202921. lajstromszámú szabadalom • Eljárás humán tumor nekrózis faktort kódoló DNS, továbbá annak alkalmazásával a fenti faktornak megfelelő polipeptid, és hatóanyagként egy fenti polipeptidet tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 202 921 B 2 azzal jellemezve, hogy a megfelelő cDNS-eket klónozzuk. (Elsőbbsége: 1984. 03. 06.) 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás olyan (Y)p-(X)n-(B)m-A (I) általános képlető aminosavszekvenciát kódoló DNS, vagy a 3’- végen terminációs kodont tartalmazó fenti bázisszekvencia előállítására, ahol a képletben A jelentése az 1. igénypontban megadott (la) képlető polipeptid, B jelentése az 1. igénypontban megadott (Ib) képlető peptid, m értéke 1, n értéke 0, és Y és p jelentése az 1. igénypontban megadott, azzal jellemezve, hogy a megfelelő cDNS- eket klónozzuk. (Elsőbbsége: 1984. 03. 06.) 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás olyan (Y)p-(X)„-(B)m-A © általános képlető aminosavszekvenciát kódoló DNS, vagy a 3’- végen terminációs kodont tartalmazó fenti bázisszekvencia előállítására, ahol a képletben A jelentése az 1. igénypontban megadott (la) képlető polipeptid, Thr Pro Ser Asp Lys Val Alá Asn Pro Gin Gin Trp Leu Asn Arg Leu Alá Asn Gly Val Gin Leu Val Val Pro Leu lie Tyr Ser Gin Gin Gly Cys Pro Ser Thr His Thr Ile Ser Tyr Gin Thr Lys Val Ile Lys Ser Pro Cys Glu Gly Alá Glu Alá Pro Ile Tyr Leu Gly Glu Lys Gly Asp Arg Asn Arg Pro Asp Tyr Ser Gly Gin Val Tyr Leu n és m értéke 0, és Y és p jelentése az 1. igénypontban megadott, azzal jellemezve, hogy a megfelelő cDNS-eket klónozzuk. (Elsőbbsége: 1984. 08. 17.) 5 6. Az 1. igénypont szerinti eljárás olyan (Y)p-(X)n-(B)m-A (I) általános képlető aminosavszekvenciát kódoló DNS, vagy a 3’-végen terminációs kodont tartalmazó fenti bázisszekvencia előállítására, ahol a képletben 10 A jelentése olyan (la) képlető polipeptid, amelyből egy vagy több aminosav hiányzik, vagy más aminosavval van helyettesítve, de a homológia mértéke legalább 95%, m és n értéke 0, és 15 Yésp jelentése az 1. igénypontban megadott, azzal jellemezve, hogy a megfelelő cDNS- eket klónozzuk. (Elsőbbsége: 1984. 08. 17.) 7. Eljárás az (Y)p-(X)n-(B)m-A (I) általános képlető humán tumor nekrózis faktor polipeptid - a képletben A jelentése Pro Val Ala His Val Alá Glu Gly Gin Leu Arg Ala Asn Ala Leu Glu Leu Arg Asp Asn Ser Glu Gly Leu Tyr Val Leu Phe Lys Gly Thr His Val Leu Leu Arg Ile Ala Val Ser Asn Leu Leu Ser Ala Gin Arg Glu Thr Pro Lys Pro Tip Tyr Glu Gly Val Phe Gin Leu Leu Ser Ala Glu Ile Leu Asp Phe Ala Glu Phe Gly Ile Ile Ala 20 képlető polipeptid, amelyből egy vagy több aminosav hiányozhat, vagy más aminosavval lehet helyettesítve, de a homológia mértéke legalább 95%, B jelentése Ser-Ser-Ser-Arg (Ib) képlető peptid, amelyből 1-3 aminosav hiányozhat, X jelentése az érett TNF-ben nem szereplő, teljes vagy vagy részleges prekurzor-szekvencia, Y jelentése Met és m, n és p értéke 1 vagy 0 -, előállítására, azzal jellemezve, hogy a humán tumor nekrózis faktor polipeptidet kódoló 1. igénypont szerinti eljárással előállított DNS-t kívánt esetben egy heterológ polipeptidet kódoló DNS-sel összekapcsolunk, egy expressziós vektorba illesztünk, a rekombináns vektorral Escherichia colit transzformálunk, a transzformáit baktériumot tenyésztjük, és a tenyészetből kinyerjük a polipeptidet. (Elsőbbsége: 1984. 03. 06.) 8. Az 7. igénypont szerinti eljárás olyan (Y)p-(X)n-(B)m-A (I) általános képlető polipeptid előállítására, amelynek képletében A, B, Y, m, n és p jelentése a 7. igénypontban megadott, és X jelentése 45 50 55 Ser Thr Glu Ser Met Ile Arg Asp Val Glu Leu Ala Glu Glu Ala Leu Pro Lys Lys Thr Gly Gly Pro Gin Gly Ser Arg Arg Cys Leu Phe Leu Ser Leu Phe Ser Phe Leu Be Val 32
