203043. lajstromszámú szabadalom • Eljárás Euphorbia hirta L. növényt vagy annak részeit ill. azok kivonatát tartalmazó daganat- és fekélyellenes gyógyászati készítmények előállítására
HU 203043 B A találmány tárgya eljárás új, rákos daganatok és fekélyes megbetegedések ellen hatásos gyógyszerkészítmének előállítására az Euphorbia hirta L. növényből vagy annak részeiből. Az Euphorbia hirta L. növény trópusi és szubtrópusi vidékeken fordul elő, a növényrészeit és annak főzeteit vagy kivonatait már javasolták amöbás fertőzések és bélférgek, valamint hasmenés elleni szerként. Ennek a korábbi javaslatnak az alapján rendkívül meglepő volt az a felismerés, hogy az ebből a növényből forró vízzel vagy vizes alkohollal készített kivonatok, illetőleg az ezekből előállított folyékony vgy szilárd gyógyszerkészítmények jó eredménnyel alkalmazhatók rákos vagy fekélyes megbetegedések gyógykezelésére. Erre a felismerésre az Euphorbia hirta L. növénnyel vagy az abból készített főzetekkel szerzett eddigi tapasztalatok semmilyen alapot nem szolgáltattak, hiszen az amőbás vagy bélférges fertőzések vagy akár a hasmenés elleni hatás nem áll kapcsolatban a rákos és egyéb rosszindulatú megbetegedések és fekélyek elleni hatással. Eddig még nem tapasztaltak az ismert amőbavagy bélféreg-ellenes szereknél rák- vagy fekélyellenes hatást, sem pedig az eddig ismert és alkalmazott rák- vagy fekélyellenes szerek esetében nem számoltak be bélféreg- vagy amőbaellenes hatásról. Ismeretes az is, hogy az eddig több-kevesebb eredménnyel alkalmazott gyógyszerkészítmények legnagyobb része erősen toxikus és alkalmazásuk ezért veszélyes és különös elővigyázatosságot igényel. Éppen ezért fordult különösen újabb időben az érdeklődés a természetes eredetű, nem vagy csak kevéssé toxikus szerek felé a rák és egyéb rosszindulatú megbetegedések gyógykezelése terén. Ezért bír különös jelentőséggel az a felismerés, hogy az egyáltalán nem toxikus Euphorbia hirta L. növény, valamint annak vizes vagy vizes-alkoholos kivonatai és az ezekből elkülönített szárazanyagok igen jó hatást mutatnak a daganatos és fekélyes megbetegedések, továbbá gombás fertőzések és nyílt sebek gyógykezelése terén. E felismerés alapján a találmány tárgya eljárás daganatos vagy fekélyes megbetegedések, gombás fertőzések és nyílt sebek gyógykezelésére alkalmas gyógyászati készítmények előállítására, amelyek hatóanyagként az Euphorbia hirta L. növény részeit, vizes vagy vizes-alkoholos kivonatát vagy az ezekből elkülönített szárazanyagát tartalmazzák. Az Euphorbiaceák családjába tartozó Euphorbia hirta L. növény trópusi és szubtrópusi vidékeken fordul elő. Ezt a növényt, illetőleg annak kivonatait — mint már említettük — amőbás fertőzések, férgek, valamint hasmenés ellen ajánlották. A találmány kidolgozása során viszgálatok irányultak az Euphorbia hirta kivonataiban jelenlévő hatóanyag, illetőleg hatóanyagok kémiai természetének felderítésére is. Bár ezek a vizsgálatok még nem zárultak le, már többféle olyan anyag jelenléte volt a növény kivonataiban azonosítható, amelyek vagy legalább egy részük feltételezhetően közrejátszik a felismert új gyógy hatásban. A növény vizes vagy vizes-alkoholos kivonataiban, illetőleg magukban a szárított növényi részekben kimutatható hatóanyagok azonosítására vonatkozó vizsgálataink eddigi eredményeit az alábbiakban ismertetjük: 1 Szárított Euphorbia hirta L. növényanyag fitokémiai azonosítása és minősítése. A légszáraz Euphorbia hirta herbájának fitokémiai analízisével az alábbi vegyületcsoportok azonosíthatók: flavonol glikozidok, amelyek aglikonja túlnyomórészt kvercetin és kvercetin 7-metilészter; cserző hatású növényi polifenolok, ß-szitoszterin kampeszterin, sztigmaszterin és triterpén típusú származékok. Az azonosítás módja: a) Flavonoidok: 0,50 g drogot a DAB 8 módszere szerint 20 ml acetonban, 4 ml cc sósav és 1,5 ml 1 %os hexametiléntetramin jelenlétében 30 percig 100 “C-on, vízfürdőn hidrolizáljuk, majd belőle 100 ml-es acetonos törzsoldatot készítünk. Ebből 50 ml-t 50 ml desztillált vízzel elegyítünk, és etilacetáttal kimerítően extraháljuk. Az etilacetátos fázisokat desztillált vízzel semlegesre mossuk és vízmentes nátriumszulfáton szűrjük; csökkentett nyomáson szárazra pároljuk és metanolban oldjuk (2,00 ml). A törzsoldat 5-10 pi es részleteit kromatográfiás módszerrel (vékonyrétegkromatográfia, magasnyomású folyadékkromatográfia), referencia anyagok felhasználásával azonosítjuk. Pl. vékonyrétegkromatográfia Hordozó: szilikagél-GF254 (Merck) 0,2 mm Kifejlesztő rendszer: toluol:jégecet:etil-acetát.’víz (3:16:50:4) Reagens: Natursloff reagens (Wagner), UV366nm b) Polifenolok: jelenlétükre a növényminta metanolos kivonatának kromatográfiás tanulmányozásával vizsgálunk. Pl. vékonyrétegkromatográfia Hordozó: szilikagél-GF254 (Merck) 0,2 mm Kifejlesztő rendszer: kloroform:etü-acetát:jégecet:víz) (5:5:1,1:3) Reagens: 1%-os alkoholos FeCb c) Szterinolok és triterpének: 1,0-1,0 g porított növénymintát Soxhlet készülékben vízfürdőn kimerítően extrahálunk n-hexánnal (A kivonat) és kloroformmal (B kivonat). Az A és B kivonatokat különkülön szárazra pároljuk csökkentett nyomáson, 40 °C-on. A maradékokat egyenként elszappanosítjuk úgy, hogy 5-5 ml 5%-os alkoholos kálium-hidroxid oldattal 90 percig forró vízfürdőn refluxáljuk. A reakcióidő letelte után 1%-os ammóniumszulfúttal hígítjuk és dietiléterrel kimerítően extraháljuk. Az éteres fázisokat vízmentesítés után szárazra pároljuk, és 1-1 ml kloroformban oldjuk, majd vékonyrétegkromatográfiás módszerrel, referencia anyagok felhasználásával vizsgáljuk. Hordozó: szilikagél-GF254 (Merck) Kifejlesztő rendszer: benzol:metanol:izopropiléter (180:7,5:22,5) Reagens: 5%-os alkoholos foszformolibdénsav, majd 5 perces melegítés (100 °C) Az Euphorbia hirta-ból előállított tinktúra, liofilizátum és száraz extraktum mindegyikében azonosíthatók a jellemző flavonoidok, polif enolok és szterinolok, triterpének. A különösen jellemző flavonoidokra vonatkozólag mennyiségi meghatározást is végeztünk a DAB 8 (8. Német Gyógyszerkönyv) módszere szerint: a száraz drog 0,50-0,80 tömeg% hiperozidban kifeje2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
