203969. lajstromszámú szabadalom • Eljárás retinoidtartalmú gyógyászati és kozmetikai készítmények előállítására
1 HU 203 969 B 100 ul acetonos oldat térfogatban visszük fel. A kontrollcsoport állatait tesztvegyületet nem tartalmazó acetonnal kezeljük. Az állatokat 10 hetes kezelés után leöljük, bőrmintákat veszünk és ezeket standard módszerekkel feldolgozzuk. Minden állat bőrmintájának 6 p.-os metszetét az elasztin meghatározása céljából Luna-féle színezékkel megfestjük és a regenerálódás mértékét kvantitatíve meghatározzuk. E kísérleti modellnél a regenerálódás mértékéül a normalizálódott dermis megjelenése szolgát, a felhámtól az összenyomott elasztin rétegig lefelé terjedően. A regenerálódás mértékét e zóna szélessége fejezi ki. A vizsgálat során a hisztológiai metszet standard hossza mentén a zóna nagyságát kép-analizátor segítségével mérjük és az eredményeket mint összterület mm 2/20 mikroszkópos mező mértékegységben adjuk meg. Az eredményeket a Student-féle II. táblázat 10 Csoport Ráncosodási index Kontroll 1,9+/- 0,3 0,1 dg A-vegyület 1,4+/-0,5 0,5 pg 1,0+/-0,3* 2,0 dg 0,8+/-0,2** 10,0 dg 0,3+/-0,1*** 50,0 dg 0,3+/-0,1*** 15 *P < 0,05, **P < 0,01, "*P < 0,001 a kontrolihoz viszonyítva A 4-8. példákban megadott összetételű krémeket és géleket szokásos eljárásokkal állítjuk elő. 4. példa Alábbi összetételei krémet készítünk. t-teszt segítségével analizáljuk. Az eredményeket az I. Komponens Mennyiség, tötáblázatban foglaljuk össze. Az I. táblázatban minden meg/tömeg% hatóanyag-koncentrációt 6-10 állatból álló csoporton 20 (I) általános képletű vizsgáltunk. vegyület 0,00001-1,3 Cetil-alkohol 1,50 I. táblázat Sztearil-alkohol 2,50 Span 60 Csoport Regenerálódott zóna, mm2 25 (szorbitán-sztearát) 2,00 Kontroll 0,007 +/- 0,003 Ásványolaj 2,00 0,1 ug Arlacel 165 (gliceril/ A-vegyület 0,005 +/- 0,001 PEG 100 sztearát) 4,00 0,5 dg 0,006+/-0,003 Tween 60 2,0 dg 0,021 +/- 0,003* 30 (poliszorbát 80) 1,00 10,0 dg 0,015+/-0,004 Migliol 818 50,0 ug 0,025+/-0,007* (kaprilsav/kapronsav/ P < 0,05 kontrolihoz viszonyítva linolsav-triglicerid) 5,00 A-vegyület = S-{p-[2-(5,6,7,8-tetrahidro-5,5,8,8-Szorbit-oldat 4,00 tetrametil-2-naftii)-propenil]-feuil)-dimetil-35 Dinátrium-edetát 0,10 tiokarbamát Butilezett hidroxianizol 0,05 3. példa Metilparabén 0,18 (I) általános képletéi vegyületek hatása szőrlelem-Propilparabén 0,05 tett egereken UVB besugárzással előidézett ráncok-40 Vízzel kiegészítve 100,00-ra ra Szőrtelen egereket bőrkárosodást előidéző dózisban UVB besugárzásnak vetünk alá; a sugárzásnak kitett bőrfelületeken ráncok jelennek meg. Minden állat besugárzott bőrfelületéből folyékony fogászati 45 lenyomatvevő-anyag (SILFLO - Flexico Developments Ltd.,Nagy-Britannia) segítségével egy másolatot készítünk. A lenyomatokon a ráncok alacsony szögből történő megvilágításakor árnyékot vető szegélyek alakjában jelentkeznek. A ráncosodott minta 50 jellemzője az egymástól kb. 2 mm távolságban szabályosan elrendezett szegélyek megjelenése. A ráncosodás mértékét a fenti vonal-rendszer felhasználásával vizuálisan értékeljük és 0—4-ig terjedő „ráncosodási index-skála” segítségével fejezzük ki, ahol 0 = a rán- 55 cok teljes megszűnése és 4 = maximális ráncosodás. Azt találtuk, hogy az (I) általános képletű vegyületek mikrogramm nagyságrendű ED50 értékkel dózis-függőén szüntetik meg a ráncokat. A kapott eredményeket a II. táblázat tartalmazza. 60 5. példa Alábbi összetételéi krémet készítünk: Komponens (I) általános képletű Mennyiség, tömeg/tömeg% hatóanyag 0,00001-1,0 Cetil-alkohol Arlacel 165 (gliceril/ 5,25-8,75 PEG 100 sztearát) Migliol 818 (kaprilsav/kapronsav/ 3,75-6,25 linolsav-triglicerid) 11,25-18,75 Szorbit-oldat 3,75-6,25 Dinátrium-edetát 0,075-0,125 Carbopol 934 P (Carbomer 934P) Butilezett hidroxi-0,15-0,25 anizol 0,0375-0,0625 Metilparabén 0,135-0,225 Propilparabén 0,0375-0,0625 4
