203115. lajstromszámú szabadalom • Eljárás reningátló hatású peptidek és ilyen vegyületeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
7 HU 203 115 B 8 hol, polietilénglikol, glicerin, triacetát és egyéb zsírsav-gliceridek, a zselatin, a szójalecitin, a szénhidrátok, például a laktóz vagy keményítők, magnézium-sztearát, talkum, cellulóz. Orális alkalmazáshoz megfelelnek a tabletták, drazsék, kapszulák, szirupok, levek vagy cseppek, előnyösek azok a bevont tabletták és kapszulák, amelyeknek gyomorsav ellenálló bevonatuk, illetve kapszulaburkuk van. Rektális adagolásra szolgálnak a kúpok, parenteralis alkalmazásra oldatok, előnyösen olajos vagy vizes oldatok, valamint szuszpenziók, emulziók vagy implantátumok. Inhalálással történő alkalmazáshoz olyan spray kiszerelési formát alkalmazhatunk, amelyek a hatóanyagot oldva vagy szuszpendálva tartalmazzák egy vivőgáz keverékben, például fluorozott szénhidrogénekben. Célszerűen a hatóanyagot ilyenkor mikronizált formában alkalmazzuk és egy vagy több további fiziológiailag alkalmas oldószert is használunk, például etanolt. Az inhalációs oldatok szokásos inhalálókészülékekkel adagolhatók. A találmány szerint előállított vcgyülctek liofílizálhatók is, és a kapott lifolizátumot injekciós készítmények előállítására lehet használni. A készítmények sterilizálhatók és/vagy további segédanyagokat, például konzerválószereket, stabilizálószereket és/vagy nedvesítőszereket, emulgeátorokat, az ozmótikus nyomás szabályozására szolgáló sókat, pufferanyagokat, színező- és/vagy aromaanyagokat is tartalmazhatnak. A találmány szerint előállított anyagokat általában más, ismert kereskedelmi forgalomban kapható peptidekhez hasonlóan adagoljuk. Utalunk itt a 163 237, 173 481 és 209 897 számú európai szabadalmi leírásokban ismertetett adagolásra, egy adagolási egység előnyösen 100 mg és 30 g közötti, különösen előnyösen 500 mg és 5 g közötti hatóanyagot tartalmaz. A napi adag előnyösen 2 és 600 mg/kg, különösen 10- 100 mg/kg testtömeg. Az adott beteg esetén alkalmazandó dózis azonban különböző tényezőktől függ. így például az adott vegyület hatékonyságától, a beteg életkorától, testtömegétől, általános egészségi állapotától, nemétől, táplálkozásától, az adagolás időközétől és módjától, a kiválasztás sebességétől, a hatóanyagkombinációtól, az adott betegség súlyosságától függ. Előnyös a parenteralis alkalmazás. A reninfüggő magas vérnyomást és hiperaldoszteronizmust hatékonyan lehet 1 és 300, előnyösen 5 és 50 mg/kg testtömeg hatóanyag adagolásával kezelni. Diagnosztikai célból a találmány szerint előállított vegyületeket célszerűen 0,1 és 10 mg/kg testtömeg közötti cgységdózisban adagoljuk. A következőkben a találmányt példákkal illusztráljuk. A hőmérsékleteket 'C-ban adjuk meg. A példákban a „szokásos feldolgozás” a következőket jelenti: Szükség esetén az elegyhez vizet adunk, a végtermék szerkezetétől függően a pH értéket 2 és 8 közé állítjuk be, extrahálást végzünk etil-acetáttal vagy diklór-metánnal, a fázisokat elválasztjuk, a szerves fázist nátrium-szulfát felett szárítjuk, leszűrjük, az oldószert lcdcsztilláljuk, az általában olajos nyersterméket gélszűrésnek vetjük alá, térhálósított poldextránon