203964. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kötődés indukálására alkalmas gyógyszerkészítmény és hatóanyaga előállítására
1 HU 203 964 B 2 38 g zománchártyát elpépesítünk 780 ml 0,5 mólos ecetsav-oldatban (pH = 4,1), majd jégfurdőben, ultrahanggal elhomogenizáljuk. A homogenizátumot hidegen tartva keveijük 22 órán át, majd az oldhatatlan anyagot centrifugával eltávolítjuk és a felülúszót liofilizáljuk. 8,5 g anyagot kapunk, aminek fehérjetartalma kb. 20%, ez az összes fehérjének kb. 50%-a. A liofrlizált készítményből meghatároztuk a víz-, az acetátion-, a fehérje- (Lowry-módszer) és a szénhidrát(antron-reagens) -tartalmat, az aminosav-összetételt; elemanalízist végeztünk, meghatároztuk a fehérjék molekulatömeg szerinti megoszlását és a fehérjék izoelektromos pontjait. Klinikai felhasználás előtt a készítményt ecetsav-oldatban feloldjuk, sterilre szűrjük és 10 ml-es ampullákban liofilizáljuk steril körülmények között. A periodontitis kezelésére embereken végzett kísérletekhez elnyertük a Svéd Orvoskamara és az Etikai Bizottság jóváhagyását, így a készítményeket a foggyökérhártyagyulladás szokásos módon végzett sebészi kezelésének kiegészítésére használtuk. Miután a beteg foga(ka)t feltártuk, eltávolítottak a fogkövet és a foggyökércsúcs körüli gyulladásos sarjszövetet, majd a gyökerek csupasz felszínét beecseteltük az E-3 készítménnyel és zártuk a sebet Az eredményt rendszeres időközönként végzett utóvizsgálattal ellenőriztük: megmértük a fog- 5 tartás erősségét a gingivális indexet és röntgenfelvételt is készítettünk. Összehasonlításként korábban kezelt betegek adatait és kezelt betegek fogazatának ép területeit használtuk fel. Az eredmények azt mutatták, hogy az E-3 készítménnyel kezelt fogak körül a csontos fogmeder pereme jelentősen (4-8 mm-rel) emelkedett, és ezzel az állcsont és a foggyökerek közötti kötődési felület is megnőtt 5-9 mm-rel. Ez olyan terápiás eredmény, amit a hagyományos módon végzett műtéti kezeléssel soha nem sikerült elérni. A gyógyulás folyamata gyorsabb volt, a fogíny jobban regenerálódott és feljebb húzódott a fogakon. Megállapíthatjuk, hogy a zománchártya-kivonat fehérjéinek alacsony molekulatőmegű frakciója elősegíti a periodontitis következtében meglazult fogak kötődésének regenerálódását. A 4. táblázatban négy, találmány szerinti készítmény analízisének adatait mutatjuk be. 10 15 20 4. táblázat Zománchártya-komogenizátum és az abból készített kivonatok analízisének eredményei Vizsgálat Homogenizátum (E-l) Savas kivonat (E-3) Sómentes kivonat (E-10) Sófrakció (2. példa) Elemanalízis (tömeg%) C 113 31 50,4 NK H 1,7 4,4 6,8 NK N 3,9 4,5 153 0,7 0 9.4 27,5 21 NK S 0,2 035 13 0,1 Cl 5,5 0,6 <0,1 13 p 8,8 3,5 0,1 4,3 Ca 11,9 12 <0,1 31,6 K 0,2 0,4 <0,1 NK Fehérjetartalom (tömeg%) Lowry-módszer 23 20 72 <4 Aminosav-analízis <23 <26 <90 NK Szénhidrát-tartalom (tömeg%) Antron-reagens NK 0,4 13 NK Víztartalom (tömeg %) Kari Fischer-módszcr NK 2 6 NK Acetátion-tartalom (tömeg%) GC-módszer NK 38 4 NK Aminosav-analízis (az összes aminosav %-ában) Pro NK 18,0 19,0 NK Glu NK 17,8 19,0 NK Leu NK 9,0 9,1 NK His NK 8,7 9,2 NK Ser NK 4,8 4,6 NK 6
