Szemészet, 2002 (139. évfolyam, 1-4. szám)
2002-03-01 / 1. szám
2. táblázat. A féloldali retinoblastomás eseteket eredményei FISH mindkét alléit jelöli az egyik alléit jelöli egyik alléit sem jelöli Tumor 0 1 7 Beteg lymphocytái 4 1 0 Szülő lymphocytái 5 0 0 Összesen nyolc féloldali retinoblastomás beteg eltávolított szeméből nyert tumorsejteket vizsgáltunk. Öt esetben rendelkezésünkre állt a tumor, a beteg és a szülők perifériás lymphocytái, három esetben pedig csak a daganat. Ugyanannak a betegnek a tumorsejtjeiben és a perifériás lymphocytáiban is csak egy alléi elvesztését mutattuk ki FISH-el. Tekintettel arra, hogy a génfunkciónak a daganat kialakulásához el kellett vesznie, ez egyben a retinoblastoma-fehérje expressziójának hiányát is jelenti. Szövettani metszeteket készítettünk a korábban általunk kettévágott szemből, ezekben a metszetekben retinoblastomafehérjét nem tudtunk kimutatni, az NSE-pozitivitás igazolta, hogy tumorsejteket vizsgáltunk. Mindezek alapján, bár a beteg másik szemében a mai napig nem jelentkezett a daganat, gyakorlatilag bilaterális retinoblastomás betegként kell tekinteni, akinél csak az inkomplett penetrancia magyarázza a második szem daganatmentességét. (A második mutáns alléi kimutatására PCR-analízist végeztünk.) ezek alapján, bár a beteg másik szemében a mai napig nem jelentkezett a daganat, gyakorlatilag bilaterális retinoblastomás betegként kell tekinteni, akinél csak az inkomplett penetrancia magyarázza a második szem daganatmentességét.6 A második mutáns alléi kimutatására PCR- analízist végeztünk, melynek eredményeképpen beigazolódott, hogy a FISH-el nem detektálható mutáció a 13, 15-16 és a 24-es exonokat érinti. Megbeszélés Statisztikai számítások szerint - melyek a genetikai vizsgálatok alapján igazolódni látszanak - a féloldali daganattal bíró betegek mintegy 50%-a a betegség herediter formájában szenved. Azaz számos látszólag sporadikus eset új germinális mutációt hordoz.9 Míg a familiáris eredetű tumorokban a gyermek az RB1 gén egyik alléljának mutáns változatát örökli, addig sporadikus esetekben egy retinoblastsejt mindkét normális RB 1 allélja szomatikus mutáció áldozatául esik.15 A familiáris forma autoszomálisan öröklődik, a hajlam ennek az első mutációnak az átörökítését, vagyis az adott génre - RB 1 - nézve a heterozigótaság elvesztését jelenti,15 tehát az adott sejtek a defektiv allélre nézve homozigótákká váltak,15 azaz a tumor kifejlődéséhez egy újabb, második mutáció szükséges mindkét formánál. Ha csak az egyik alléi sérül, akkor retinoblastoma nem alakul ki, de ha a germinális sejtek mutációt szenvednek az RB1 lókuszon, akkor a hibás alléi átöröklődik. Az utód minden szomatikus sejtje tartalmazni fogja a defektust Ilyen esetekben a normál populációhoz viszonyítva közel 40 000-szer nagyobb az utód esélye arra, hogy retinoblastoma alakuljon ki és közel 400-szor nagyobb, hogy osteosarcoma, fibrosarcoma vagy melanoma lépjen fel.14 A retinoblastoma esetében befolyásolhatja a másodlagos tumorok megjelenését az alkalmazott terápia is.1 Megfigyelések és családfa-analízisek alapján a bilaterális, újonnan megjelenő (negatív családi anamnézis) daganatoknál a beteg minden egyes utódjának 50%- os esélye retinoblastoma kialakulására. Mégis a gyakorlatban ezekben az esetekben a családban való előfordulási arány kisebb mint 22%.14 A féloldali sporadikus eseteknél az érintettek gyermekeiben a tumor előfordulási esélye 10%, de a gyakorlatban a beteg gyermekeinek 5% az esélye arra, hogy retinoblastoma alakuljon ki. Ha a gyermek szülei genetikai eltérést nem mutatnak, akkor annak a valószínűsége, hogy a második gyermek beteg lesz 1%, ha a szülők egyike alléldefektust hordoz, ez az arány 6%-ra nő.14 Bilaterális retinoblastomás eseteinken vizsgáltuk a FISH diagnosztikus értékét. Sajnos nem minden esetben volt tumorból vett sejtmintánk (más intézményben végezték az enucleatiókat), így összesen csak hét daganatból vett sejteket tudtunk vizsgálni. Ezek közül négy esetben sikerült FISH-el deléciót kimutatni. A négy deléciót mutató tumoros betegnél a perifériás lymphocyták egy esetben mutattak allélvesztést, ennél a betegnél a sűrűn végzett kontrollvizsgálatok lehetővé tették a második szemben jelentkező daganat igen korai diagnózisát és kezelését. A szülők lymphocytáinál egy esetben sem találtunk eltérést. Féloldali retinoblastomás betegeink közül a tumorban egy kivétellel mindkét alléi elvesztését kimutattuk. Egy esetben csak egy deléciót találtunk a tumorban, de ebben az esetben a perifériás lymphocytákban is ugyancsak egy alléi jelölődött. Felmerült annak a lehetősége is, hogy a tumor olyan területéről vettünk sejteket, ahol nem retinalis elemek, hanem esetleg lymphocyták, ill. egyéb sejtek voltak többségben, és/vagy a hibridizációs hiba lehetősége sem volt elvethető. A tumorból (a korábbi mintavétel helyének megfelelő területről) készített metszeteken az NSE-, ill. a retinoblastoma-protein kimutatását célzó vizsgálat ezt nem valószínűsítette. A hibridizációs hiba lehetőségét egészséges egyedből vett lymphocytával történt felülcseppentéssel - egyidejű hibridizálással - zártuk ki. A FISH-el nem detektálható deléció kimutatására PCR-vizsgálatot végeztünk. Statisztikai kimutatások szerint a retinoblastoma előfordulása 1:14000-1:28000-hez gyakoriságú, tehát ritka daganat, amely mintegy 40%-ban öröklődő, azaz a tumor megjelenése elég nagy valószínűséggel a beteg utódaiban is várható. A további, nem öröklődő 60%-ban a daganat megjelenési valószínűsége az utódokban az átlagpopulációval közel megegyező. A daganat penetranciája mintegy 90%os. A sporadikus, esetek elkülönítése az öröklődő forma első jelentkezésétől nem könnyű, hiszen egyik esetben sincs családi előzmény. Ezek a családi előzmény nélküli, de öröklődő formák az összes előzmény nélküli retinoblastomák mintegy 20%-át adják.11 Az ilyen esetekben az érintett családok genetikai vizsgálata adhat választ arra, hogy melyik formáról van szó. Következtetés: Retinoblastomadaganatok egyes eseteiben viszonylag gyorsan, a családtagoktól vett vérmintából, FISH-vizsgálattal nyújthatunk genetikai tanácsadást az érintett családoknak. Ehhez azonban szükség van az eltávolított tumor frissen vett sejtjeire is, annak eldöntésére, hogy Damjanovich Judit
