203237. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tetrahidrofolsav-származékok biológiailag aktív izomerjének előállítására frakcionált kristályosítással
1 HU 203 237 B 2 minsav egy része is lehasad és olyan melléktermékek keletkeznek, amelyeket csak nehezen lehet elválasztani. Az ilyen módszerrel előállított (6S)-folinsav olyan drága lenne, hogy felhasználása a (RS)-tetrahidrofolátok helyett nem is jöhetne számításba. Mind a mai napig nem ismeretes használható eljárás (6S)-tetrahidrofolátok előállítására. Ezért továbbra is időszerű a feladat, hogy egy egyszerű, iparilag alkalmazható eljárást találjunk 5-CHO- és 5-Me-(6S)THF előállítására. Az 5-CHO- és 5-Me-(6RS)-THF ismert módon folsavból is előállíthatok. Hangyasavval történő formilezés hatására 10-formil-foIsav (10-CHO-FS) keletkezik. Ez azután katalitikusán 10-fonnil-tetrahidrofolsawá (10-CHO-THF) hidrogénezhető. Az ebből történő dehidratálás eredményeként 5,10-metin-tetrahidrofolsav [lásd (I) általános képlet; 5,10-CH-THF „Anhidro-leucovorin”)] kapható. Az (I) általános képletben X'1 jelentése tetszőleges anion, például CT vagy Br". Az (I) általános képletű vegyidet a röviden (5,10-CH-RHF)+CT.HCl alakú klorid-hidroklorid alakban is szerepelhet. Ebből az alakból egy anioncserélő segítségével a megfelelő belső só is előállítható [(I) általános képlet, X' hiányzik, COOH helyett COO' szerepel]. Az (I) általános képletű vegyületből a kívánt tetrahidrofolátok könnyen előállíthatok. Hidrolízissel (transzformilezés) 5-formil-tetrahidrofolsavat nyerünk (5-CHO-THF), amelyet kalciumsója alakjában (Leucovorin) izolálhatunk [PS 305 574. számú svájci szabadalmi leírás (CYANAMID)]. Nátrium-bórhidriddel történő redukcióval az 5-metü-tetrahidrofolsavat kapjuk (5-Me-THF; mefolinsav), amely kalciumvagy magnéziumsóként izolálható [PS 649 550 számú svájci szabadalmi leírás (EPROVA)]. Meglepőnek találhatjuk, hogy a (6RS)-I általános képletű [a továbbiakban <6RS)-I] vegyüld, illetve annak sói oldatából (6R)-I általános képletű (a továbbiakban (6R)-I vegyület, illetve annak addíciós sói [5,10- CH-(6R)-THF)+JÍ“HX], illetve annak belső sója kristályosodhat ki úgy, hogy kristályos anyagban a (6R)-I- tartalom több mint 90%. A (6R)-I egyébként igen alkalmas a kívánt tetrahidrofolátok előállítására: az 5- CHO-(6S)-THF hidrolízissel, az 5-Me-(6S)-THF redukcióval kapható meg belőle. A döntő tehát az, hogy a diasztereomerek elválasztását az (I) általános képletű vegyületek szintjén hajtsuk végre. A szétválasztás sikere azért meglepő, mert Rees és munkatársai [J. Chem. Soc. Chem. Commun. (1987) 470] az elválasztás lehetővé tétele céljából egy újabb királis centrumot építettek be a THF-molekulába és ezzel jelentősen bonyolulttá vált a feladat. A jelen találmány tárgya következésképpen eljárás 5,10-metin-(6R)-, 5-formil-(6S)- és/vagy 5-metü(6S)-tetrahidrofolsav, valamint ezek sóinak előállítására, amelynek során 5,10-metin-(6RS)-tetrahidrofolsavat, annak belső sóját és/vagy erős savval alkotott sóját valamely poláros oldószerből frakcionált kristályosításnak vetjük alá, és kívánt esetben a kapott 5.10- metin-(6R)-tetrahidrofolsavat hidrolizálószerrel kezeljük és így 5-formil-(6S)-tetrahidrofolsavat kapunk vagy valamely bór-hidrid-származékkal redukáljuk, és így 5-metil-(6S)-tetrahidrofolsavat kapunk és kívánt esetben egy bázissal kezeljük a kapott savat. A találmány szerinti diasztereomer-elválasztás előnyösen legalább egy poláros oldószerből történő frakcionált kristályosítással valósítható meg. Poláros oldószerként például a következő anyagok jöhetnek számításba: kisebb szénatomszámú alifás karbonsavak, különösen a hangyasav és az ecetsav, folyékony vízoldható amidok, mint a formamid, a dimetil-formamid, a dimetil-acetamid, az 1-metü-pirrolidon, a 2-piperidinon, a 4-formü-morfolin, az 1-formü-pirrolidon, az 1-formü-piperidin és a tetrametilkarbamid, szulfoxidok vagy szulfonok, mint a dimetüszulfoxid, a dimetü-szulfon vagy a szulfolán (tetrametüén-szulfon), koncentrált, vizes erős savak, mint a 20-35%-os sósav vagy más vizes ásványi savak, mint például a brómhidrogénsav, a jódhidrogénsav, a kénsav, a salétromsav, a foszforsav, vagy erős szerves savak oldatai, mint például az oxálsav, a maleinsav, a - triklórecctsav, a trifluorecetsav, a metánszulfonsav, a benzolszulfonsav, a toluolszulfonsav, a kámforszulfonsav. Legelőnyösebben használható a hangyasav. Előnyösen használhatók ugyanakkor a fentiekben .*> felsorolt oldószerek keverékei is, különösen egy fent * megadott szerves „oldószer” és egy vizes ásványi sav illetve víz („kristályosítószer") keveréke. •£ Oldószerként használhatunk koncentrált vizes ás- : ványi savakat, mint például tömény sósavat, krls- *> tályosítószerként pedig kismennyiségű vizet. Ha eköz- v ben a víz mennyisége megközelíti vagy esetleg eléri a *• tömény vizes ásványi sav víztartalmát [5,10-(6RS)THF]+X\HX kristályosodik ki, azaz az elválasztás nem történik meg. Előnyben részesített oldószer a hangyasav, előnyben részesített kristályosítószer pedig egy erős ásványi sav, mint a híg sósav, a hidrogénbromid, a kénsav, a szulfonsavak vagy salétromsav. Víztartalmú erős ásványi sav helyett kristályosítószerként jégecetet is alkalmazhatunk. Végtermékként általában az 5,10-metin-(6R)-tetrahidrofolsav (I) általános képlettel jelzett sójának megfelelő HX savval alkotott savaddíciós sóját kapjuk. Ha például a (6RS)-I vegyület hidrokloridjának (X-Cl) koncentrált oldatát hangyasavban (‘^oldószer”) tömény vizes sósavval („kristályosítószer") reagál tatjuk, (6R)-I kristályosodik ki az [5,10-CH-(6R)THFJCI.HCL képlettel jellemzett klorid-hidroklorid alakban, a (6R)-alak részesedése kb. 90%-os. Ez az arány újbóli, például hangyasav/sósav-ból való átkristályosítással tovább növelhető. Hasonló modem például a (6R)-I vegyület hidrobromidját (X=Br) kaphatjuk, ha a (6RS)-I vegyület hidrobromidjának (X=Br) vagy a (6RS)-I vegyület belső sójának oldatát hangyasavas vizes hidrogénbromiddal reagál tatjuk. A sav koncentrációja és az oldószef/kristályosítószer arány tág határok közt változhat. Az 5.10- CH(6RS)-THF koncentrációja előnyösen 10 és 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 3
