Fogorvosi szemle, 1967 (60. évfolyam, 1-12. szám)

1967-07-01 / 7. szám

216 GALAMB S. DR.—TÓTH S. DR—TERNER K. DR. B) A serotonin extrahálása (9) Az extractio az ínyszövetből a következő lépésekben történik: a) Az anyag súlyának meghatározása. b) Homogenizálás 1 ml 0,01 n HCl-oldatban. c) A homogenisatum centrifugacsőbe mosása 0,01 HOl-oIdattal és kiegészí­tése 2,75 ml-re. d) Fehérjekicsapás l ml 10%-os ZnS04- és 0,5 ml n NaOH-oldattal, alapos keverés közben. e) Centrifugálás hűthető centrifugában, percenként 3000 fordulattal 20 percig. f) A supernatans 2 ml-ének bemérése 2 ml 6 n HCl-oldatot tartalmazó kémcsőbe. C) A serotonin meghatározása fluorimeterrel Zeiss PMQ II. spectralphotometerrel 300 m p activatio és 550 m и fluorescen­­tia mellett végeztük a meghatározásokat, reagens savakkal szemben. A calibra­­tiós görbe felvételekor a szövetmintát 0,5 ml emberi vérrel helyettesítettük: ennek 5-hydroxvindoltartalma ugyanis elhanyagolhatóan kevés, de adsorbeáló tulajdonságaiban feltehetően a szövetmintához hasonlóan viselkedik. 5-hydroxvtryptophan a szövetekben csak etetése után mutatható ki: 5- hydroxyindolecetsav szintén csak elhanyagolható mennyiségben van jelen, ezért a kapott eredményeket 5-hydroxytrvptamin-tartalomnak tekinthetjük. 6 n HCl-ban a nem 5-hydroxyindolok fluorescentiás maximuma nem 550 nap­nál van. A módszer egyszerű, gyors és az irodalom adatai alapján csak mini­mális 5-hydroxytryptamin-veszteséggel jár, a hosszadalmas kirázásos eljárá­sokkal ellentétben. Controlként megmértük az alkalmazott reagensek fluorescentiáját. Ezt az értéket a kísérleti anyag fluorescentia-értékéből természetesen levonjuk. Részben a módszer ellenőrzésére ép és kóros íny nagyobb mennyiségében is végeztünk serotonin-meghatározást. Ennek eredményét összehasonlítottuk a kis mennyiségből végzett többszöri meghatározás eredményével. 1. táblázat Férfi és nő ínyében ép és kóros körülmények között talált serolonin-tartalom, pg/g-bnn Ép íny Gyulladt íny Parodontosisos íny Férfi Nő Férfi Nő Férfi Nő 0,18 0,47 0,24 0,62 0,25 0,25 0,36 0,62 0,32 0,30 0,47 0,12 0,28 0,10 0,28 0,17 0,40 0,70 0,26 0,18 0,17 0,12 0,56 0,55 0,18 0,20 0,19 0,21 0,16 0,14 0,13 0,14 0,40 0,27 0,72 0,31 0,15 0,11 0,16 0,11 0,12 0,22 0,10 0,09 0,23 0,09 0,18 0,15 0,20 0,30 0,20±0,13 0,26±0,12 0,42±0,29

Next

/
Oldalképek
Tartalom