Szemészet, 1985 (122. évfolyam, 1-4. szám)
1985 / 1. szám
Szemészéi 122. 19 —23. 1985. A Debreceni Orvostudományi Egyetem Szemklinikájának (igazgató: Alberth Béla egyetemi tanár) közleménye Donor lymphocyta antigénnél kiváltott cellularis immunválasz vizsgálata keratoplastica után KELENHEGYI CSILLA, SÜVEGES ILDIKÓ és ALBERTH BÉLA Keratoplastica vonatkozásában az utóbbi években mind többen észlelték, hogy a transplantatio után a recipiens szervezetben, systemás immunválasz jön létre [1, 2, 10, 11, 12, 13, 14, 15]. Előző munkánkban elsőként vizsgáltuk és megállapítottuk, hogy a keratoplastica után a recipiensben szignifikánsan emelkedik az aktív és totál E-rosettát képző lymphocyták száma. Azon esetekben, mikor rejectio nem következik be a 3—4 héten, a T-lymphocyták aránya normalizálódott, míg rejectio esetén továbbra is emelkedett maradt [9]. Ez azonban a szervezet általános, nem specifikus immunreaktivitásának fokozódását jelzi, ill. az immunszupressziós kezelés hatásának mérésére alkalmazható [4, 6]. Jelen vizsgálatainkkal a recipiens specifikus immunreaktivitásának változását vizsgáltuk. Leukocyta migratios testet alkalmazva donor lymphocyta crude antigént használtunk. Ezzel párhuzamosan vizsgáltuk a recipiensek általános immunreaktivitásának változásait, meghatározva a rosettát képző T-lymphocyták arányát. 27 cornea transplantált beteg vizsgálatát végeztük el. A T-lymphocyták arányát meghatároztuk műtét előtt, és a műtétet követő 1, 2, 3, 4. héten. Donor lymphocyta antigénnel migratios testet végeztünk a műtétet követően szintén az 1, 2, 3, 4. héten. A migratios testhez kontrollként 12 cataracta miatt operált beteget vizsgáltunk. Az antigén preparálást a következőképpen végeztük. A cadaver cornea kivételével egyidőben az exitust követő 6—8 órán belül steril körülmények között kipreparáltuk a cadaver peripherias nyirokcsomóit. Óvatos szeletelés után a nyirokcsomó szeleteket fiz. NaCl-ban mostuk, majd géz filteren átpréseltük. A lymphocyta szuszpenziót ezt követően 7,2 pH-ás foszfát pufferrel (P. B. 8.) mostuk, a sejtszámot 2 X108 sejt/ml koncentrációra állítottuk be. A sejtek életképességét tripánkék festéssel vizsgáltuk. A lymphocytákat ultrahanggal tártuk fel. A crude antigén szuszpenziót a felhasználásig — 70 °C-on tartottuk. Felhasználás előtt Lowry szerint fehérjemeghatározást végeztünk, és az antigén szuszpenzió fehérje tartalmát 300 mikrogr/ml koncentrációra kalibráltuk. A leukocyta migratios testet Bendixen [3] capillaris módszerével végeztük azzal a módosítással, hogy a rendszerben a beteg szérumát nem alkalmaztuk. Az antigént is közvetlenül a migratios kamrába, Parker-tápfolyadékba helyeztük. Az incubálás után a migratios területet planiméterrel mértük, és a következő képlet szerint számoltunk. Mx A birka vvt-vel rosettát képző T-lymphocyták arányát Jondal [8] leírása alapján határoztuk meg. Az azonnali, aktív E-rosettát képző lymphocyták arányát Wybrand és Fudeberg [16] szerint vizsgáltuk. Borjú szérumot nem alkalmaztunk. 19
