203984. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kutya coronavírus elleni vakcina előállítására
1 HU 203 984 B 2 Kutya száma Vírussemlegesítő antitest titerek Vakcináltak Vakcinálás előtt 2. vakcinálás előtt Provokálás előtt Provokálás után DE-95 0 0 8 1024 DE-96 0 0 8 1024 DE-97 0 0 2 128 DE-98 0 0 2 256 DE-99 0 0 2 256 F-125 0 0 0 64 F-126 0 0 0 128 F-127 0 0 4 64 F-128 0 0 2 128 F-129 0 0 4 512 F-130 0 0 8 2048 F—131 0 0 2 1024 F-132 0 0 0 512 F-133 0 0 8 512 F-134 0 0 16 2048 Mértani átlag 0 0 5 402 Kontrollok DF-53 ND2 ND 0 64 DF-54 ND ND 0 128 DF-55 ND ND 0 128 DF-56 ND ND 0 518 DF-57 ND ND 0 64 Mértani átlag-0 128 1 Az antitest titert úgy fejezzük ki, mint annak a legnagyobb szérumhígításnak a reciprokát, amely teljes semlegesítést mutat ■ ND - nem határoztuk meg 5. táblázat Mintaoltás immunogenecilási vizsgálat ELISA semlegesítő antitesttiterek Kutya száma ELISA semlegesítő antitesttiterek Vakcináltak Vakcinálás előtt 2. vakcinálás előtt Provokálás előtt Provokálás után DE-88 O1 0 640 >20 480 DE-89 0 80 10240 >20 480 DE-90 0 40 5 120 >20 480 DE-91 0 10 640 20 480 DE-94 0 0 320 >20 480 DE-95 0 0 640 20 480 DE-96 0 0 640 >20 480 DE-97 0 0 640 10240 Kutya száma ELISA semlegesítő antitesttiterek Vakcináltak Vakcinálás előtt 2. vakcinálás előtt Provokálás előtt Provokálás után DE-98 0 0 1280 >20 480 DE-99 0 0 320 20 480 F-125 0 0 1280 >20 480 F-126 0 20 640 >20 480 F-127 0 10 160 >20 480 F-128 0 0 640 10240 F-129 0 0 320 >20 480 F-130 0 10 1280 >20 480 F-131 0 20 160 >20 480 F-132 0 0 80 >20 480 F-133 0 0 1280 >20 480 F-134 0 20 1280 >20 480 Mértani átlag 0 3 715 >19 106 Kontrollok DF-53 ND2 ND 0 .2560 DF-54 ND ND 0 sí 2o ; DF-55 ND ND 0 2560 ■■ DF-56 ND ND 0 5120 .3. DF-57 ND ND 0-5120 1 Mértani átlag-0 3880 '-rr-1 Az antitest titert úgy fejezzük ki, mint annak a szérum-hígításnak reciprokát, ahol a különbség a 410 nm-nél mért adszorbanciában a coronavírust tartalmazó mikrotitráló lemez üregek és a sejtkontrollt tartalmazó üregek között >0,05. ~ ND -nem határoztuk meg A fertőzés utáni hőmérséklet-választ szintén követjük, mint a klinikai CCV betegség paraméterét. A fertőzés után hőmérsékletválasz egyaránt előfordul mind a vakcináit, mind a kontroll állatokban. A viszonylagos növekedés a hőmérsékletben nagyobb a kontrollokban, mint a vakcináit állatokban. A növekedés a hőmérsékletben nem elég ahhoz, hogy gondot okozzon. A hőmérséklet-profil a kontroll kutyakölykökben, úgy tűnik, kétfázisú, egy másodlagos hőmérsékleti válasszal, amely a provokálás utáni 10. napon lép fel. A kétfázisú hőmérséklet-profilt azelőtt is észlelték virulens CCV- vel fertőzött kutyakölyköknél. Ilyen kétfázisú hőmérsékleti választ nem jegyeztünk fel a kontrolloknál. ELISA módszert fejlesztünk ki, hogy közvetlenül mérjük a vakcináit kutyakölykök béltraktusában nyújtott védelmet a béltraktus fertőzése ellen virulens CCV-vel. A 6. táblázat mutatja be a provokálás után naponként végzett anti-CCV IgA meghatározásokat. A táblázatban található értékek vakcináit és nem-vakcináit állatok provokálás utáni relatív anti-CCV IgA értékét mutatják. Az anti-CCV IgA az alapvonal szintjénél vagy ahhoz közel marad. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 7