203565. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kis molekulatömegű heparin, heparán-szulfát, dermatán-szulfát és sóik, valamint ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 203 565 B 2 Az 1SO3/-COO arány 16%-os növekedését észleltük. Ez az arány megfelel a szulfátcsoportok diszacharid egységenkénti átlagos számának A Ids molekulatömegű dermatán-szulfát (LMW-DS) kémiai alapszerkezete nem megy át változáson, amint az a 13C-NMR spektrumból látható, kivéve a galaktóz-amin a- és ßanomerjei redukáló anomer szénatomjainak tulajdonítható jeleket (5. ábra, az ábrán az A spektrum LMW-DS M-6000, a B és C más Ids molekulatömegű frakciók, A, B és C gyökös eljárás termékei). A depolimerizációs eljárás során lényegében a legerősebben szulfátéit szekvencia őrződik meg. A reakciónak ez a lefolyása nem volt előrelátható. Az OP 352 és OP 370 vegyületeket Yamagata és munkatársai eljárása szerint [J. Bioi. Chem., 243, 1523 (1968)] kondroitináz ABC-vel enzimes lebontásnak tesszük ki. A vegyületeket alkotó diszacharidokat papírkromatográfiás eljárással, 13C-NMR és 1HNMR eljárással elemezzük. Mennyiségi meghatározásukat a megfelelő telítetlen uronsavak H-C4 jeleinek görbe alatti területei aránya révén végezzük (6. ábra), az A spektrum főként ADÍ4S tartalmú dermatán-szulfát diszacharidok elegyére, a B spektrum ADiDiS-re vonatkozik. (Mascellani G. és munkatársai „Structure features and biological effects of dermatan sulfates and their chemically depolymerized Low Molecular Weight Fragments”, 3rd International Workshop on recent developments in industrial polysaccharides, t/2 25,93 perc 2,000 mg/kg t/2 137,52 39,90 ml/kg perc ke 6,17 E-2 Trieste, 1988.10.24.). Eredményeinket a 9. táblázatban ismertetjük. Az OP 370 vegyület nem várt módon hatásos antitrombotikus és tromboütikus szemek bizonyult és far- 5 makoldnetikája tartós. Vénás trombózis kísérleti modellben [Reyers és munkatársai, Thromb. Rés. 18, 669-670 (1980)] a vegyületekED50 értéke a 10. táblázatban megadott. 10 Farmakokinetikai vizsgálatok- Farmakokinetikai intravénás adagolás mellett patkányban. Patkányoknak intravénásán 20 mg/kg LMW-DS OP 370-t és 15 mg/kg DS OP 352-t adunk be. 15 A plazma-koncentrációt Hepest meghatározással értékeljük. A koncentrációkat bikompartmentális modellel határozzuk meg. A kapott értéket all. táblázatban ismertetjük.- Jelentős különbséget észleltünk a 30000 daltonhoz 20 és a 6000 dalton molekulatömegű dermatán-szulfát között Az OP 370 látszólagos eloszlási térfogata legalább 2,5-szerese az OP 352 megfelelő térfogatának; az alacsony molekulatömegű vegyület jelentős hajlamot mutat arra, hogy a szervezetben be- 25 fogódjon és ott visszatartód jón. Ez az alábbi bikompartmentális farmakokinetikai paraméterekből is látható. DSOP352 kl2 3,43 E-2 11,86 E-2 k21 78,82 ml/kg K12 177E-2 * X 8,70 E-2 k21 LMW-DS OP 370 Ez a jelenség éppen ellentéte a heparin és alacsony molekulatömegű heparin esetén megfigyelhetőnek. Ezek esetén bizonyított, hegy azonos töltéssűrűség mellett az endotheliális sejtekhez való affinitásuk a molekulatömeg függvényében nő [Barzu T. és munkatársai, Biochem. J. 238,847 (1986)]. A farmakokinetikai számításokat trikompartmentális modell szerint végeztük. Az LMW-DS a trikómpartmentális modellbe illőnek bizonyult, míg a természetes DS határozottan a bikompartmentális modellt 13
