the cure of type 1 diabetes by cellular and gene therapy. Curr Gene Ther 2005; 5: 249-262.

3. Nakagawa T, Ito J: Cell therapy for inner ear diseases. Curr Pharm Des 2005; 11: 1203-1207.

4. Stocum DL: Stem cells in CNS and cardiac regeneration. Adv Biochem Eng Biotechnol 2005; 93:135-159.

5. Wobus AM, Boheler KR: Embryonic stem cells: prospects for developmental biology and cell therapy. Physiol Rev 2005; 85: 635- 678.

6. Smits AM, van Vliet P, Hassink RJ, Goumans MJ, Doevendans PA: The role of stem cells in cardiac regeneration. J Cell Mol Med 2005; 9: 25-36.

7. Dimmeler S, Zeiher AM, Schneider MD: Unchain my heart: the scientific foundations of cardiac repair. J Clin Invest 2005; 115: 572- 583.

8. Trucco M: Regeneration of the pancreatic beta cell. J Clin Invest 2005; 115: 5-12.

9. Osawa M, Hanada K, Hamada H, Nakauchi H: Long-term lymphohematopoietic reconstitution by a single CD34-low/negative hematopoietic stem cell. Science 1996; 273: 242-245.

10. Lemischka IR, Raulét DH, Mulligan RC: Developmental potential and dynamic behavior of hematopoietic stem cells. Cell 1986; 45: 917-927.

11. Bianco P, Gehron RP: Marrow stromal stem cells. J Clin Invest 2000; 105: 1663-1668.

12. Jackson KA, Mi T, Goodell MA: Hematopoietic potential of stem cells isolated from murine skeletal muscle. Proc Natl Acad Sei USA 1999; 96: 14482-14486.

13. Taichman RS, Emerson SG: The role of osteoblasts in the hematopoietic microenvironment. Stem Cells 1998; 16: 7-15.

14. Bruder SP, Jaiswal N, Haynesworth SE: Growth kinetics, self-renewal, and the osteogenic potential of purified human mesenchymal stem cells during extensive subcultivation and following cryopreservation. J Cell Biochem 1997; 64: 278-294.

15. Friedenstein AJ és mtsai: Origin of bone marrow stromal mechanocytes in radiochimeras and heterotopic transplants. Exp Hematol 1978; 6: 440-444.

16. Owen M: Marrow stromal stem cells. J Cell Sei Suppl 1988; 10: 63-76.

17. Friedenstein AJ, Grosheva AG, Gorskaja UF: Bone marrow organ formation after transplantation of cell suspensions into sponges. Bull Exper Biol Med 1981 ; 91: 674-676.

18. Goshima J, Goldberg VM, Caplan AI: The origin of bone formed in composite grafts of porous calcium phosphate ceramic loaded with marrow cells. Clin Orthop Relat Res 1991 ; 274-283.

19. Yoshikawa T, Ohgushi H, Tamai S: Immediate bone forming capability of prefabricated osteogenic hydroxyapatite. J Biomed Mater Res 1996; 32: 481-492.

20. Gronthos S, Mankani M, Brahim J, Robey PG, Shi S: Postnatal human dental pulp stem cells (DPSCs) in vitro and in vivo. Proc Natl Acad Sei USA 2000; 97: 13625-13630.

21. Grzesik WJ és mtsai: Cementum-forming cells are phenotypically distinct from bone-forming cells. J Bone Miner Res 2000; 15: 52-59.

22. Miura M és mtsai: SHED: stem cells from human exfoliated deciduous teeth. Proc Natl Acad Sei USA 2003; 100: 5807-5812.

23. Seo BM és mtsai: Investigation of multipotent postnatal stem cells from human periodontal ligament. Lancet 2004; 364: 149-155.

24. Batouli S és mtsai: Comparison of Stem-cell-mediated Osteogenesis and Dentinogenesis. J Dent Res 2003; 82: 976-981.

25. Gronthos S és mtsai: Stem cell properties of human dental pulp stem cells. J Dent Res 2002; 81: 531-535.

26. Király M és mtsai: Simultaneous PKC and cAMP activation induces differentiation of human dental pulp stem cells into functionally active neurons. Neurochem Int 2009; 55: 323-332.