203479. lajstromszámú szabadalom • Eljárás TRH, vagy analógjai mikro kapszulázására
1 HU 203 479 B 2 zió térfogata általában mintegy 0,1-5 ml, előnyösen mintegy 0,2-3 ml. A fent leírt módon olyan gyógyszerkészítményt kapunk, amely mikrokapszulák formájában a szokásos egyszeri dózisnál nagyobb mennyiségben egy vízoldható hatóanyagot és egy fent ismertetett biokompatibilis polimert tartalmaz, és amely hosszú időn keresztül biztosítja a hatóanyag folyamatos felszabadulását. A találmány szerinti megoldás előnyös hatásai közül a tömör mikrokapszulafal előállítása, a felvett hatóanyag mennyiségének növelése és a mikrokapszula felületi rétegéhez közel eső területek diffúziójának csökkentésével lecsökkentett túlzott kezdeti felszabadulás a polimer savas csoportjai és az említett peptid bázikus csoportjai között kialakuló kapcsolatnak köszönhető. Ennek következtében, a bázikus csoportokat tartalmazó különböző peptidek közül az erőseb bázicitású csoportokat és/vagy több bázikus csoportot tartalmazó peptidek hatásosabban csökkentik a túlzott kezdeti felszabadulást és jobban növelik a felvett hatóanyag mennyiségét A kedvező tulajdonságú mikrokapszula előállításához ezért a pepiidhez előzetesen kémiai úton legalább egy bázikus csoportot, így lizint, arg inint vagy hisztidint kapcsolhatunk, vagy a fiziológiailag aktív, nem peptidszerű szerves vegyülethez kémiai úton fenti bázikus csoportokat tartalmazó peptidláncot kapcsolhatunk. A találmány szerint előállított késleltetett hatóanyag-leadású készítmények a következő jellmezőkkel rendelkeznek: (1) A különböző adagolási formáknál biztosítható a peptid kedvező ütemű, késleltetett felszabadulása. Közelebbről, ha a kívánt terápiás hatás kiváltásához hosszabb injekciós kezelés szükséges, a hatás biztosítható, ha hetenként, havonta vagy évenként csak egy injekciót adunk, mivel az ismert nyújtott hatású készítményekhez viszonyítva a hatóanyag felszabadulása jóval hosszabb időn keresztül biztosítható, (2) Ha a pepiidet biológiailag leépíthető polimert tartalmazó injekció formájában alkalmazzuk, sebészeti beültetésre nincs szükség, mivel könnyen alkalmazható az ismert injekciós szuszpenzióknál alkalmazott szubkután vagy intramuszkuláris befecskendezéssel. Eltávolítás vagy extrahálás nem szükséges. (3) A víz-az-olajban-a-vízben típusú háromfázisú emulziók előállítására és vízben történő szárítására szolgáló ismert eljárásokkal összehasonlítva a találmány szerinti eljárás során a hatóanyag sokkal hatékonyabban épül be a mikrokapszulába anélkül, hogy az első vizes fázishoz külön hatóanyag- visszatartó szert adagolnánk. Emellett, finom, gömbölyű és szabályos alakú mikrokapszulák nyerhetők. (4) A víz-az-olajban-a-vízben típusú emulziók előállítására és vízben történő szárítására szolgáló ismert eljárásokhoz viszonyítva az előállított mikrokapszula lényegesen jobban csökkenti a túlzott kezdeti felszabadulást, és így biztosan és jobban késleltetett, állandó ütemű felszabadulást biztosító készítményt kapunk. A találmány szerinti eljárást közelebbről az alábbi példákkal mutatjuk be. 1. példa 0,625 ml vízben 50-1000 mg TRH-t (szabad forma) oldunk. Az oldatot 5 g tejsav/glikolsav kopolimer [tejsav/glikolsav-75:25, átlagos móltőmeg 14 000, továbbiakban PLGA (75/25)-14 000 vagy röviden PLGA] 6,25 ml diklór-metánban felvett oldatához adjuk. Az elegyet kisméretű homogenizálóban (Polytron, Kinematika, Svájc) 3-60 másodpercen keresztül keverjük. A kapott emulziót 18 ‘C hőmérsékletre hűtjük és 1,250 ml 0,25 tömeg%-os vizes polivinil- alkoholra (PVA) öntjük 18 "C hőmérsékleten. A teljes elegyet turbinás homogenizáló keverővei víz-az-olajban-a-vízben típusú emulzióvá alakítjuk. Ezután az emulziót keverve elpárologtatjuk a diklór-metánt, és így megszilárdítjuk az első víz-az-olajban emulziót. A szilárd fázist centrifugálással elválasztjuk. Ezt desztillált vízben ismét diszpergáljuk és a meg nem kötött hatóanyagot és egyéb anyagokat vízzel kimossuk. Az összegyűjtött mikrokapszulákat az oldószer és a víz teljes eltávolításáig fagyasztva szárítjuk, amelynek során a kívánt por alakú terméket kapjuk. A kapott mikrokapszula a PLGA-ra vonatkoztatva mintegy 1-20 tömeg % TRH-t tartalmaz. A hatóanyag pontos mennyiségét a frissen előállított termékben és az egy napig pH-7,0 értékű foszfát pufferben 37 *C hőmérsékleten tárolt mikrokapszulában külön vizsgáljuk. A mérési eredményeket az 1. táblázat tartalmazza. 1.táblázat Tétel TRH koncentráció (a) Felvett mennyiség (%) Visszamaradó mennyiség egy nap után (%) (b) 25 1 82,1 34,3 51 2,5 88,6 85,4 26 5 105,2 83,7 52 7,5 95,9 91,2 27 10 105,9 74,0 101 12 83,7 84,6 102 15 72,1 83,0 28 20 47,5 61,2 (a) -tömeg% a PLGA-ra vonatkoztatva (b) —1/30 mól/liter foszfátpuffer, pH-7,0, 37 "C (n-2 esetben). Ha a TRH koncentrációja a PLGA-ra vonatkoztatva 1 tömeg%, a mikrokapszulába felvett hatóanyag mennyisége viszonylag alacsony, és a felszabadulás az első napon eléri a 65,7%-ot Ezzel szemben 2,5-15 tömeg% koncentrációknál jó mikrokapszulát kapunk, a felvett hatóanyag-mennyiség igen magas és az első napi felszabadulás (kezdeti felszabadulás) viszonylag kicsi. Ha a TRH koncentrációja a PLGA-ra vonatkoztatva eléri a 20 tömeg%-ot, a felvett hatóanyag-mennyiség ismét csökken és a kezdeti felszabadulás növekszik. Ennek oka feltehetően a víz-az-olajban emulzió törése a vízben történő szárítás során és a polimer kapszulafalbán kialakuló vízcsa5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 5
