Szemészet, 1992 (129. évfolyam, 1-4. szám)
1992-06-01 / 2. szám
Szemészet, 129 (1992) 31-33 Szent-Györgyi Albert Orvostudományi Egyetem Szemészeti Klinika (Igazgató: Süveges Ildikó), József Attila Tudományi Egyetem, Optikai és Kvantumelektronikai Tanszék és az Orvostovábbképző Egyetem, Pathológiai Intézet Elektronmikroszkópos Labor** (Igazgató: Virágh Szabolcs) közleménye Szaruhártya scanning elektronmikroszkópiás vizsgálata excimer laser keratotectomiát követően Mohay Judit, Süveges Ildikó, Ratkay Imola, Füst Agnes, Bor Zsolt*, Szabó Gábor*, Rácz Béla*, Hopp Béla*, Virágh Szabolcs" A szerzők Argon Fluorid excimer laser (193 nm) segítségével photoablatiot végeztek vágóhídról származó sertésszemek szaruhártyáján. A beavatkozást követően a bemetszett területek scanning elektronmikroszkópiás vizsgálatát végezték el, a sebfelszín ultrastrukturalis és felszíni tulajdonságainak elemzése érdekében. Megállapítják, hogy az alkalmazott excimer laser biológiai értelemben vett térbeli feloldóképessége az 1 /xm-t eléri, a sebhatárok párhuzamosak, az epithelben kisfokú sejtveszteség lép fel, a stroma lamellák szabályosak, párhuzamosak, a mélyebb stroma rétegekben pseudomembrán alakul ki, az endothel az alkalmazott energiasűrűség mellett nem sérül. Fizikai tulajdonságait tekintve tehát az alkalmazott excimer laser megfelelőnek látszik photorefraktiv és kurativ keratectomia végzésére egyaránt. Kulcsszavak: cornea, excimer laser, photoablatio, scanning elektronmokroszkópia Scanning electron microscopical study of corneal incisions induced by an excimer laser An excimer laser UV light (193 nm) was applied to produce a variety of incisions in the cornea of enucleated pig eyes. Scanning electron microscopical analysis of the photo ablated areas demonstrated the surface properties of the wound edges. The used excimer laser has a very high degree of accuracy (1/zm) and produce sharp wound-edges, small amount of cell loss in the epithelium, and a pseudomembrane formation in the stroma. With the applied power of laser energy the stromal lamellae remained parallel, regularly arranged, and no endothelial damage was present. Considering the physical properties of this excimer laser, it seems to be usefull to performe refractive and other type of keratectomies. Keywords: cornea, excimer laser, photoablation, scanning electron microscopy Bevezetés Az UV-fényt kibocsátó ún. excimer laser kezelés bevezetése a szem elülső szegment sebészetébe nagy jelentőségű lépés volt [10]. A kezelt felszínen, a szaruhártyán igen jól szabályozható módon [9, 10] érvényesül a lasersugárzás hatása, anélkül, hogy az exponált terület közvetlen környezete ill. az exponált réteg alatti szövetek károsodnának [4,11]. A metszések precíz kontrollja új távlatokat nyit a refraktív és kurativ szaruhártya-sebészet tökéletesítésében [2, 3, 5]. Elsőként Trokel és Srinivasen [10] írták le az excimer laser által szaruhártyán létrehozott ún. photoablatio fizikai és histologiai jellemzőit. Hazánkban elsőként a JATE Optikai és Kvantum-elektronikai Tanszéke fejlesztett ki olyan UV-lasert, amelynek segítségével a cornea photoablatioja kivitelezhető. Jelen tanulmányunkban sertésszemeken végzett 193 nm Argon Fluorid excimer laser photoablatiot követően a kezelt felszín scanning elektronmikroszkópiás vizsgálatát végeztük el. Célunk az UV-laser hatás által létrehozott sebfelszínek ultrastrukturalis elemzése volt. Jelenlegi vizsgálatainkat előtanulmánynak tekintjük, amelyet a későbbiekben élő szöveten ill. sejttenyészetekben végzett további kutatómunka fog követni. Módszer Kísérleteinket vágóhídról származó sertésszemeken végeztük. A laser energiája 50 mJ, ismétlési frekvenciája 1 Hz volt. A nyalábot f=100 mm-es kvarclencsével fókuszáltuk. Az energiasűrűséget a szemnek a fókusztól való távolságának változtatásával kb. 320 mJ/cm2 értékre állítottuk be. Az ablatio sebessége kb. 0,15 /xm/lövés volt. A photoablatio különböző méretű bronzmaszkok segítségével történt, kerek, hosszúkás és négyzetrács alakú maszk alkalmazásával (1. ábra). MASZK CORNEA 1. ábra: A bronzmaszk segítségével az UV-laser csak a kiválasztott cornea felszínen érvényesülhet. A maszk réseinek, így a kezelt felszínnek is a nagysága, alakja az igények szerint változtatható. A photoablatio mélysége az energiasűrűség és lövésszám függvénye. A photoablatio során maximum 170 /xm mélységű cornea-részeket távolítottunk el, a négyzetrács alakú expositio esetében 150/xmxl50 /xm periódusú négyzetrácsot alkalmaztunk. A laser expositiot követően a sertésszemeket 4%-os glutáraldehydben fixáltuk, majd a kezelt részeket a szaruhártyából preparációs mikroszkóp alatt kimetszettük. Az anyagot 2%-os puffereit osmium-tetroxiddal utánfixáltuk, dehydráltuk, majd kritikus hőmérsékleten szárítottuk. A mintákat platina-arany ötvözettel fedtük, majd Phillips scanning elektronmikroszkóppal vizsgáltuk.