203674. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gyengített pulyka rhinotracheitis vírus és azt tartalmazó vakcina előállítására
1 HU 203 674 B 2 A találmány tárgya eljárás gyengített pulyka rhinotracheitis vírus és ebből készült vakcina előállítására, amely szárnyasoknak pulyka rhinotracheitis vírus vagy szerológiaüag rokon törzsek által okozott betegségek ellen adagolható. A szárnyasok, mint például pulykák és csirkék ipari méretekben történő tenyésztése jól ismert és a gyakorlatban széles körben megvalósított módszer. Már nem csupán az év egy bizonyos időszakában, például karácsonykor fogyasztják a pulykahúst, hanem - a modern pulykanevelési módszereknek és berendezéseknek köszönhetően - a pulykahús egész évben a fogyasztók rendelkezésére áll, és például pulyka-rolád vagy pulyka-„burger” formájában is fogyasztható. A pulykák ipari léptékben történő tenyésztésének kezdetén felbukkant a pulykáknak egy légzőszervi megbetegedése, amelyet pulyka rhinotracheitisnek neveztek. A pulyka rhinotracheitis Nagy-Britanniában először 1985 júniusában fordult elő, de külföldön már évekkel előbb ismeretes volt klinikaüag hasonló betegség. A pulyka rhinotracheitis akut és nagyon fertőző légúti betegség, amely a pulykákat bármely korban megtámadhatja. A morbiditási és mortalitási arány elérheti a 100%-ot, illetve 50%-ot is, és ez nyüvánvalóan rendkívül káros a pulykatenyésztés gazdaságosságára. A pulyka rhinotracheitist rendkívül nehéz kezelni. A kezdeti fertőző vírus gyorsan csillótlanítja a pulykák légcsövét. A kezdeti pulyka rhinotracheitis vírus fertőzést gyakran követi fertőzés különböző baktériumokkal, amelyek önmagukban, normális körülmények között nem okoznak fertőzést. A normális kezelési módszerek gyakran nem bizonyulnak hatásosnak. Ez azt eredményezi, hogy azok a pulykák, amelyek túlélik a kezdeti vírus-fertőzést, gyakran krónikus fertőzöttségben szenvednek. A normális gyógyszeres kezelés kevéssé hat a baktériumokra, ha azok már megtelepedtek a légzőrendszerben, továbbá nincsen gyógyszer a kezdeti fertőző vírus ellen sem. A pulykákon kívül a pulyka rhinotracheitis vírus vagy szerológiailag rokon törzsei nyüvánvalóan más szárnyasokat is, például csirkéket, gyöngytyúkokat, fácánokat és kacsákat is megtámadnak. A csirkék közül akár az étkezési célra ipari léptékben tenyésztett broüerek, akár a tojástermelő tenyészetek vagy tojók ki vannak téve a fertőzésnek. A pulyka rhinotracheitis vírussal vagy szerológiaUag rokon törzseivel fertőzött egyéb szárnyasoknál a betegség tünetei ugyanazok vagy eltérőek, mint a pulykák tünetei. A fertőzött csirkékről gyakran mondják, hogy „dagadt-fej szindrómá”-juk van, és ezeknek a csirkéknek duzzadtak lehetnek a peri- és infraorbitális üregei az opisthotonosszal és a torticollisszal együtt. A csirkék elveszíthetik azt a képességüket is, hogy koordinált módon mozogjanak. A találmánynak az a célja, hogy csökkentse a pulyka rhinotracheitis vírus vagy szerológiailag rokon törzsek által okozott fentebb említett problémákat. Következésképpen a találmány tárgya eljárás fertőző pulyka-rhinotracheitis vírus gyengített törzsének előállítására úgy, hogy egy kiindulási fertőző pulykarhinotracheitis vírust embriót tartalmazó tojáson és légcső szövettenyészetben váltakozva passzálunk. Az embriót tartalmazó tojáson és légcső szövettenyészeten a váltakozó passzálást 20-40-szer végezhetjük, előnyösen 30-szor végezzük. Az embriót tartalmazó tojáson és légcső szövettenyészeten végzett váltakozó passzáláshoz előnyösen szárnyasok tojásait és szárnyasok légcső szövettenyészeteit alkalmazzuk; különösen előnyösnek tartjuk az embriós tyúktojásokat és csirkékből származó légcső szövettenyészeteket. A passzálást más sejtekben vagy szövettenyészet rendszerekben is végezhetjük. A találmány szerinti eljárással előállított fertőző pulyka-rhinotracheitis vírus gyengített törzsét az European Collection of Animal Cell Cultures (Állati Sejttenyészetek Európai gyűjteménye), a PHLS Centre For Applied Microbiology and Researchnál (Salisbury, Wiltshire, Nagy-Britannia) V87051102 számon helyeztük letétbe. A fertőző pulyka rhinotracheitis vírus gyengített törzse vakcina előállítására alkalmazható, amely szárnyasoknak pulyka rhinotracheitis vírus vagy szerológiailag rokon törzseik által okozott primer virális fertőzés leküzdése érdekében adagolható. A szekunder baktériumos fertőzések, amelyek a mortalitás legnagyobb részét és az összes, a fertőzést követő gyenge teljesítményt okozzák, mind normális patogénjei a szárnyasoknak, és pulyka rhinotracheitis vírus vagy szerológiailag rokon törzsei távollétében nem okoznak problémát, viszont nem kezelhetők könnyen a rendelkezésre álló gyógyszeres terápiával. így a primer vírusfertőzés leküzdésével a fenti morbiditási és mortalitási arányok jelentősen csökkenthetők, és ebből következő javulás érhető el, például a pulykák tenyésztési teljesítményében és a csirkék tenyésztésében és tojástermelésében, amelyek mindegyikére nagy szükség van. A fertőző pulyka rhinotracheitis vírusának legyengített törzse, amelyet a fentebb jelzett törzsgyűjteményben V87051102 számon deponáltunk, új, legyengített törzs, amely különbözik más, az ezen a területen talált vírustörzsektől, például azoktól a törzsektől, amelyeket McDougall és Cook ismertetnek a Veterinary Recordban (1986), 118, a 206-207. oldalon. Az új, legyengített törzs képes fajlagos immunitást indukálni a fertőző pulyka-rhinotracheitis vírus ellen anélkül, hogy a betegség tüneteit előidézné. Hasonlóképpen az új, legyengített törzs képes lehet fajlagos immunitású antitesteket termelni védekezés céljára olyan fertőző vírusok ellen, amelyek szerológiaUag rokonok a pulyka rhinotracheitis vírussal. Az új, legyengített törzs stabil, úgy találtuk, hogy a virulencia nem tért vissza 12, madárról-madárra átvitt passzálás után. A fertőző pulyka-rhinotracheitis vírusának legyengített törzsét a fertőző pulyka-rhinotracheitis vírusának olyan szülőtörzséből kapjuk, amely a következő jellemzőkkel bír: a) pleomorf b) legtöbb részecske gömbalakú 80-120 nm átmé-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 2
