203255. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hibrid interferonok előállítására
1 HU 203 255 B 2 Mab-t az Inter-Yeda cégtől (Izrael), az S-l, S-2, S-3 és S-4 (MAb-t dr. C. Favre-tól [UNICET Dardilly, Franciaország) és az 1/24 MAb-t M. Aguet-től (Zürichi Egyetem, Svájc) kaptuk. c) A különböző monoklonális antitesteknek az IFNa szubtípusokkal szembeni reaktivitása meghatározását kombinált immunprecipitációsbioassay-vel (19. példa) végeztük és tandem rádió-immunassay-vel D. S. Secher szerint [Nature, 290,501 (1981)]. Az eredményeket a 4. táblázat tartalmazza. A 144 BS, 1K2 és 2K2 monoklonális antitestek nem 5 reagálnak humán IFNß-vel (Rentshler, Laupheim, NSZK) vagy humán IFNy-val (Bio Science, Emmenbriicke, Svájc). 4. táblázat Monoklonális antitestek immunprecipitációja rekombináns IFN szubtípusokkal Monoklonális I F N - s z u b t í p u s o k antitestek A a-2 C a-3 a-1 J 144 BS + ++++ +++ ++++ +++ ++ 1K2 +++-4-4-4-+ 4H-4-2K2 +++++++ ++++ ++ +++ NK2 +++ + ++++++ ++++ YOK ++++++++ S-l +++ + ++++ ++ 4* S-2 4-4-4-+ S-3 +++ ++++++ +4-++ S-4 +++++-H-4-4-IY-1 ++ +++-4-4-IY-2 +++++ +++ 1/24 ++++ ++++++ 4*++ Jelmagyarázat: ++++100%-os kötődés +++ 75%-os kötődés ++ 50%-os kötődés + 25%-os kötődés ± 10%-os kötődés - 0%-os kötődés Ahol nincs jel, ott nem történt meghatározás. (Az értékek körülbelüli értékek). 35 A 4. táblázat adatai azt mutatják, hogy a 144 BS monoklonális antitest kötődési viselkedése egyedi. Mindenekfelett említésre méltó az IFNct-A-hoz való gyenge kötődése és az IFNa-2, IFNa-3 és IFNa-1 polipeptidhez való erős kötődése. 40 A. 4. táblázat eredményei alapján végzett epitóp analízist az 5. táblázatban sematikusan ábrázoljuk. 5. táblázat Rekombináns IFNa szubtípusok epitóp analízise Rekombináns 144 BS 1K2 2K2 YOK S 1 IY-1,1/24 YUK 5 1 S-2 S-4 IY-2 ifnu jzuuupuo M A b á 1 tál felismert e p i t ó p A x-------------XX------------XX----------------x--------------X---------------X--------------XX (X-Z, a-3 a-1 T AA-----YY___ YY------AA-----YY--------A-------YY Y AA xr Y Y ... V Y A Y A YY YY- —áV1 VT y YY — -ZV.' 22
