203637. lajstromszámú szabadalom • Táptalaj és eljárás rovarírtó nematódák folyékony tenyészetben történő előállítására
1 HU 203 637 B 2 A találmány megvalósításának a módjai A) Meghatározások „Entomogén nematódák”-nak az olyan nematódákat nevezzük, amelyek élősködők egy vagy több rovarfajtára nézve. A legfontosabb entomogén nematódarend a Rhabditida rend és a találmány főként két Rhabditid család tenyésztésére és/vagy szállítására irányul. E két család a Steinemematóda és a Heterorhabditida család. Más entomogén nematóda családok szintén alkalmasak lehetnek olyan anyagokként, amelyekhez a találmány szerinti módszerek alkalmazhatók. Ilyenek a Diplogasterida, Panagrolaimida, Rhabditida és a Syrophonematida családok, valamint a nem Rhabditida családokkal együtt használhatók, amelyek az Allanonematida, Aphelenchoidida, Etaphelenchida, Mermithida, Neotylenchida, a Sphaerulariida és a Tetradonematida családok. Ahogy fent említettük, a Rhabditida rend családjai közül kereskedelmileg a legfontosabbak a Steinemematoda és a Heterorhabditida családok. Az irodalomban a hivatkozások „Neoaplactana”-ra történnek, különösen a Steinemematóda fajra, és a Neoplactana, valamint a Steineraema megnevezések specifikus fajtákat jelölnek, ilyenek a Neoaplectana glaseri vagy a Steineraema glaseri fajták, amelyeket gyakran felcserélve használnak. Mivel a különböző nematódacsoportok osztályozása összekeverhető, magától értetődően olyan nemzetségekre irányul a találmány, amelyekre jellemző, hogy fertőzőek a rovarokra és a fejlődési ciklusukban van egy olyan állapot, a 3. fejlődési állapot, mégpedig a fertőző juvenilek (U), amelyeket az előzőekben már leírtunk. Az előirányzott mezőgazdasági alkalmazástól függően, például a kezelendő rovarokhoz igazodva, egy vagy több fajta közülük előnyös lehet. A „fertőző juvenil” vagy „U” megjelölés olyan nem-kifejlett állapotra vonatkozik, amely állapotban a juvenilek képesek behatolni a gazdaállatokba és azokat megfertőzik. Azoknál a családoknál, amelyek a találmány körébe tartoznak, ezek a „3U” állapotú nematódák. A „mozgatás” megjelölés minden olyan fizikai műveletre vonatkozik, amely áramló mozgást hoz létre a fermentáló tartályban, például a mechanikus lapátos keverés és a levegőztetéssel létesített buborékolás. B) Általános leírás A fertőző juvenilek, amelyek az eljárás termékei, felhasználhatók különböző rovarkártevők, így a fúrórovarok, gyökérzsizsikek, hernyók, szúrólegyek lárvái, gabonazsizsikek, a japán szúrólégy lárvái és a lótetűk irtására. Fontosabb mezőgazdasági termények, amelyeket ilyen fertőző juvenilek védenek, a kukorica, a földieper, mandulafák, a melegházi haszonnövények, az ehető gomba, a cukornád és a burgonya. A baromfiólak és istállók az állatok számára mentesíthetők a legyektől. Jellegzetes mezőgazdasági alkalmazásoknál a fertőző juvenüek felhasználásra kerülnek a környezet védelmében. így például az egyes gombapincékben körülbelül S x 109 nematódát használunk fel a gombalegyek vagy gyászlegyek irtására. A találmány kiterjed entomopatogén nematódák nagyméretű folyékony tenyészetekben való előállítására javított folyékony táptalajban. A táptalaj magában foglal emulgeátort, vitaminokat és ásványi anyagokat tartalmazó élesztőforrást, triglicerid-forrást, protein-forrást és adott esetben magában foglalhat más alkotókat is, így sókat, habzásgátló anyagokat, tápanyagokat és pufferokat. Azt találtuk, hogy a triglicerid- vagy olajkomponens valamely emulgeátor, így tojássárgája, jelenlétében nagyon jól emulgeálódik és emulzióban marad a fermentáció néhány napján keresztül. Ez jelentős eltérés azokhoz a készítményekhez viszonyítva, amelyek nem tartalmaznak tojássárgáját, azokban az olaj elkülönül és felemelkedik a fermentációs vivőanyag tetejére. A tojássárgája előnyös, mint emulgeáló szer és a mai napig nem állapították még meg annak felső határát a táptalajban. Felismertük, hogy 1-2 tf/tf% üyen anyag működőképes. Jóllehet, a tojássárgája előnyös emulgeáló szer, annak egy része helyettesíthető lecitinnel. Általában 0,1 -0,5 tf% lecitint használhatunk a tojássárgájával együtt. Más emulgáló szerek a glicerin-monosztearát vagy a -monooleát, a polioxietilén-szorbitán és egy zsírsav-szénhidrátészter. A táptalaj magában foglalhat még vitamin- és ásványanyagforrásokat, így élesztőforrást, élesztőkivonatot és élesztősejteket. Az élesztősejtek előnyösek, mint legkevésbé költséges változatok élesztőkivonatok használatára. Előnyösen körülbelül 0,1-1% (száraz tömegű) vagy hasonlóan 0,3-3% (nedves tömegű) élesztőforrást használunk a táptalajban. Növényi olajok például a kukoricacsíra-olaj, a pórsáfrány-, szója-, napraforgó- és repceolaj. Legalább egy olajnak jelen kell lennie a táptalajban, de olajok elegyei szintén használhatók a találmány keretein belül. Egy előnyös növényi olaj a kukoricacsíra-olaj 2- 5 tf/tf% mennyiségben. A proteint szintén különböző proteinf orrások szolgáltatják, például állati vagy növényi származékok kivonatai jól ismert táptalajkomponensek. Szárított állati szervkivonatok, így EnLivPro és húspepton, halliszt, szójapepton és szójaliszt jól alkalmazhatók a találmány szerinti táptalajban. Ezek közül a források közül a szójaliszt az előnyös. Jóllehet, nincs felső határ megállapítva a szójaliszt számára, előnyös körülbelül 1-3 tömeg/tf% használata. Bár nem lényeges, de kívánt esetben más alkotóanyagokat is adhatunk a táptalajhoz. így például sókat, koleszterint, steril vizet vagy foszfát-pufferolt konyhasóoldatot szintén használhatunk a találmány szerinti eljárásnál és ez nem veszélyezteti a keletkező fertőző nematódák hozamát. Egy előnyös folyékony táptalaj az entomogén nematódák előállításához a következő alkotókat tartalmazza: körülbelül 1-21% tojássárgája, 0,1-11% (száraz tömeg) élesztőkivonat, körülbelül 2-5 t% kukoricacsíra-ölaj és körülbelül 1-3 t% szója-liszt. Ezt az előnyös táptalajt olyan alkotóanyagokból állítjuk elő, 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 4