metanol/víz vagy ecetsav/víz, mint eluálószer alkalmazásával, az oldatot újra bepároljuk és szilikagélen kromatografálva vagy kristályosítással tisztítjuk. Amikor gélszűrésnél az eluálószer ecetsavat tartalmaz, akkor az (I) általános képletű vegyületet acetát formában kapjuk meg, vagyis An = CH3COO. 1. példa 1,123 g N-2-[3S-hidroxi-4S-(N-metil-l-morfolinil-acetil-L-fenil-alanil-N(imi)-(2,4-dinitro-fenil)-L-hisztidil-amino)-5-ciklohexil-pentanoil-L-izoleucil-amino]-ctil-N,N,N-trimctil-ammónium-diacctát („N-2-fN-metil-1 -morfolini l-acetil-Phe-(imi-DNP-His)-AHCP-Ile-amino|-ctil-N,N,N-trimctil-ammónium-diacctát”, amelyet úgy kapunk, hogy N-metil-N-karboxi-metil-morfolínium-acetátot N-2-[H-Phe-(imi-DNP-His)-AHCP-Ile-amino]-etil-N,N,N-trimetil-ammónium-acetáttal reagáltatunk), 2 g 2-merkapto-etanol, 20 ml dimetil-formamid és 20 ml víz keverékének a pH-ját keverés közben 20 “C-on vizes nátrium-karbonát oldattal 8-ra állítjuk be és az elegyet 2 órán keresztül 20 °C-on kevcijük. Szokásos feldolgozás után N-2-(N-mctil-l-morfoliniI-acetil-Phe-His-AHCP-Ile-amino)-etil-NJsí,N-trimetil-ammónium-diacetátot kapunk. Op.: 74-87 ’C. Rf = 0,17 (szilikagélen, eluálószerként metanol/ecetsav/víz 70 : 10 : 20 térfogatarányú keverékét használjuk). 2. példa 10 g N-2-[N-mctil-l-morfolinil-acetil-Phe-(imi- BOM-His)-AHCP-Ile-amino]-etil-N,N,N-trimetil-ammónium-diacetátot (amelyet úgy állítunk elő, hogy N-2- -[N-mctil-l-morfolinil-acetil-Phe-(imi-BOM-His)-AHCP-Ile-amino]-etil-amint metil-jodiddal reagáltatunk és ammónium-acetáttal nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással tisztítjuk) 150 ml etanolban feloldunk és 5 g 10 tömeg%-os csontszénre vitt palládiumon 20 *C-on 1 bar nyomáson a hidrogénfelvétel befejezéséig hidrogénezzük. Ezután a reakcióelegyet leszűrjük, az oldószert lcdesztilláljuk, és a maradékot kromatográfiás eljárással tisztítjuk. N-2-(N-metil-l-morfilinil-acetil-Phe-His-AHCP-Ile-amino)-etil-N,N,N-trimctil-ammónium-diacetátot kapunk. Op.: 74-87 "C. A megfelelő imi-BOM-His származékból hasonló eljárással állítjuk elő a következő vegyületeket: 2-trimetil-ammónio-3-fenil-propionil-His-AHCP-Ile-AMPA-acetát, 2-benzil-4-trimetil-ammónio-butiril-His-AHCP-Ile--AMPA-acetát, 2-benzil-5-trimetil-ammónio-pentanoil-His-AHCP-Ile-AMPA-acctát, N-(4-trimetil-ammónio-butil)-karbamoil-Phe-His-AHCP-Ile-AMPA-acetát, 2-benzil-3k(N-3-trimetil-ammónio-propil-karhamoil)-propionil-His-AHCP-Ile-AMPA-acetát. 3. példa 6,66 g H-Phe-Gly-AHCP-Ile-ADPA-t (amelyet úgy állítunk elő, hogy BOC-Phe-Gly-AHCP-Ile-OH-t 2- -amino-3-amino-metil-5,6-dimetil-pirazinnal kondenzáljuk, és a kapott BOC-Phe-Gly-AHCP-Ile-ADPA-ból a BOC csoportot lehasíljuk) 160 ml DMF-ben oldunk és hozzáadunk 1,01 g N-metil-morfolint. A reakciőelegyhez keverés közben hozzáadunk l,82gN-(3-karboxi-prapil)-N,N,N-trimetil-ammónium-kloridot, 1,35 g HOBt-t és 2,06 g DCCI50 ml metilén-kloriddal készített oldatáL A reakcióelegyet 12 órán keresztül 4 ”C-on keverjük, majd a kivált diciklohexil-karbamidot leszűrjük és a szűrlctct bepároljuk. A szokásos feldolgozás után 4-trimetil-ammónium-butiril-Phe-Gly-AHCP-Ile-ADPA-kloridot kapunk. Op.: 148-150 *C. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
