202913. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nyomelemekkel dúsított magas biológiai értékű növényi szervek és szövettenyészetek és ezeket tartalmazó diétás-, kozmetikai- és gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 202 913 B 2 magas nyomelem-tartalmú növényi anyag koncentrációja mintegy 0,5-90 tömeg % a teljes keverékre vonatkoztatva, vagyis ezen belül olyan érték, amely szükséges a kívánt dózisszint eléréséhez. A készítmények előállíthatók például oly módon, hogy a növényi port oldószerrel és/vagy hordozóanyaggal keverjük el, adott esetben emulgeáló és/vagy diszpergáló szerek alkalmazásával. Abban az esetben, ha hígítószerként vizet használunk, segédoldószerként adott esetben szerves oldószereket is alkalmazhatunk. Alkalmas segédanyagok például a víz, a nem toxikus szerves oldószerek, így a paraffinok (például kőolajfrakciók) a növényi olajok (például mogyoró- vagy szezámolaj), az alkoholok (például etanol, glicerin), a szilárd hordozóanyagok, például természetes kőzetlisztek (például kaolin, agyag, talkum, kréta), a mesterséges szervetlen porok (például magas diszperzitásfokú kovasav vagy szilikátok), a cukrok (például nád-, tej- és szőlőcukor), az emulgeálószerek (például poli(oxi-etilén)-zsirsav-észter, poli(oxi-ézster-zsíralkohol-éter, alkilszulfonát, aril-szulfonát), a diszpergálószerek [például lignin, szulfit-szennylúg, metil-cellulóz, keményítő és poli(vinil-pirrolidon)] és a csúsztatóanyagok (például magnézium-sztearát, talkum, sztearinsav és nátrium-lauril-szulfát). Az adagolást a szokásos módon végezzük, előnyösen orálisan. Orális adagolás esetén a tabletta a fent felsorolt hordozóanyagok mellett természetesen egyéb anyagokat, így nátrium-citrátot, kalcium-karbonátot és dikalcium-foszfátot is tartalmazhat, más adalékanyagokkal, így keményítővel, előnyösen burgonyakeményítővel, zselatinnal és más hasonló anyaggal együtt. A tablettázáshoz alkalmazhatók még csúsztatóanyagok, így magnézium-sztearát, nátrium-lauril-szulfát és talkum is. Orális adagolásra szánt vizes szuszpenzió esetén a hatóanyagok a fent felsorolt segédanyagok mellett különböző ízanyagokkal és színezőanyagokkal is keverhetők. Kozmetikai célokra történő felhasználáshoz a magas nyomelem-tartalmú növényi port önmagában ismert módon a szokásos kozmetikai készítményekké alakítjuk. Előnyösen alkalmazható készítmények a testápolók, arckrémek, hidratáló krémek, regeneráló krémek, szemránckrémek, különböző gélek és zselék, maszkok, valamint samponok, habfürdők és fogápolási készítmények. A kozmetikai készítmények előállításához a növényi por mellett felhasználhatók folyékony hordozók, így víz, alkohol (például etanol és glicerin), paraffin olaj, növényi olajok (például napraforgó olaj), szintetikus olajok (például szilícium olaj), glicerin-észterek (például glicerin-monosztearát) és zsíralkoholok (például cetilakohol), továbbá emulgeálószerek, így ionos vagy nemionos emulgeálószerek (például poli(oxi-etilén)-zsírsav-észter, poli(oxi-etilén)-zsíralkohol-éter, alkil-szulfonát és aril-szulfonát), gélképzők (például alginátok, polivinil-karbonsav), továbbá egyéb adalék anyagok, így avasodásgátlók (például butil-hidroxi-toluol), konzerválószerek, illat- vagy aromaanyagok és színezőanyagok. A készítmények a találmány szerint előállított növényi por mellett egyéb ismert hatóanyagokat is tartalmazhatnak. Különösen kedvező hatást érhetünk el élettani hatással rendelkező csíraolajok alkalmazásával. Előnyösen használhatók a hidegen sajtolt növényi olajok, például a kukoricacsíra-olaj, búzacsíra-olaj, tökmagolaj, ligetszépe-olaj, szója-olaj, valamint ezek keveréke. A találmányt közelebbről az alábbi példákkal szemléltetjük. A példa után megadjuk az elért nyomelemtartalom szintjét, ahol a zárójelben megadott érték a nyomelem nélküli tápközegben tenyésztett kontroll növény nyomelem-tartalmát jelöli. 1. példa A 3%-os hidrogén-peroxiddal fertőtlenített babszemeket (Phaseolus vulgaris) csíráztatjuk 0,5 mM CaSCU tartalmú folyadékon, amely ÍO^-IO"1 koncentráció sorig nagyságrendi emelkedésben nyomelemdusításként kobalt-kloridot is tartalmaz. A csíráztatást koncentrációkként 50 maggal végezzük 25 °C-on 14 napig. Ezt követően megállapítjuk azt a legmagasabb kobalt koncentrációt, amit a bab még jó növekedéssel elbír (4,2*10" 3 M), és az itt növekedett csíranövények leveleit és gyökerét tovább visszük, klónozzuk steril körülmények között. A gyökér és a levél darabkákat módosított szilárd White táptalajon növesztjük a már megállapított legalkalmasabb kobalt koncentrációval kiegészítve. A White táptalaj összetétele a következő: 0,36 g/1 magnézium-szulfát, 0,26 g/1 kalcium-nitrát, 0,2 g/1 nátrium-szulfát, 0,08 g/1 kálium-nitrát, 0,065 g/1 kálium-klorid, 0,165 g/1 nátrium-hidrogén-foszfát, 3 mg/1 mangán-szulfát, 04 nig/1 cink-szulfát, 0,5 mg/1 bórsav, 0,025 mg/1 réz-szulfát, 1 mg/1 vas-citrát, 7,5 mg/1 glicht, 1,25 mg/1 niacin, 0,25 mg/1 tiamin HC1, 0,25 mg/1 piridoxin HC1,0,25 ml kalcium-pantotenát, 2 mg/1 indol-ecetsav, 20 g/1 szacharóz, 8 g/1 agar-agar. A növesztést 28 ‘C között végezzük, megvilágítást 16 órás periódusokként alkalmazunk. A levél- és a gyökérrészecskékből az agar-agar nélküli folyékony Gamborg (B5) táptalajon szuszpenziós kultúrát készítünk és ebben növesztjük őket tovább folyamatosan működő tenyésztő reaktorban 22 °C-on 28 napig. A kobaltban dús növényi részeket centrifugálással vagy szűréssel összegyűjtjük, feltárjuk, szárítjuk és előkészítjük a felhasználásra. 2. példa Mindenben az 1. példa szerint járunk el, azzal a különbséggel, hogy minden esetben Gamborg (B5) táptalajt alkalmazunk. Ennek során a bab Co-tartalma mikronizált légszáraz gyökérmerisztéma eredetű szövet szuszpenzióból 460 ng/g (180 jig/g) értékre növekszik. 3. példa Mindenben az 1. példa szerint járunk el, azzal a különbséggel, hogy a csíráztató oldathoz és a táptalajhoz a desztillált víz helyett 50% mennyiségben Parádi ásványvizet adunk. A növényi anyag átveszi az alkalmazott víz mikroelem összetételét. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 4