203582. lajstromszámú szabadalom • Eljárás amicin és amicinszármazékok és ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására, valamint ezeket tartalmazó fungicid készítmények
1 HU 203 582 B 2 R3-etü-dezmalonü-származék: MS (FAB) MH+- 1085. 13C-NMR (75 MHz, CD3OD): ß- 176,6; 156,3; 102.4 ppm. Dietilszármazék; MS (FAB) NH+-1113. 13C-NMR (75 MHz, CD3OD): 8- 176,4; 156,3; 102.5 ppm. 6. példa (Ib) képletű vegyület előállítása 500 mg, a 3. példa szerint előállított dezmalonü-vegyületet 50 ml metanolban 500 mg nátrium-bór-hidríddel reagál tatunk 24 órán át szobahőmérsékleten végzett keveréssel. A nátrium-bór-hidrid felesleget jégecet hozzáadásával bontjuk meg. A reakcióelegyről az oldószert ledesztilláljuk, és a visszamaradó anyagot dextránon (Sephadex LH 20R), eluensként metanolt alkalmazva kromatografáljuk. így 90%-os hozammal 450 mg olyan (Ib) képletű vegyületet nyerünk, amelyben R* és minden R2 jelentése hidrogénatom. MS (FAB) MH+-1159. 13C-NMR (75 MHz, CD3OD): 5- 176,6; 174,3; 174,2; 171,7; 171,0; 156,4 ppm. Analóg módon redukálva az amicint, 84%-os hozammal 420 mg olyan (Ib) képletű vegyületet nyerünk, amelyben R1 és az R2 helyettesítők egyike malonilcsoport, a többi R2 helyettesítő jelentése hidrogénatom. MS (FÁB) MH+-1231 ‘C-NMR (75 MHz, CO3OD): 6-176,5; 156,2 ppm. 5 7. példa Amicin és a megfelelő dezmalonüszármazék alkalmazása fungicid szerként a) 6 mm átmérőjű szűrőpapír darabkák mindegyikét 20 |xl, a 2. és a 3. példa szerint előállított, különbö- 10 ző koncentrációjú hatóanyagokkal egyenletesen megnedvesítjük (a hatóanyagból 80% víz és 20% metanol elegyében készítményt formálunk, ennek különböző hígításait alkalmazzuk a vizsgálathoz, a hatóanyagkoncentrációt azl. és n. táblázatban feltüntetjük), és a 15 szűrőpapírdarabkákat a különféle gombafajtáknak megfelelő agaros tápra ráfektetjük. Az agárhoz ezt megelőzően, még folyékony állapotban hozzáadjuk a vizsgálandó organizmus 0,5 ml tenyészetszuszpenzióját (körülbelül 105-106 konidium/ml), és egy-egy 20 90 mm átmérőjű Petri-csészébe 10 ml agart töltünk. A 10 kezelt agarlemezt ezután 25 *C hőmérsékleten termosztáljuk. 3-4 napos tenyésztés után a kialakult gátlási zónát megmérjük, és a mm-ekben megadott gátlási zónát tekintjük a gombagátlás mértékének. A 10 25 ram-es gátlás! zónát az adott, ppm-ben kifejezett hatóanyag MIC-értékének (minimális gátlási koncentráció) tekintjük. I Táblázat A 2. példa szerinti amicin mennyiségi biológiai vizsgálata A biológiai aktivitás zónája (nun) (20 pl/szűrőpapírszelet) Koncentráció Botrytis cinerea Cercospora Piricularia Alternaria Fusarium Penicülium (pg/ml) szinzitív rezisztens teticola oryzae altemata 1 nlmnnim digitatum 2000 28 26 22 28 34 18 12 1000 24 24 20 26 28 ló 10/12* 500 22 18 10 20 26 14 12* 250 16 12 12/16* 18 22 14/16* 10* 125 12 12* 16* 14 16 12* 0 60 10 10* 14* 10 14 10* 0 30 10 0 12* 14* 12* 0 0 15 0 0 0 0 0 0 0 *- nem teljes gátlás, de torzult micéliumok II. táblázat A 3. példa szerinti dezmalonüszármazék mennyiségi biológiai vizsgálata A biológiai aktivitási zóna átmérője (mm) (20 pl/szűrőpapírszele t) Koncentráció Botrytis cinerea Cercospora Piricularia Altemaria Fusarium Penicülium (pg/ral) szinzitív rezisztens teticola oryzae altemata culmorum digitatum 2000 14 16 14 16 16 12 10 1000 12 14 12 14 14 10 8 500 12 12 10 12 12 10 8/10* 250 10/12* 10/12* 10 12 12 10 10* 125 12* 12* 10* 8 10* 0 0 60 10* 10* 0* 0 0 0* 0 30 0 0 0 0 0 0 0 5
