203201. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tumorellenes szinergetikus hatású gyógyászati készítmény előállítására
1 HU 203 201 B 2 vagy intramuszkuláris adagoláskor) 5-100 mg/kg testsúly, c) lokálisan adagolható gyógyászati készítmények esetén (például oldatok, elixir, emulzió, kenőcs és más hasonlók alakjában történő adagoláskor) bőrre és nyálkahártyára alkalmazva, 50-2000 mg, előnyösen 80-1500 mg. így például naponta háromszor egy, 40-400 mg hatóanyagot tartalmazó tabletta vagy például intravénás injekcióval, naponta 1-5 alkalommal történő 1-5 mles, 50-250 mg hatóanyagot tartalmazó ampulla adagolása javasolható. Orális adagolás esetén a minimális napi dózis például 120 mg; a maximális napi dózis orális adagolás esetén nem kell hogy a 100 mg/kg testsúly mennyiségret meghaladja. Az akut toxicitás hexadecil-foszfokolin esetén egereknél [Ld 50 mg/kg-ban kifejezve: Miller és Tainter: Proc. Soc. Exper. Bioi. a Med. 57 (1944) 261 helyen leírt módszere szerint] például orális adagolás esetén 200-450 mg/kg testsúly. A találmány szerint előállított gyógyászati készítmények az embergyógyászatban, állatgyógyászatban, valamint a mezőgazdaságban egymagukban vagy más gyógyászatiig aktív anyagokkal együtt alkalmazhatók. A következő példák a találmányt közelebbről mutatják be. 1. példa Hexadecil-foszfokolin ■ H20 előállítása a) hexadecü-foszfo-etanolamin (foszforilezés, gyűrűzárás és gyűrűnyitás) Hexadecenolt (1 mól, 243 g) és trietilamint (1,8 mól, 180 g) oldunk 1,5 liter tetrahidrofuránban és ezt az oldatot erős keverés közben foszforoxiklorid (1,2 mól, 184 g) 120 ml tetrahidrofuránnal készített oldatához csepegtetjük úgy, hogy a reagálta tó edényben (háromnyakú, 5 literes, csepegtetőtölcsérrel, keverővei és hőmérővel ellátott edény) a hőmérséklet ne emelkedjék 10 °C fölé. A folyamat gyorsítása céljából a reakcióedényt jég-konyhasó keverékkel hűtjük. A becsepegtetés befejezése után a reagáltatást azonnal befejezzük. (Követés vékonyrétegkromatografálással, éterben: a kiindulási anyag Rf értéke 0,8, a reakciótermék Rf értéke vízzel végzett hidrolízis után 0,0). A jégfürdőt eltávolítjuk és a reakcióelegyet erős keverés közben etanol-amin (1,5 mól, 92 g) és trietüamin (1,8 mól 180 g) 1 liter dioxánnal készített oldatához csepegtetjük úgy, hogy a reakcióedényben a hőmérséklet 65-70 °C-ra emelkedjék. így a gyűrűzárást teljessé tesszük (követés vékonyrétegkromatográfiával, éterben, RF érték - 0,2). A kiváló trietüaminhidrokloridot még melegen szűrjük és a szűrlethez 40- 50 °C-on 1,5 liter 2 n hangyasavat adunk. 15 perc alatt a gyűrűzárás teljesen lejátszódik (követés vékonyrétegkromatografálással, éterben, Rf = 0,0; ldoformmetanol-ecetsav-víz 100:60:20:5 térfogat arányú rendszerben, Rf - 0,8). A reakcióelegyet-20 °C-ra hűtjük, a csapadékot szűrjük. A csapadék messzemenően tiszta, hexadedl-foszfoetanolamin. A csekély szennyezettséget kromatográfiás tisztítással tüntetjük el (lásd például a 2. példát). Mikroelemzés (molekulasúly 365,50): elméletileg számított (%): C 59,15; H11,03; N 3,83; P 8,48; mért (%): C 59,01; H10,95; N 3,79; P 8,31. Az 1. példa reakciótermékének metüezése: Az 1. példában leírtak szerint előállított kristályos anyagot további tisztítás nélkül 1,2 liter 2-propanol és 0,4 diklór-metán elegyében felvesszük. A kristályos anyag szuszpenziójához erős keverés közben káliumkarbonát (4 mól, 560g) 1 liter vízzel készített oldatát adjuk. A kétfázisú reakciókeverékhez dimetüszulfátot (4 mól, 500 g) csepegtetünk keverés közben úgy, hogy a hőmérséklet ne emelkedjék 40 °C fölé. A reakció a becsepegtetés után 60perccel teljesen lejátszódik (követés vékonyrétegkromatografálással, kloform-metanol-25%os ammónia 5050:5 térfogatarányú rendszerben: Rf - 0,3). A fázisokat 20 °C-on elválasztjuk, a terméket a felső fázis tartalmazza. Az oldószert forgó bepárlóban távolít juk el, vákuumban és a viszkózus maradékotszilikagélen kromatografáljuk (Merck Art 7733, szüikagél 60, szemcsenagyság 0,2-05 mm). Kromatográfia 2 kg szilikagélt adunk k)oform-metanol-25%-os ammónia 200:15:1 térfogatarányú elegyhez és egy kromatografáló oszlopba töltjük. A viszkózus olajat a fenti oldószerelegy 800 ml-ében oldjuk és a nyersterméket rátöltjük az oszlopra (az oldhatatlan részeket előzőleg kiszűrjük). Emelkedő polaritásé oldószereleggycl a szennyeződéseket kimossuk. A terméket végül kIoform-metanol-25%-os ammóniaoldat (50:50:5 térfogatarányú elegy) elegyével eluáljuk. Az egyesített eluátumokat forgóbepárlóban pároljuk be, a maradék vizet toluollal távolít juk el. A maradékot 600 ml diklór-metánban felvesszük és 4 liter acetont adunk hozzá. A -20 °C-nál kiváló kristályos anyagot hideg acetonnái, majd pentánnal mossuk és vákuumban szárítjuk. Termelés körülbelül 250 g tiszta hexadecilfoszfokolin (körülbelül 70%-os termelés a hexadecilglicerinre vonatkoztatva). Mikroelemzés (molekulasúly 40,7,58): elméletileg számított: (%) C 59,27; H 11,37; N 3,29; P 7,28; mért: (%) C58,98;H 11,31;N3,21;P7,11. Példák gyógyászati készítmények előállítására: Oldal készítése: 25 g l-n-propiloxi-2,3-propándiolt, 1,2,5 g 1-n-hexiloxi-2,3-propándiolt, 12,5 g l-nonüoxi-2,3-propándiolt,44 g vizet és 1 gfenoxi-etanolt összekeverünk és ebben a keverékben 5 g hexadecil-foszfokolint oldunk Az oldatból kiszűrjük a lebegő részeket. 1 g oldat 50 mg hexadecil-foszfokolint tartalmaz. Kenőcs készítése: 5 g hexadecil-foszfokolint szuszpendálunk 35 gsű-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 5
