203562. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új szteroid diolok és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 Hü 203 562 A 2 A lokálisan alkalmazott szteroid gyulladásgátlókkal szemben két alapvető követelményt támasztanak: a) legyenek minél hatékonyabbak a különböző, gyulladásgátló hatás vizsgálatára szolgáló állatkísérletekben, és b) káros, szisztémás mellékhatásuk minél kisebb legyen. Ez utóbbi hatás a timusz súlycsökkentő effektus (involúció) mértékével jól jellemezhető. A találmány szerinti vegyületek gyulladáscsökkentő hatásának vizsgálatára az alábbi teszteket alkalmaztuk. összehasonlításul referencia vegyületként a prednizolont (11 ß,17a,21-trihidroxi-pregna-l,4-dién-3,20-diont) használtunk. 1. Oxazolonnal kiváltott kontakt dermatitisz modell [Br. J. Pharmae. 43,403. (1971)] kA kísérlethez 20-24 g-os CFLP törzsből származó hím egereket használunk. Az állatok hasbőrét leborotváljuk, majd 0,1 ml 2%-os, olívaolajos oxazolon-oldatot viszünk fel rá. A kezelés után 7 nappal az állatok bal fülére 10 pl 2%-os, acetonos oxazolon-oldat felvitelével kiváltjuk a gyulladásos reakciót. A jobb fül kontrollként szolgál. 24 óra múlva az állatok fülét levágjuk és a tömegüket megmérjük. A hatóanyagok vizsgálatánál az acetonos oxazolon-oldatba visszük bele a vizsgálandó hatóanyagot különböző koncentrációkban. Kiértékelésnél a hatóanyagot nem tartalmazó kontrolihoz képest a fültömeg növekedés csökkenését %ban, mint „Gyulladásgátlás”-t fejezzük Id. Csoportonként 10-10 egeret használunk. 2.Lokális granidóma-zsák modell [Recent Progr. Hormone Res., 8,117. (1953); Arzneim.-Forsch., 27,11 (1977)] A módszuerrel a lokálisan adott glukokortikoidok 5 anticxszuda tív hatását és ugyanazon a kísérleti állaton a szisztémás mellékhatást (timusz involúció) vizsgáljuk. A vizsgálathoz 130-150 g-os RG-han: WISTAR törzsű nőstény patkányokat használunk, csoporton- 10 ként 10-10 állatot. A borotvált hátú kísérleti állatok hátbőre alá 25 ml levegőt injiciálunk, majd az így kialakított zsákba 1 ml gyulladáskeltő hatású 2%-os krotonolajat fecskendezünk. Öt nap múlva a zsák tartalmát leszívjuk és a helyére injekciós fecskendővel a 15 vizsgálandó glukokortikoidok, illetve a prednizolon 0,5 ml térfogatú, Tween 80-nal készített szuszpenzióját juttatjuk 3-3 dózisban, egyszeri alkalommal. A kísérlet kezdetétől számított 10. napon az állatokat leüljük, és mérjük a zsákokban levő exszudációs folyadék 20 mennyiségét ml-ben. Az exszudációs folyadék kontroll csoporthoz viszonyított mennyiségének csökkenéséből számítjuk a gyulladásgátlás százalékos értékét. Kiemeljük az állatok timuszát és mérjük tömegét mg-ban. A hatóanyagtgal kezelt állatok és a kezeletlen 25 kontroll csoport timusz tömegének egybevetéséből kiszámítjuk az involúció, vagyis a szisztémás mellékhatás mértékét százalékban. A fenti vizsgálatok során a következő eredményeket kaptuk: 1. Gyulladásgátló hatás oxazolonnal kiváltott kontakt dermatitisz modellen Vegytllet Dózis' [mg/fül] Fül tömeg növekedés [%] Gyulladás gátlás [*] Kontroll 0 108,8 0 Prednizolon 0,3 86,1 20,8 Prednizolon 1.0 76,9 29,3 Prednizolon 3,0 68,6 36,9 3. példa 0,3 86,2 20,8 3. példa 1,0 75,5 30,6 3. példa 3,0 58,1 46,6 4. példa 0,4 77,2 29,1 4. példa 1,0 68,8 36,8 4. példa 3,0 60,4 44,5 2. Gyulladásgátló hatás lokális granulóma-zsák modellen Vegytllet Dózis Exszudációs Gyulladás-Timusz [mg/zsák] folyadék gátlás involúció [ml] [*] [%] Kontroll 0 15,3 0 0 Prednizolon 1 11,7 23,6 212 Prednizolon 3 9,2 39,9 44,1 Prednizolon 9 5,8 62,2 55,5 3. példa 1 10,3 32,7 28,7 3. példa 3 9,2 39,9 33,1 3
