Fogorvosi Szemle, 1976 (69. évfolyam, 1-12. szám

1976-05-01 / 5. szám

ARGININEK

143

Fogorvosi Szemle 69. 143—145. 1976.

Semmelweis Orvostudományi Egyetem Fogpótlástani Klinikájának (Igazgató: Fábián Tibor dr. egyet, tanár), Gyógyszertani Intézetének (Igazgató : Knoll József dr. egyet, tanár) és Gyógynövénykutató Intézetének (Igazgató : Tétényi Péter dr. egyet, tanár)

közleménye

A biológiailag hatásos NG-metilezett argininek a felnőtt emberi fog aminósav összetevői között

írta: KOVÁCS GEORGINA dr., KALÁSZ HUBA dr., NAGY JÁNOS dr. és

TYIHÁK ERNŐ dr.

Az emberi maradó fog organikus összetevőinek vizsgálata során a fogszövetből mindeddig ki nem mutatott N-metilezett bázikus aminósavak közül az N° — NG-, és NG—N'G-dimetil-L-arginin jelenlétét sikerült igazolnunk. Ezek az NG-metilezett argininek a felnőtt emberi fog aminósav összetevői között mind kötött (fehérjékben, peptidekben), mind szabad formában kimutathatók voltak.

Az extrahált, carieses és egészséges fogakról a felületi szennyezettséget illetőleg a carieses részt csiszolással távolítottuk el. A fogakat rézmozsárban aprítottuk, majd golyósmalomban finom porrá törtük össze. A port Lezovic és mtsai által leírtak szerint [1] 10%-os salétromsav oldattal ke vertettük, oldottuk fel. Az oldatot szűrtük (az eredeti fogra számítva 4% oldhatatlan maradékot szűrtünk ki 72 órás szobahőmérsékleten történő kevertetéssel való oldás után), és 10%-os nátrium hidroxid oldattal semlegesítettük a szervetlen sók jelentős részének kicsapása céljából. Ez az anorganikus csapadék sem fehérjéket, peptideket, sem aminósavakat nem tartalmazott. Mind a fehérjék-peptidek, mind az aminósavak a csapadék centrifugálása után maradó vizes oldatban voltak. Ezt az oldatot liofileztük, kis térfogatnyi 0,01 N sósavban oldottuk fel, majd Sephadex G 10 dextrán gél oszlopon gélkromatografáltuk 0,01 N sósavas elucióval. Csoportszeparálást végeztünk, tehát a protein-peptid frakciót, a szabad aminósavakat és az aromás vegyületeket különítettük el.

A vizsgálatokat a protein-peptid frakcióból 6 N" sósavval 105 °C-op történő 24 órás hidrolízis után, illetőleg az aminósav frakcióból közvetlenül végeztük el automatikus aminósav analizátorral (Biocal Instrument, Biochrom BC 200 Modell). Az aminósav analízis mind a fehérje-peptid frakció hidrolizátumából, mind a szabad aminósavakból az általánosan előforduló aminósavak mellett több új anyag —• több új aminósav jelenlétére utalt. Az aromás vegyületeket tartalmazó frakcióból új, az ismert aminósavaktól (fenilalanin, tirozin) eltérő vegyületet nem mutattunk ki.

A fehérje peptid frakció hidrolizátum vizsgálatának eredménye látható az 1. ábrán. Hasonló eredményeket kaptunk a szabad aminósavak vizsgálata során. Az ismeretlen anyagok közül az egyik csúcsot a dimetil-argininekkel sikerült azonosítani. További, ugyancsak aminósav analizátorral, de eltérő eluenssel történő vizsgálataink kimutatták, hogy mind NG — NG-dimetil-arginin, mind NG — N'G-dimetil-arginin van a fogban. Mennyiségük mind kötött, mind szabad állapotban mintegy 5—5%-a az arginin mennyiségének. Standardként autentikus szintézissel előállított dimetil-arginin mintákat használtunk.

További bizonyítékként elkészítettük mind a dimetil-arginin autentikus minták etilészter, majd N-trifluoro-acetilezett származékait, mind a fogminták etilészter, majd N-triluoro-acetilezett származékait gázkromatográfiás vizsgálatok céljára. A fogminták gázkromatogrammjaiban is megkaptuk az au tenti-