Szemészet, 2007 (144. évfolyam, 1-4. szám)
2007-12-01 / 4. szám
Szemészet 144. évfolyam (2007) 187 A Debreceni Egyetem, Orvos- és Egészségtudományi Centrum Szemészeti Klinikájának (igazgató: Berta András egyetemi tanár) közleménye Donor corneák spekulár-mikroszkópos vizsgálata Kettesy Beáta, Berta András, Módis László Célkitűzés: Corneakonzerválásra és -beültetésre kerülő donor corneák vizsgálata spekulár-mikroszkóppal. Az endothelialis sejtszám pontos meghatározásához irányelvek kidolgozása. Anyag és módszer: 62 donor (átlagéletkor 65±11 év) 100 szemét vizsgáltuk kontakt spekulár-mikroszkóppal, és a centrális cornealis endotheliumot elemeztük különféle (normális, manuális korrekciót igénylő és kontraszt-effektuson alapuló) képanalizáló módszerrel. A kapott adatokat a comea vastagságának megfelelően korrigáltuk és statisztikai módszerekkel elemeztük. Eredmények: Az endothelialis sejtsűrüség a normális (korrekció nélküli) vizsgálattal bizonyult a legalacsonyabbnak (1853 ±257 sejt/mm2) a három módszer közül (p<0,0001). Ezt követte a manuális korrekción (2138±207 sejt/mm2) és a kontraszt-effektuson (2160±185 sejt/mm2) alapuló vizsgálat (p=0,25). Következtetések: A cornealis endothelium sejtsűrűségének pontos meghatározása csak a szaruhártya vastagságának figyelembevételével lehetséges. A pontos vizsgálathoz minimum 75 sejt elemzése szükséges. A legmegbízhatóbbnak a kontraszt-effektuson alapuló képelemzés bizonyult. Kulcsszavak: cornealis endothelium, spekulár-mikroszkópia, keratoplasztika Specular microscopic investigation of donor corneas Aims: The examination of preserved and implanted donor corneas by specular microscopy. Outlining of principles via which to determine the precise endothelial cell density. Materials and methods: 100 eyes of 62 donors (mean age 65±11 years) were examined with a contact specular microscope, and the central corneal endothelium was investigated by means of various image analysis techniques (normal, manual correction, and contrast effect). The results were corrected according to corneal thickness and were analyzed statistically. Results: As concerns the three methods, the lowest endothelial density (1853 ±257 cells/mm2) resulted from the normal analysis (without any correction) program (p<0.0001). This was followed by the techniques based on manual correction (2138±207 cells/mm2) and the contrast effect (2160±185 cells/mm2) (p=0.25). Conclusions: The corneal endothelial cell density can be determined exactly only if the corneal thickness is taken into consideration. For a precise investigation, a minimum of 75 cells is necessary. The image analysis technique based on the contrast effect proved to be the most reliable. Key words: corneal endothelium, specular microscopy, keratoplasty A keratoplasztikák során felhasznált donor corneák szigorú feltételeknek kell hogy megfeleljenek. Ezek közül egyik - és a későbbi funkcionális eredmény szempontjából talán legfontosabb - a donor cornea endotheliumának morfológiája és sejtsűrűsége.1 Az Európai Szembank Szövetség 2000 sejt/mm2 sejtszámot állapít meg minimális sejtszámként donor corneák beültetése esetében.3 A sejtszám meghatározására a spekulár-mikroszkóp in vivo és in vitro alkalmas. A spekulár-mikroszkópok nagyon leegyszerűsítve a fizika egyik alaptörvénye, a fénytörés és visszaverődés elvén működnek. Az endothelium sejtrétegéről kellően erős és széles fénynyaláb visszaverődő képét felfogva az leképezhető és megjeleníthető. A műszer segítségével az epitheliumon és endotheliumon megtörő és visszaverődő fény útkülönbségéből a szaruhártya vastagsága is meghatározható. Vizsgálataink során arra voltunk kíváncsiak, hogy megítélhető-e a donor corneák endothelialis szerkezete spekulár-mikroszkóppal, és alkalmas-e a készülék a donor bulbusok szűrővizsgálatára corneakonzerválás előtt? Erre azért is volt szükség, mert köztudott, hogy a bulbusok enucleatio után hypotoniássá válnak, ami nehezíti a vizsgálatot. Ismert az is, hogy post mortem a cornea rétegeiben ödéma alakul ki, tovább nehezítve az endothelialis sejtszámlálást. Célkitűzésünk volt az is, hogy a spekulár-mikroszkóppal nyert képek értékeléséhez irányelveket adjunk. Az irodalomban fellelhető adatok ugyanis ellentmondásosak: a különböző sejtanalizáló módszerek és programok jelentős különbséget mutatnak az endothelialis sejtszámot illetően.4’6’7’10,12'16’19 Ezért a képelemző programban a választható, különböző vizsgáló stratégiákat, sejtszámoló módszereket is összehasonlítottuk. Anyag és módszer A kísérletek elvégzéséhez 62 donor 100 szemét használtuk. Az enukleált bulbusokat a halál időpontja utáni 12 órán belül vizsgáltuk. A Kettesy Beáta: Donor corneák spekulár-mikroszkópos vizsgálata
