Fogorvosi szemle, 2002 (95. évfolyam, 1-6. szám)
2002-06-01 / 3. szám
FOGORVOSI SZEMLE ■ 95. évf. 3. sz. 2002. 121 vörösvérsejtek frakciója foglal helyet, melynek felső része fiatal trombocytákat is tartalmaz. Ezt követi egy ún. demarkációs zóna, ahol a vérlemezkék mellett a fehérvérsejtek találhatók. Középen a trombocytadús plazmafrakció (platelet-rich plasma, továbbiakban: PRP), a felülúszóban pedig a trombocytaszegény plazma (piatelet poor plasma, PPP) helyezkedik el. A fibrinogén az utóbbi két frakcióban található. A szeparálódás mértéke függ a centrifugálás időtartamától és intenzitásától. (Az intenzitást a fordulatszámmal (rpm: revolutions per minute), vagy az ún. grádienssel (G) lehet jellemezni, amely a fordulatszámon kívül a rotorrádiuszt is figyelembe veszi.) ...... .. Trombocyta szegény plazma (PPP) • » ^ » Trombocyta dús plazma # * * ♦ (PRP) • * . * * Sejtdús frakció -------------------► » t« V t *ï** V*t / 1. ábra. Sajátvér-centrifugátum A platelet-rich plasma alkalmazása A sajátvér-preparátum felhasználható frakciói Csontpótlás kapcsán a sajátvér-preparátum különböző frakcióit használhatjuk fel a gyakorlatban. Egyrészt a trombocyta-koncentrátumot, amely a fent említett növekedési faktorok révén a csontosodást serkenti. Másrészt a fibrinogéndús plazmafrakció- aktiválás hatására léttrejövő szól-gél átalakulása (szövetragasztó) révén a szemcsés csontpótló anyagot jobban lehet tömöríteni, helyben tartani. [26], Az aktiváláshoz (fibrinogénfibrin átalakuláshoz) Ca-ionok (10%-os calciumchlorid) és trombin (bovin trombin por) hozzáadására van szükség. A fibrinogéndús plazma frakciójából 10%-os calciumchlorid hozzáadásával, 37 °C-on 15 perc inkubálással az augmentátum fedésére alkalmas membránszerű fibrincsapadék is előállítható. A platelet-rich plasma preparálásának fejlődése A műtőasztal melletti trombocyta-szuszpenzió preparálás és felhasználás módszerét először Marx [21 ] és Whitman [40] közölték. Az eljárás lényege, hogy a betegből nyert, véralvadásgátolt saját vért centrifugálják, majd a felülúszó (PPP frakció) eltávolítását követően ismételt centrifugálást végeznek a sejtes frakció leválasztása céljából. Az így nyert preparátumot - amely a kiindulási mennyiség mintegy 10%-a - calcium-chloriddal és bovin-trombinnal keverve használják fel csontpótláshoz. (Utóbbi ágensek elősegítik a fibrinogén-fibrin átalakulást, és ezáltal a gélszerű halmazállapot kialakulását.) A így előállított PRP frakcióban a trombocyták száma 3.38-szorosnak bizonyult a saját vérhez képest [21]. Marx a PRP kenet immunhisztokémiai vizsgálatával a csontosodást fokozó faktorok, a saját csont graftban pedig receptoraik jelenlétét igazolta. Klinikai vizsgálatok során radiológiai és hisztomorfometriás módszerekkel a PRP-vel kevert csont-transzplantátum szervülését gyorsabbnak, a képződött új csont minőségét jobbnak találta, mint a PRP nélkül alkalmazott graftok esetén [21], A trombocyta-szuszpenzió előállítására azóta több módszert is kidolgoztak [2, 18, 33]. Ma platelet-rich plasma preparátumról akkor beszélhetünk, ha a készítmény trombocytatartalma a vér trombocytatartalmának közel négyszerese [20]. Az egyes előállítási módszerek között a legfőbb különbség a vér centrifugálási idejében a centrifugálás intenzitásában nyilvánul meg [14, 38] (1. Táblázat). A platelet-rich plasma preparálásának általunk használt módszere A Semmelweis Egyetem Szájsebészeti és Fogászati Klinikáján három éve alkalmazunk trombocyta-szuszpenziót állcsonthiányok feltöltése kapcsán. A preparátumot a Curasan cég által javasolt metódus alapján készítjük [38]. A felhasznált vért perifériás vénából nyerjük (2x1 Oml), a szuszpenzió előállításához a Curasan cég PRP kitjét alkalmazzuk. Véralvadásgátlóként Na-EDTA oldatot használunk. 10 perces, 2400 rpm (=540G) fordulatszámon történő centrifugálást követően a felülúszót leválasztjuk (FRP+PPP frakciók), majd 10 percig, 4000 rpm (=1520G) fordulatszámon tovább centrifugáljuk. A képződött felülúszót (PPP) eltávolítjuk úgy, hogy a cső alján 0,1-0,5ml csapadékszerű trombocyta- koncentrátum maradjon. A trombocyta-csapadékot (pellet) kémcsőrázóval (vortex) szuszpendáljuk. A trombocyta-szuszpenziót saját vérrel és csontpótló anyaggal elegyítve használjuk csontdefektusok feltöltésére. (A fibrinogén frakció aktiválásához szükséges kalcium-ionokat az általunk használt béta-trikalcium foszfát csontpótló anyag biztosítja. A bovin trombin por alkalmazása Európában nem engedélyezett. [Szóbeli közlés, Curasan])
