203452. lajstromszámú szabadalom • Hatóanyagként alfa-aril-1H-1,2,4-triazol-1-propánnitril származékokat tartalmazó fungicid készítmények és eljárás a hatóanyagok előállítására
1 HU 203 452 B 2 lyezzük, vagy egy darab spórázó micéliumot 20 ml steril ionmentes vizet tartalmazó csőbe helyezünk, jól összerázzuk, és 5 perc múlva annyi sprórát tartalmazó folyadékot viszünk friss lemezre, hogy a lemezen vékony film képződjön. A lemezeket 48 órán át 20 *C hőmérsékleten sötétben inkubáljuk, amíg fehér micélium megjelenését nem észleljük. Ezután a lemezeket 21 *C hőmérsékleten állandó fluorescens fény alatt inkubáljuk 15-20 napig. A micélium rózsaszín színűvé válik az inkubációs időszak végére. A spórázó lemezeket ionmentes vízzel árasztjuk el. A spórákat gumilappal ellátott bottal kaparjuk a vízbe. Az elárasztást és a lekaparást lemezenként 2-3-szor ismételjük. A spóraszuszpenziót ezután szűrőszöveten szűrjük át. A spóraszuszpenzió koncentrációját 150- 300 spóra/ml értékre állítjuk be. Minden 500 ml spóraszuszpenzióra 2 csepp Tween-80-at adunk. LEN búzanővényeket spóraszuszpenzióval és TWEEN-80-nal kézi permetező alkalmazásával bepermetezünk. Adott esetben a növényeket a befertőzést megelőzően könnyű ásványolajjal enyhén bepermetezzük, és 5 perc múlva végezzük a befertőzést. A befertőzött növényeket 72 órán át párakamrába 20 *C hőmérsékleten inokuláljuk, 16 órás megvilágításos fotóperiódus és 8 órás sötét periódus váltják egymást. A növényeket ezután 7-9 napra 20 *C hőmérsékletű tenyésztőkamrába helyezzük, ahol 16 órás megvilágított fotóperiódus és 8 órás sötét periódus váltja egymást. Ezután végezzük a kiértékelést, az eredményeket a kontroll %-ában adjuk meg. A vizsgált vegyületeket különböző dózisokban alkalmaztuk, a kísérlet végrehajtásának idejétől függően. A vizsgálatokban jónak bizonyult vegyületekre kapott eredményeket a VIII. táblázatban adjuk meg, vegyületenként három dózisban. Amennyiben az egyes vegyületeket azonos dózisban többször vizsgáltuk, ezen vizsgálati eredmények átlag értékét adjuk meg. VIII. Táblázat Fungicid hatás Földimogyoró Cercospora Vegyület/dózis (ppm) 300 75 5 4. 100 100 97 6. 100 100 100 7. 100 100 85 8. 98 100 85 11. 100 100 100 Árpa Helminthosporium Vegyület/dózis (ppm) 300 75 5 3. 100 99 87 10. 99 99 84 11. 100 99 76 Vegyület/dózis (ppm) 300 75 5 16. 100 100 96 19. 99 99 100 25. 94 94 94 26. 94 97 86 Búza Septoria Nodorum Vegyület/dózis (ppm) 80 20 5 10. 100 100 90 49. 100 100 90 Összhasonlüó vizsgálatok A 2. és 10. vegyültek összehasonlítása a c2a, c2b és clO. vegyületekkel A 2., 10., c2a, c2b és clO. vegyületeket egymás mellett alkalmazva in vitro összehasonlító vizsgálatot végzünk P. herpotrichoides-szel és Septoria tritici-vel szemben. A vizsgálatokat rutin PDA (burgonya-dextróz-agar) méreg agaron végeztük. Méreg-agar 39 g Difco buigonya-dextróz-agart (PDA) 1 liter vízben szuszpendálunk. A tápközeget autoklávban 1,03 bar nyomáson 15 percig sterilezzük. Ezt követően a tápközeget 15 percig hűlni hagyjuk. Ezután ismert mennyiségű fungicidnek az olvadt agárhoz való adagolásával hígitási sort készítünk. A fungicideket metanolban, acetonban vagy DMSO-ban oldjuk az agarban való elegyítést megelőzően. A gombák növekedését a következő inkubációs időszakok után vizsgáltuk: Pseudocercosporella herpotrichoides - 12 nap szobahőmérsékleten; Septoria tritici - 14 nap szobahőmérsékleten. Az eredményeket a mm-ben megadott sugár-értékkel jellemezzük, és az EC7j értékeket számítjuk. Az EC75 értékek ppm-ben megadva a következők: IX. Táblázat Pseudocercosporella c2a c2b 2 (fenil) (benzil) (fenetil) 20 12 0,6 clO 10 (benzil) (fenetil) 20 0,2 Septoria tritici c2a c2b 2 9 10 0,2 clO 10 4 0,02 23 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
