203579. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fúziós proteinek előállítására
HU 203579B I. sz. melléklet: a 2-interleukin aminosav-sorozata folytatása 13 14 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 Thr Phe Cys Gin Ser Ile Ile Ser Thr Leu 380 390 400 ACC TTC TGC CAG TCG ATC ATC TCT ACC CTG TGG AAG ACG GTC AGC TAG TAG AGA TGG GAC 133 134 135 Thr 410 ACC RGA TAG 3’ TGG ACT ATC AGC T 5’ SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás la ésIb képletű fúziós proteinek előállítására Met-X-(Y)m-Z Met-Z-(Y)m-X aa) (Ib) ahol Z a célfehérjét vagy -peptidet jelenti, X jelentése 2-IL, előnyösen emberi 2-IL első 90- 133 aminosavának szekvenciája, illetve ennek legfeljebb 6 aminosav cseréjével megváltoztatott variánsa, Y jelentése 1-4 aminosavból álló híd, amely kémiai úton vagy enzimesen hasítható, illetve lehasítható és m jelentése zéró, ha a kívánt proteinhez szomszédos aminosav a kívánt protein lehasítását lehetővé teszi máskülönben m jelentése 1,2,3 vagy 4, azzal 20 jellemezve, hogy az X szekvenciát kódoló DNS- fragmenst, a Z szekvenviát kódoló DNS-fragmenst és kívánt esetben az -(Y)m- hidat kódoló DNS-fragmenst egymással, valamint valamely E.coli-ban exprimálható plazmidból ligái juk, a kapott plazmid- 25 dal E. coli törzset transzformálunk, a törzset alkalmas tápközegben szaporítjuk, majd a fúziós proteint elválasztjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a fúziós proteint centrifugálással vá- 30 lasztjuk el az oldható proteinek mellől. 8