203789. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antikokcidiális és növekedést serkentő hatású policiklusos savas éter-típusú antibiotikumok előállítására
1 HU 203 789 B2 A találmány tárgya eljárás (I) általános képletű - a képletben Me—CH3 - új savas policiklusos éter típusú antibiotikum - amely abszolút sztereokémiája a képletnek felel meg - és gyógyászati szempontból elfogadható kationos sóik előállítására, mely tápanyagkeverékek előállítására alkalmas, amelyek baromfi-, szarvasmarha- vagy sertéstápként szolgálnak. Az (I) általános képletű vegyület az antibiotikumok savas policiklusos étercsoportjához tartozik. Ez a család olyan jól ismert vegyületeket foglal magában, mint- a monenzim (The Merck Index, 10. kiadás, Merck and Co., Inc., Rahway, N.J., 1983; 6100 sz. címszó),- a nigericin (ugyanitt, 6390 sz. címszó),- a narazin (ugyanitt, 6271 sz. címszó),- a laszalocid (ugyanitt, 5204 sz. címszó) és- a szalinomicin (ugyanitt, 8193 sz. címszó). A témával foglalkozik Westley cikke [Polyether Antibiotics, Adv. Appl. Microbiol., 22, 177-223 (1977)]. A találmány szerinti vegyülethez szerkezetileg legközelebb áll a portmicin. Ezt az antibiotikumot egymástól függetlenül írják le a következő irodalmi helyek;- Hamill et al., 4 582 822 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás,- Kusakabe et al., 158 179 sz. európai szabadalmi bejelentés,- Tetrahedron Letters, 28, 3357-3360 (1987),- J. Antibiotics, 40,237-238 (1987). Ez az utóbbi vegyület a tetrahidrofurán B gyűrűn egy alfa-hidrogénatomot tartalmaz, míg a találmány szerinti vegyület ugyanezen a helyen egy alfa-metilcsoportot hordoz. Az említett vegyületeket általában kokcidiosztatikumként, takarmányadalékként (a növekedés elősegítésére) és/vagy a sertés-dizentéria ellen használható szerként ismerik. Az Actinomadura sp. ATCC 53708 tenyészete, vizes közegben aerob körülmények között fermentálva, egy új savas policiklusos éter antibiotikumot, az előbbiekben meghatározott (I) képletű vegyületet termel. A találmány tárgya eljárás az említett (I) képletű vegyület előállítására - ideértve ennek gyógyászati szempontból elfogadható kationos sóit -, amely abból áll, hogy az említett Actinomadura sp. ATCC 53708 törzset vizes táptalajban - amely asszimilálható szén- és nitrogénforrást tartalmaz - fermentáljuk, előnyösen süllyesztett aerob körülmények között, amíg kinyer hető mennyiségű említett (I) képletű vegyület képződik. Antikokcidiális szerként, a sertés-dizentéria megelőzésére vagy kezelésére és/vagy növekedést fokozó anyagként való felhasználás esetén az (I) képletű vegyületet nem feltétlenül különítjük el a fermentléből és állítjuk elő lényegében tiszta alakban, hanem esetleg nyers alakban használjuk fel: vagy kicsapott formában, micéliummal keverve (ezt a fermentléből szűréssel nyerjük ki) vagy olyan szilárd anyagként, amelyet a teljes fermentlé porlasztva vagy fagyasztva szárításával állítunk elő. Az említett, gyógyászati szempontból elfogadható kationos sók közé tartoznak a következők, de a fogalom nem korlátozódik ezekre: nátrium-, kálium-, kalcium-, ammónium-, N,N’-dibenzil-etilén-diamin-, N-metil-glukamin-(meglumm) és dietanol-amin-só. Kitüntetett kationos só a kálium- és a nátriumsó. A hatóanyagokból előállítható tápkeverékek egyike szarvasmarha vagy sertés takarmányozására használható és az (I) képletű vegyületet olyan mennyiségben tartalmazza, amely hatásos ezekben az állatokban a növekedés elősegítése és/vagy a takarmányhasznosítás vonatkozásában vagy sertések esetében a dizentéria megelőzésére vagy kezelésére. A másik baromfi esetében alkalmazható és az (I) képletű vegyületet olyan mennyiségben tartalmazza, amely hatásos a baromfiban fellépő kokcidiális fertőzés leküzdésére. Ugyancsak alkalmazható a hatóanyag a növekedés elősegítésére és/vagy a takarmányhasznosítás hatékonyságának fokozására sertésben és szarvasmarhában. Az eljárás abban áll, hogy a sertésnek vagy szarvasmarhának az (I) vegyületet a növekedést elősegítő vagy a takarmányhasznosítás hatékonyságát fokozó mennyiségben - különösen táp-takarmánykeverék alakjában - beadjuk. Alkalmazható a dizentéria megelőzésére vagy kezelésére sertésben, amely abból áll, hogy a sertésnek olyan mennyiségben adjuk be az (I) képletű vegyületet, amely hatásos a dizentéria sertésben való megelőzése vagy kezelése tekintetében, és alkalmazható a kokcidiális fertőzés kiküszöbölésére baromfiban, amely abból áll, hogy a baromfinak az (I) képletű vegyület antikokcidiálisan hatásos mennyiségét adagoljuk be, különösen takarmánykeverék alakjában. A találmány szerinti (I) képletű policiklusos éter antibiotikum termelésére képes tenyészetet Actinomadura sp.-ként nevezzük meg. Ezt az ATCC-ben (Rockville, Maryland) helyeztük letétbe, típustenyészetként, az 53708 számon. A szabadalom megadása esetén a szabadalom oltalmi ideje alatt biztosítjuk, hogy ez a letétbe helyezés állandó érvényben maradjon az ATCC-ben és a köz számára könnyen hozzáférhető legyen a tenyészet. Az új tenyészetet egy talajmintából (Tuzla, Isztambul, Törökország) különítettük el és a Pfizer Inc. törzsgyűjteményében az N777-1 számon tartottuk nyilván. A tenyészet leírását és osztályozását L.H. Huang végezte. Azt találta, hogy a tenyészet az actinomycetesekre jellemző, szűk mérethatárok közé eső hifákat termeli, valalmint jellemző egy olyan légmicélium, amelyen rövid spóraláncok jelennek meg és egy nemfragmentált szubsztrát-micélium. A teljes sejtelemzés eredményei ugyancsak azt jelzik, hogy a törzs az Actinomadura genushoz tartozik. A mikroorganizmus ferde agar tenyészetét ATCC 172 húslevesbe visszük be és rázógépen 4 napon át 28'C-on tenyésztjük. A tenyészetet 20 percen át centrifugáljuk, háromszor mossuk steril desztillált vízzel és olyan táptalajokra visszük át, amelyeket általában alkalmaznak az Actinomycetales azonosítására. A tenyésztést 28 °C-on végezzük és az eredményeket különböző időpontokban, de legáltalánosabban a 14. napon olvassuk le. A színeket a kialakult terminológiának 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 2
